植物精油对2种石榴采后病原真菌的抑菌效果

姚 昕，涂 勇

(西昌学院农业科学学院，四川 西昌 615013)

石榴(Punicagranatum)，为石榴科石榴属植物，属落叶灌木或小乔木，由于其籽粒晶莹多汁，酸甜适宜，营养丰富，深受消费者的欢迎。目前我国石榴栽植面积已位居世界首位，四川攀西地区更是成为了国内最大的石榴产区[1]。石榴贮藏期果皮易发生褐变、皱缩、病害等问题，进一步扩展至籽粒易发生变色、变味甚至腐烂，极大地影响了其商品价值，而多种病原菌协同作用是导致腐烂变质主要原因之一。植物精油为天然植物的提取物，往往含有抑制病原菌的生物活性成分，具有显著的抑菌活性和广泛的抗菌谱范围，且其副作用小、残留毒性低，具有作为天然防腐剂的潜在价值，已成为当下果蔬保鲜领域研究的热点之一[2-4]。本试验选取15种植物精油，初步研究了其对2种石榴采后病原真菌的抑制效果，以期为石榴新型植物源保鲜剂的探究提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试石榴 石榴品种为突尼斯软籽，2020年8月26日采摘于四川省凉山州西昌市黄联关镇。挑选果形完整、无病虫害、无机械损伤的果实。

1.1.2 供试菌株 供试菌株为石榴垫壳孢(Coniellagranati)和灰葡萄孢菌(Botrytiscinerea)，由西昌学院石榴贮藏与加工研究课题组提供。

1.1.3 供试精油 薄荷油、桉叶油、肉桂油、生姜油、大蒜油、丁香油，均为单方精油，购自江西雪松天然药用油有限公司；茶树油、迷迭香油、鼠尾草油、香茅油、百里香油、连翘油、艾叶油、橘子油、山苍籽油，均为单方精油，江西惜缘香料有油限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 菌种活化 将供试菌株接至马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上，25℃恒温培养5d。

1.2.2 牛津杯法测定抑菌圈直径 采用牛津杯法[5]，测定2种供试菌株对植物精油原液的抗敏性。取单个菌饼置于PDA培养基中心，在距中心等距离处放置3个牛津杯(d=5mm)，杯内注入精油原液，25℃恒温培养4d，十字交叉法测量抑菌圈直径(cm)。

1.2.3 室内毒力测定 采用生长速率法[6]，将初筛选出的7种植物精油分别以少许吐温-80进行溶解，配制成浓度为2000.0μL/L、1000.0μL/L、500.0μL/L、250.0μL/L、100.0μL/L、50.0μL/L、25.0μL/L和12.5μL/L含植物精油培养基，以吐温-80为对照，每个浓度重复3次，接种供试菌株于培养基中心，25℃恒温培养5d，十字交叉法测量菌落直径(cm)，计算抑制率及毒力回归方程，求出EC50和EC90。

1.2.4 精油熏蒸对石榴果实的保鲜防腐效果 石榴果实用PE袋(厚度0.01mm)整体包装装箱，将优选出的2种植物精油按照室内毒力试验计算出的EC90配置相应处理浓度，均匀涂布在滤纸(14.0cm×10.0cm)上并贴于保鲜膜内侧，25℃下贮藏，第25d时统计各处理组石榴果实腐烂个数及腐烂等级，计算腐烂率和腐烂指数[7]。每个处理30个果实，重复3次。

1.3 数据分析

采用Excel 2010和 SPSS19.0进行数据处理和分析。

2 结果与分析

2.1 植物精油对2种石榴采后病原真菌的抑制效果

如表1所示，15种供试植物精油对2种石榴采后致病真菌菌丝生长均有不同程度的抑制效果，其中香茅油、薄荷油、鼠尾草油、桉叶油、茶树油、迷迭香油和肉桂油7种植物精油具有较好的抑制效果，其抑菌圈直径均在6.00cm以上，而百里香油和橘子油抑制效果较差，其抑菌圈直径均不足2.00cm。

表1 植物精油对2种石榴采后致病真菌的抑制效果

2.2 7种抑菌效果较好的植物精油对2种石榴采后病原真菌的毒力测定

进一步对初筛出的7种植物精油进行室内毒力测定，由表2可知，茶树油和桉叶油毒力相对较强，茶树油对2种致病真菌EC50分别为32.2795μL/L和64.9449μL/L，EC90分别为644.1509μL/L和682.3139μL/L，平均EC50和EC90为48.6122μL/L和663.2324μL/L，桉叶油对2种致病真菌EC50分别为分别为56.5131μL/L和42.5192μL/L，EC90分别为714.3943μL/L和443.3824μL/L，平均EC50和EC90为49.5162μL/L和578.8884μL/L，两者差异不明显。此外，香茅油对灰葡萄孢菌也具有较好的抑制作用，其EC50和EC90分别为44.9724μL/L和580.1205μL/L。

表2 7种抑菌效果较高的植物精油对2种石榴采后致病真菌的毒力测定

2.3 植物精油对石榴采后病害的控制效果

将茶树油和桉叶油对石榴进行熏蒸处理，贮藏过程果实腐烂率和腐烂指数的变化情况见表3。由表3可知，茶树油和桉叶油均能一定程度上抑制石榴贮藏期的腐烂。贮藏21d时，桉叶油和茶树油处理组腐烂率分别为16.67%和20.83%，腐烂指数分别为0.20和0.25，均显著低于对照组(P>0.05)，而此时对照组腐烂率和腐烂指数已达到33.33%和0.41。

表3 2种植物精油处理对石榴贮藏期的影响

3 结果与讨论

植物精油对2种石榴采后病原真菌的抑菌效果试验结果表明，茶树油和桉叶油能有效地抑制2种病原真菌菌丝的生长，并能较好地控制贮藏期石榴的腐烂。目前国内还未见利用植物精油控制石榴采后病害的相关报道，但在其他果蔬产品上较多。潘小军等[8]以黄瓜炭疽病菌为试验材料，研究了13种植物精油的抑菌效果，其中肉桂皮油、牛至油和丁香油效果较好，能有效地延长黄瓜的贮藏期，延缓其品质的下降。王丹等[8]研究5种植物精油对蓝莓采后黑斑病病原菌的影响，发现肉桂皮油对链格孢菌菌丝生长具有较强的抑制作用，能够一定程度上降低蓝莓果实黑斑病的发病率，对蓝莓采后黑斑病具有较好的防治作用。刘瑞玲等[10]选用6种植物精油对红肉火龙果采后病原菌进行抑菌性试验，结果显示香芹酚精油对层生镰刀菌和平头炭疽菌的抑菌效果最好。近年来新型保鲜剂在石榴上的应用效果及其安全性报道较少，而植物精油作为一种新型抑菌剂值得进一步探索，以期筛选出高效、安全、能对石榴采后多种病原菌的进行综合防治的方法。此外，由于植物精油、病原菌和果实之间的交互作用较为复杂，在考虑杀菌、防腐的同时，还需要对果实其他方面的品质指标进行综合考量，因此，植物精油对于石榴的保鲜效果及抑菌机制还有待进一步研究。