CO2协同低温有水对卵形鲳鲹麻醉保活效果的影响

杜 欢，秦小明，范秀萍，张家胜，李盛基

CO2协同低温有水对卵形鲳鲹麻醉保活效果的影响

杜 欢，秦小明，范秀萍，张家胜，李盛基

（ 广东海洋大学食品科技学院 // 广东省水产品加工与安全重点实验室 // 广东省海洋食品工程技术研究中心 // 水产品深加工广东普通高等学校重点实验室，广东 湛江，524088）

【目的】探究二氧化碳CO2麻醉协同低温对卵形鲳鲹有水保活的影响，延长卵形鲳鲹（）的保活时间。【方法】研究保活过程中CO2质量浓度、麻醉时间、麻醉温度和鱼质量水比对卵形鲳鲹有水保活时长的影响；在最佳麻醉保活条件下，测定其血清生化指标、肌肉及肝脏氧化应激指标及代谢指标。【结果】卵形鲳鲹在16 ℃、100 mg/L CO2水溶液中麻醉3 min其麻醉效果最佳。在15 ℃低温下进行有水保活，鱼水质量比为2∶1，存活时间最长，为（359±2）min，此条件下复苏率达100%。经过CO2麻醉协同低温有水保活后的卵形鲳鲹血清谷草转氨酶（GOT）活性显著升高（＜0.05）、尿素氮（BUN）和甘油三酯（TG）含量上升，血糖含量下降。肌肉中的乳酸脱氢酶（LDH）活性显著上升（＜0.05），乳酸（LD）和糖原含量上升，过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量下降；肝脏中的LDH活性显著上升（＜0.05）、CAT活性和LD的含量上升，MDA和糖原的含量下降。【结论】CO2协同低温有水对卵形鲳鲹有较好的麻醉效果，有助于保活运输。在保活过程中卵形鲳鲹通过提升能量代谢水平和抗氧化能力应答环境应激，在一定程度上影响卵形鲳鲹保活过程的存活时间。

卵形鲳鲹；二氧化碳麻醉；低温；有水保活；血清生化；氧化应激；代谢

卵形鲳鲹（），属于硬骨鱼纲鲈形目鲹科鲳鲹属[1]，主要分布在我国热带及亚热带海域，是湛江市主要经济养殖类之一[2]。卵形鲳鲹肉中不饱和脂肪酸含量高，富含亚油酸、二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA），营养丰富、肉质鲜美[3]，但其在运输中常因激烈挣扎导致外皮破损、撞伤等因素会使代谢速率加快、激素水平的上升[4]，极易引起品质受损甚至死亡，因此卵形鲳鲹长途运输保活技术亟待发展。

二氧化碳（CO2）因其无毒、无药性消退期的优势，麻醉后的鱼可直接进入市场，引起研究者们广泛关注[5]。目前国内CO2麻醉技术主要应用在水产品保活，杨丰等[6]发现，罗氏沼虾（）在生态冰温结合CO2麻醉技术下保活时间更长，可达到48 h，存活率高于90%，虽对虾体肝脏和心肌造成损伤，但在一定时间内能保证虾体正常生存；周翠平等[7]发现，用CO2麻醉罗非鱼（）的无水组ATP降解速度比有水组快，得出有水保活比无水保活机体体能消耗小的结果。而国外CO2麻醉主要应用在宰杀前和安装鱼类遥测发射器前，Erikson等[8]将CO2麻醉技术应用在宰杀大西洋鲑（）上，发现麻醉宰杀后的大西洋鲑鱼在冷冻贮藏1 ～ 2周后其营养价值与刚捕捞上来的鲑鱼没有差异；Christopher等[9]将CO2麻醉应用在梭鲈（）植入手术，将鱼类遥测发射器植入鱼体内以监测鱼的生长变化参数，可见CO2在水产品麻醉上具有较好效果。目前，CO2结合低温有水保活卵形鲳鲹的研究尚未见报道。

基于此，本研究采用CO2麻醉卵形鲳鲹后进行低温有水保活，探究在CO2麻醉卵形鲳鲹的较佳麻醉液浓度、麻醉时间、麻醉液温度等保活条件下，保活复苏后卵形鲳鲹的生理生化指标、氧化应激指标的变化情况，探明其对卵形鲳鲹的保活运输的影响，以期为卵形鲳鲹的保活运输提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

卵形鲳鲹，购自湛江市东风市场，体质量（490±30）g，挑选无外伤、鳞片完整、体长相近的鱼体于塑料桶中停食暂养，暂养密度26.7 g/L，海水盐度20 ～ 25，水温24 ～ 26 ℃，采用砂滤循环海水（650 L/h），25 L/min空气泵充氧，保证水体溶解氧质量浓度为6 ～ 8 mg/L，暂养6 h后用于试验。

尿素氮BUN测定试剂盒（货号 C013-2-1）、葡萄糖GLU测定试剂盒（货号A154-1-1）、甘油三酯TG测定试剂盒（货号 A110-1-1）、谷草转氨酶GOT测定试剂盒（货号 C010-2-1）、过氧化氢酶CAT测定试剂盒（A007-2-1）、丙二醛MDA测定试剂盒（货号A003-1-1）、乳酸脱氢酶LDH测定试剂盒（货号A020-2-2）均购于南京建成生物工程研究所；皮质醇测定试剂盒（货号ml-E4005）购于上海酶联生物科技有限公司；糖原测定试剂盒（货号BC0345）、乳酸测定试剂盒（货号BC2235）均购于北京索莱宝科技有限公司。

1.2 主要仪器与设备

TP688便携式温度计，温州市德福智能科技有限公司；Varioskan全自动酶标仪，美国Thermo Fisher 公司；双光束紫外可见分光光度计，北京谱析通用仪器有限责任公司；CO2麻醉设备由CO2钢瓶、氧气钢瓶、玻璃鱼缸等相关部件构成。

1.3 二氧化碳协同低温有水保活卵形鲳鲹的条件优化

1.3.1 卵形鲳鲹麻醉及复苏行为特征评估 参考范兴[10]的鱼类麻醉和复苏的判定标准，并根据卵形鲳鲹的表形和生物特性做相应修改，具体见表1。鱼死亡的判定是通过鱼尾部的敲打无反应或鱼眼的反射。

表1 卵形鲳鲹在不同麻醉和复苏阶段的行为表现

1.3.2 CO2常温麻醉条件优化

1.3.2.1 CO2麻醉浓度的确定 选取健康的卵形鲳鲹在水温（25±1）℃，海水盐度20 ～ 25，暂养24 h；同时将CO2气瓶连接气石（氧泵供氧量为6 mg/L）放入鱼缸中，对卵形鲳鲹（每次放入1尾）进行麻醉，在麻醉液温度为25 ℃条件下，将卵形鲳鲹（每次1尾）分别放入质量浓度为70、100、165 mg/L（pH值分别为5.9、5.7、5.5）的CO2水溶液中进行麻醉至A3级；每个麻醉浓度选取6尾鱼重复3次以上实验，观察实验卵形鲳鲹的行为特征，记录卵形鲳鲹所需的麻醉时间及在海水中的复苏时间。

1.3.2.2 CO2麻醉时间的确定 暂养条件同1.3.2.1节。在25 ℃水温下，将卵形鲳鲹放入100 mg/L CO2溶液中分别浸浴1、3、5、7 min后放入清水中复苏至R4级，记录复苏率。以上4组实验皆同时通入相同速率的O2供给鱼体呼吸，每个重复用鱼6尾。

1.3.3 CO2麻醉温度对卵形鲳鲹保活的影响 暂养条件同1.3.2.1节。根据不同CO2浓度对卵形鲳鲹的麻醉效果，选择质量浓度为100 mg/L的CO2溶液，分别在16、19、22和25 ℃的水温下进行麻醉，麻醉后30 min内未能复苏的鱼记为死亡，记录该条件下卵形鲳鲹所需麻醉时间和复苏时间。另分别在16、19、22和25 ℃的温度下用100 mg/L的CO2溶液麻醉卵形鲳鲹，装袋充氧后于15 ℃生化培养箱进行无水保活[10]，每组各取6尾鱼，观察不同麻醉液温度下相同保活温度的卵形鲳鲹保活时间。

1.3.4 鱼水质量比对卵形鲳鲹保活的影响 暂养条件同1.3.2.1节。由保活麻醉温度实验的保活时间，选取16 ℃为麻醉温度，采用0.5 ～ 1.0 ℃/h梯度降温到达16 ℃后，将卵形鲳鲹投入到质量浓度为100 mg/L的CO2水溶液中，同时通入O2，麻醉后将卵形鲳鲹放置在鱼水质量比分别为1∶0、

2∶1、1∶1、1∶2的袋中充氧打包后，放进15 ℃的生化培养箱进行无水保活，各取6尾鱼，观察不同鱼水比下卵形鲳鲹的保活时间。

1.4 CO2协同低温有水保活对卵形鲳鲹的影响

1.4.1 卵形鲳鲹有水保活处理 卵形鲳鲹按照1.3.2.1节条件暂养6 h后，使用碎冰以2 ℃/h梯度使水温降至20 ℃，再以0.5 ～ 1.0 ℃/h梯度降温到16 ℃，最后以1 L/min的流量向水中通入CO2至水溶液中CO2质量浓度为100 mg/L待其完全进入麻醉后，取出装入袋中，使鱼水质量比保持2∶1。充入纯O2，每袋装入1尾鱼，置于15 ℃培养箱中保活，随机从桶里取出3尾取样测定肌肝指标、血清指标，作为新鲜组（CK）。将剩余卵形鲳鲹分为4组，每组6尾，第1组为CO2麻醉后的鱼未进行保活，即保活0 h，作为麻醉对照组；第2组为CO2麻醉后的鱼保活3 h组，第3组为保活6 h组，第4组为保活6 h后的复苏6 h组。每组随机取3尾测定相关指标。卵形鲳鲹尾部静脉取血，将血液注入10 mL离心管中，4 ℃静置2 ～ 3 h，3500 r/min下离心20 min，取上血清，置于4 ℃冰箱备用，并取背部肌肉与肝脏，液氮处理后放-80 ℃冷冻备用。

1.4.2 指标测定 血清中BUN、Glu、TG、GOT含量、CAT活性和MDA含量，均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。Cortisol含量用酶联免疫法测定（= 0.783 6- 0.038 9，2= 0.993 9）；Gly、LD含量和LDH活性，使用Gly试剂盒、LD试剂盒和LDH试剂盒，采用试剂盒说明书对肝脏与肌肉样品进行制备与检测。

1.5 数据处理

应用SPSS 26.0软件对实验数据进行统计分析，结果以平均值±标准差表示。组间差异比较采用单因素方差分析，对于复苏率非正态分布数据采用平方根反正弦变换后进行统计分析，两两比较方差齐时采用 LSD 检验法，方差不齐时采用 Dunnett’s T3 进行比较。0.05表示有显著差异，图表的绘制采用Origin 2017软件。

2 结果与分析

2.1 卵形鲳鲹CO2麻醉协同低温有水保活条件的确定

2.1.1 CO2常温麻醉条件的优化

2.1.1.1 CO2麻醉浓度对麻醉时间及复苏时间的影响 图1中随CO2水溶液的麻醉浓度上升，卵形鲳鲹麻醉时间呈增加趋势，且变化显著（＜0.05），而对应的复苏时间有所下降。MARKING等[11]发现，控制麻醉时间在3 min以内，复苏时间在5 min以内时麻醉液浓度最佳。CO2质量浓度为70 mg/L时麻醉时间比CO2质量浓度为100 mg/L时长89 s， CO2质量浓度为165 mg/L时复苏时间比CO2质量浓度为100 mg/L时长100 s，均导致机体耗能大。CO2水溶液质量浓度为100 mg/L进行麻醉鱼处理时，麻醉时间为（321±5）s，复苏时间为（279±8）s，综合认为，100 mg/L为较佳的CO2麻醉质量浓度。

凡含一个相同字母表示同一指标差异不显著（P＞0.05）

2.1.1.2 CO2麻醉时间对复苏时间及复苏率的影响 在图2(A、B)中显示，在麻醉时间3 min时，复苏时间最短，为（305±21）s，复苏率100%。即3 min为最佳麻醉时间。麻醉5 min的复苏时间比麻醉1 min长258 s，这可能是因为鱼体长时间浸泡于麻醉液时，会导致鱼体呼吸和血管舒缩中枢被麻醉液麻醉[12]。但其中麻醉1 min的复苏时间比麻醉3 min的复苏时间长91 s，这是因为此时鱼麻醉深度不足，鱼脑中的修复基因未来得及修复，导致细胞受损，复苏阶段需要更长的反应时间。

凡含一个相同字母表示差异不显著（P＞0.05）

2.1.2 麻醉温度对鱼体保活时间的影响 图3(A、B)可看出，CO2麻醉液温度16 ℃时麻醉时间为（158±2）s，比19 ℃时卵形鲳鲹的麻醉时间缩短1.13倍；复苏时间为（1 004±9）s，复苏时间较19 ℃长12.25%；保活时间为（111±7）min，比19 ℃长30.59%。可能是因为16 ℃接近卵形鲳鲹的生态冰温的温度，使其更容易进入休眠状态，所以麻醉时间短。虽然25℃麻醉时间和复苏时间符合MARKING等[11]发现，但相对于16 ℃，25 ℃对鱼体的耗能大，保活时间为（37±5）min不利于保活运输；且16 ℃时麻醉时间在3 min以内，复苏时间较长方便鱼的保活预处理，因此16 ℃为较佳的麻醉温度。但16 ℃无水保活时间为（111±7）min，无水保活时长不到2 h，因此卵形鲳鲹运输过程中需要通过一定的鱼水质量比延长其保活时间。

2.1.3 不同鱼水质量比对保活时间的影响 由图4可看出，鱼水质量比1∶0时（即无水保活），卵形鲳鲹保活时间为（111±3）min；鱼水质量比为2∶1时，卵形鲳鲹保活时间为（359±2）min，比1∶0时保活时间多2.23倍。可能是因为与对含氧量要求较低的鲆鲽类等相比，卵形鲳鲹等需氧量较大的洄游性鱼类，较难实现无水保活运输[13]。完全无水不符合卵形鲳鲹的生存环境，保活袋中的水能使其鳃和皮肤湿润，减少鱼腮上的表皮黏液，更好地进行有氧呼吸；且鱼水质量比2∶1比例下，实际操作更方便，能够节约用水成本和运输成本。

凡含一个相同字母表示同一指标差异不显著（P＞0.05）

凡含一个相同字母表示差异不显著（P＞0.05）

2.2 CO2协同低温有水保活对卵形鲳鲹血清生化指标的影响

图5(A)中，卵形鲳鲹经CO2麻醉后血糖浓度显著下降（< 0.05），而在复苏6 h时恢复到初始水平。其中保活3 h的血糖含量比0 h少50.94%，保活6 h时比0 h少54.72%。麻醉后血糖下降是因为保活过程中卵形鲳鲹因应激供能需要加快糖酵解，导致血糖下降。卵形鲳鲹复苏6 h时血糖浓度比新鲜组上升4.15%。

图5(B)中，血清中皮质醇质量浓度保活过程中无显著差异，复苏6 h后也无显著差异（> 0.05）。皮质醇在保活开始时上升，在保活结束复苏6 h后下降。其中皮质醇上升可能是因为2∶1的鱼水比改变鱼的生活环境，造成一定的应激，复苏时下降是因为回到正常的生存环境，但皮质醇激素水平显著高于新鲜组水平（< 0.05）。

凡含一个相同字母表示差异不显著（P＞0.05）

谷草转氨酶GOT活性的变化间接反映肝脏受损程度。图6(A)中，卵形鲳鲹经二氧化碳结合低温有水保活后血清中的GOT活性显著上升（＜0.05），复苏后下降。这是因为当卵形鲳鲹受到刺激时，肝脏中GOT会释放到血清中，导致血清中的GOT活性上升。表明经CO2和低温协同保活后，随着保活时间的延长，肝脏损伤会加重。

图6(B)中，保活后卵形鲳鲹血清中的甘油三酯TG浓度显著升高（＜0.05），保活3 h和6 h分别是0 h的1.09倍和1.60倍；复苏6 h时下降，是新鲜组的1.39倍。

尿素氮BUN含量的变化可以反映肾脏功能的代谢状况。图6(C)中，保活后卵形鲳鲹血清中的尿素氮浓度显著升高（＜0.05）。复苏6 h时尿素氮浓度基本恢复至新鲜组水平。

凡含一个相同字母表示差异不显著（P＞0.05）

2.3 CO2协同低温有水保活对卵形鲳鲹糖原与乳酸含量、乳酸脱氢酶活性的影响

图7(A)卵形鲳鲹保活中肝糖原质量分数显著下降（＜0.05）。保活3 h比0 h少5.92%，保活6 h比0 h少18.09%；复苏6 h后仍显著低于新鲜组（＜0.05），少14.72%，说明肝糖原在复苏后尚未得到完全恢复。肌肉糖元被分解而肝糖原在保活过程中变化不显著，肌糖原复苏6 h比新鲜组多6.48%，可能是因为此时鱼处于饥饿状态，血液中葡萄糖无法满足鱼体的需要。

图7(B)中，肌肉与肝脏的乳酸LD质量摩尔浓度在保活和复苏整个过程中均呈先上升后下降的趋势，肌肉中LD质量摩尔浓度在保活和复苏过程中变化不显著（> 0.05），复苏6 h比新鲜组多22.22%。肝脏LD质量摩尔浓度保活时显著高于新鲜组样品（＜0.05），复苏6 h比新鲜组多28.57%。说明肝脏受损比肌肉受损严重，这可能也是随着保活时间延长卵形鲳鲹复苏率下降的重要原因之一。

图7(C)中，在卵形鲳鲹保活复苏过程中，肌肉乳酸脱氢酶LDH活性先下降后上升。肌肉LDH活性保活3 h为0 h的1.28倍，保活6 h为0 h的1.39倍，复苏6 h为新鲜组的1.31倍。肝脏LDH的活性呈先上升后下降的变化，在整个保活和复苏过程中差异不显著（> 0.05）。保活0 h的肝脏LDH活性最高，保活3 h比0 h下降27.91%，保活6 h比0 h下降19.15%，复苏6 h时为新鲜组的2.59倍，说明肝脏受损程度在复苏后并未得到完全恢复。

凡含一个相同字母表示同一组织差异不显著（P＞0.05）

图7（续）

Fig. 7（Continued）

2.4 CO2协同低温有水保活卵形鲳鲹保活过程对CAT活性及MDA含量的影响

图8(A)中，卵形鲳鲹在保活复苏过程中肌肉过氧化氢酶CAT活性呈先下降后上升趋势。与保活0 h相比，保活3 h活性减少61.42%，保活6 h活性减少75.82%，复苏组比新鲜组少62.43%。肝脏CAT活性在保活复苏过程中呈先上升后下降的趋势，与保活0 h相比，保活3 h活性升高1.62倍，保活6 h升高2.91倍，复苏6 h是新鲜组的2.68倍。这可能是因为保活过程中卵形鲳鲹的肝脏出现氧化应激的反应，需要补充CAT对其进行消除。

丙二醛MDA含量作为评价脂质过氧化的指标。图8(B)中，卵形鲳鲹在保活复苏过程肌肉与肝脏MDA质量摩尔浓度均下降后上升，且整个过程均显著低于新鲜组（＜0.05）。可能是因为在CAT等的作用下，卵形鲳鲹脂质过氧化水平有所降低。

凡含一个相同字母表示同一指标差异不显著（P＞0.05）

3 讨论

3.1 CO2质量浓度、麻醉时间、水温及鱼水比对卵形鲳鲹麻醉效果及保活效果的影响

3.1.1 CO2质量浓度、麻醉时间对卵形鲳鲹麻醉效果影响 卵形鲳鲹在CO2质量浓度为165 mg/L麻醉时，比100 mg/L的复苏时间增加24.37%。这可能是鱼浸泡于高麻醉液时，会导致的神经中枢处于深度麻醉，导致鱼体复苏时间延长，甚至死亡[12]。当CO2麻醉质量浓度为100 mg/L时，卵形鲳鲹的复苏时间随着麻醉时间的升高而降低，麻醉时间越高，复苏率越低。其中麻醉1 min比麻醉3 min的复苏时间长，主要是因为在缺氧环境中，（基因）可以激活抗氧化酶活性使神经元再生等方式保护脑内神经细胞[14 -15]，麻醉1 min时鱼脑中的基因未能及时反应，细胞受损导致复苏时间延长。实验发现，CO2麻醉质量浓度为100 mg/L时，卵形鲳鲹产生的应激反应较小；当CO2麻醉质量浓度为165 mg/L时，卵形鲳鲹在短时间内出现激烈撞击麻醉缸、跳跃现象，表明鱼体对高浓度麻醉液产生激烈的应激反应。本实验得出，CO2麻醉卵形鲳鲹的较佳质量浓度为100 mg/L，这与CO2麻醉鳊（）（90 mg/L）[16]所得的质量浓度相近，与CO2麻醉鲢（）（155±15）mg/L[17]和大口黑鲈()（200 mg/L）[18]研究结果差别较大。这可能是因为不同种类的鱼有不同的代谢速率，由于鱼种类差异，相同的麻醉剂对不同鱼的麻醉效果和适宜麻醉浓度具有一定差异[19]。综合考虑，在25 ℃常温下100 mg/L的CO2麻醉液麻醉3 min为卵形鲳鲹的最佳麻醉条件。

3.1.2 CO2麻醉水温及鱼水比对卵形鲳鲹保活效果的影响 一般情况下，水体温度越高，鱼类的代谢强度越强，氧气消耗量越大，相对保活时间下降。吴云辉等[20]研究在不同温度环境下半滑舌鳎（）的存活率发现，3 ℃时半滑舌鳎存活率最高。水温的降低可以减缓鱼的代谢速率，降低氧气消耗，是减少水中氨的产生的主要条件之一，减少溶氧的消耗，从而提高保活运输时间。本研究发现，16 ℃为卵形鲳鲹保活预处理最佳麻醉温度。

降低鱼水比是保活运输中重点考虑的经济成本，无水保活为最佳状态。但由于水产动物的生物学特性，在保活过程中不同鱼的最大鱼水比不同。本实验结果表明，选择鱼水质量比2∶1的保活条件对卵形鲳鲹保活运输时间有积极影响。

3.2 CO2麻醉协同低温有水保活过程中对卵形鲳鲹血清生化指标、肌肉及肝脏指标变化的影响

卵形鲳鲹经暂养一段时间后运输时，鱼处于肌饿状态，血液葡萄糖不能及时提供鱼体消耗的能量，鱼体进行无氧代谢，分解肌糖原，糖原产生乳酸。与丁亚涛等[16]发现CO2麻醉保活运输鳊过程中肌糖原与肌肉LD上升的变化趋势一致。肝脏与肌肉组织中的LD上升与糖元分解产生乳酸有关，因鱼类利用肝糖元的能力差，主要分解肌糖元[21]。本研究发现，卵形鲳鲹在保活运输过程中肝脏受损比肌肉受损程度大，这可能也是随着保活时间的延长复苏率下降的重要原因之一。

鱼类的应激、代谢和行为受到下丘脑-垂体-肾间轴(HPI) 的调控[22]。皮质醇作为鱼体应激指标，可以快速反映鱼体激素水平。本研究中与新鲜组相比，麻醉后的卵形鲳鲹血清皮质醇含量升高，与Mohammad等[23]研究一致。而卵形鲳鲹经CO2麻醉后在保活过程中皮质醇的变化不显著，表明CO2麻醉对卵形鲳鲹的保活应激有一定的安抚作用。

血液尿素氮含量的变化能够反映肾功能的代谢情况。保活6 h时卵形鲳鲹血液中尿素氮含量上升，可能是因为保活过程中低温胁迫应激导致其肾功能失常。保活中卵形鲳鲹血清的TG含量随着保活时间的延长而增加，可能是因为保活过程中鱼活性变弱，脂质利用率降低，未能起到供能作用。王美垚[24]也发现，吉富罗非鱼（）在低温胁迫下无氧代谢增强，有氧与脂代谢受限，血清中TG上升。GOT是反应鱼体应激响应的重要指标，是肝脏连接糖、脂质、蛋白质代谢中重要的酶。研究发现，保活0 h ～ 6 h组GOT酶活性显著升高（＜0.05），这可能是因为鱼体受到刺激响应，供能不足，需要分解糖等能量物质或其肝脏受到了一定损伤，这也是卵形鲳鲹比鳊[16-18]等保活时间短的原因之一。

LDH主要存在于心肌细胞和肾脏中，其活性增强能反映心肌细胞和肾脏的受损程度[25]。与新鲜组相比，保活0 h组的肝脏LDH活性显著上升（＜0.05），表明CO2麻醉会对卵形鲳鲹造成肝脏损伤。

保活0 h组肌肉与肝脏CAT活性均增强，表明CO2麻醉对鱼体造成一定的应激，在保活0 h ～ 3 h组肌肉中的CAT显著下降（＜0.05），可能是因为在保活袋中溶氧下降鱼体受到低氧胁迫损伤[26]。而保活0 h ～ 3 h组中肝脏CAT的活性上升，可能是由于氧化应激的损伤，故肝脏会通过CAT等酶来对其进行消除。与周文等[27]发现史氏鲟（）在低温保活运输中CAT活性变化一致。与新鲜组相比，保活0 ～ 6 h组肌肉与脏中MDA均呈下降趋势，可能是因为保活时间的延长及在CAT等的作用下脂质过氧化水平降低，与低温休眠保活珍珠龙胆石斑鱼（）的结果[28]一致。

4 结论

本研究采用绿色安全的CO2在16 ℃下麻醉质量浓度为100 mg/L CO2水溶液中对卵形鲳鲹麻醉3 min后，其麻醉效果最佳，在低温下进行有水保活，鱼水质量比为2∶1，存活时间最长，为（359±2）min，此条件下复苏率达100%。CO2麻醉协同低温有水保活卵形鲳鲹过程中，血清谷草转氨酶活性、尿素氮和甘油三酯含量上升，血糖含量下降；肌肉中的乳酸脱氢酶活性、糖原和乳酸含量上升，过氧化氢酶活性、丙二醛含量下降；肝脏中的乳酸脱氢酶活性、过氧化氢酶活性、乳酸含量上升，糖原和丙二醛含量下降。可见CO2协同低温有水保活对卵形鲳鲹的应激响应主要在能量代谢和氧化应激方面，提示在实际保活运输中可加入一定剂量绿色安全的抗应激剂，减缓保活过程中低温胁迫的损伤。

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Synergistic Effect of CO2and Low Water Temperature on the Anesthesia and Survival of

DU Huan, QIN Xiao-ming, FAN Xiu-ping, ZHANG Jia-sheng, LI Sheng-ji

（,//////,524088,）

【Objective】 In order to prolong the survival time ofand explore the effect of carbon dioxide ( CO2) anesthesia combined with low temperature on the water survival of. 【Methods】 Effects of CO2concentration, anesthesia time, anesthesia temperature and fish-water mass ratio on survival time ofwere studied. Under the optimal survival conditions, the serum biochemical indexes, oxidative stress indexes and metabolic indexes of muscle and liver were determined. 【Results】was anesthetized in 100 mg/L CO2aqueous solution at 16 ℃ for 3 min, and the anesthetic effect was the best. The fish was kept alive with water at 15 ℃, and the fish-water ratio was 2∶1. The longest survival time was (359±2) min, and the recovery rate was 100%. After preservation, the serum GOT activity increased significantly (< 0.05), BUN and TG content increased, and blood glucose content decreased. LDH activity in muscle increased significantly (< 0.05), LD content increased, CAT activity, glycogen and MDA content decreased ; lDH activity in liver increased significantly (< 0.05), CAT activity, glycogen and LD content increased, MDA content decreased.【Conclusion】Synergistic effect of CO2and low water temperature has good anesthetic effect on, which is helpful to keep alive and transport. In the survival process,responds to environmental stress by improving energy metabolism and antioxidant capacity, which affects the survival time of.

; carbon dioxide anesthesia; low temperature；water preservation; serum biochemistry; Oxidative stress; metabolism

TS254.1

A

1673-9159（2022）01-0035-09

10.3969/j.issn.1673-9159.2022.01.006

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2021-10-10

“十三五”国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”重点专项（2019YFD0901601）

杜欢（1996―），女，硕士研究生，研究方向为卵形鲳鲹生态冰温保活运输技术。E-mail：1027428913@qq.com

秦小明（1964―），男，博士，教授，研究方向为水产品加工与保活流通。E-mail：xiaoming0502@21cns.com

（责任编辑：刘朏）