不同杀菌剂对烟草赤星病菌室内毒力测定

蔡 梁，胡长志，张文梅，李松宴，崔汝强*

不同杀菌剂对烟草赤星病菌室内毒力测定

蔡 梁1，胡长志2，张文梅2，李松宴1，崔汝强1*

（1. 江西农业大学农学院，江西南昌 330045；2. 抚州市烟草公司广昌分公司，江西广昌 344000）

【目的】筛选防治烟草赤星病的有效药剂。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定7种杀菌剂对烟草赤星病菌（）的毒力作用。【结果】菌丝生长速率法中56%啶酰·肟菌酯、50%啶酰菌胺、30%肟菌·戊唑醇、72%霜脲·锰锌、80%戊唑醇、30%丙硫菌唑、50%氯溴异氰尿酸的EC50值分别为0.152 5，0.160 3，0.242 0，1.813 7，4.566 3，14.845 7，86.976 1 mg/L，孢子萌发法中50%啶酰菌胺、50%氯溴异氰尿酸、56%啶酰·肟菌酯、72%霜脲·锰锌、80%戊唑醇、30%肟菌·戊唑醇、30%丙硫菌唑的EC50值分别为0.127 2，0.133 3，0.208 8，1.319 1，1.821 8，3.128 2，27.045 8 mg/L。供试的7种杀菌剂中对菌丝生长的抑制效果最好的是56%啶酰·肟菌酯，EC50值为0.152 5 mg/L；对孢子萌发的抑制效果最好的是50%啶酰菌胺，EC50值为0.127 2 mg/L。【结论】56%啶酰·肟菌酯和50%啶酰菌胺可优先作为烟草赤星病田间防治实验用药，72%霜脲·锰锌和30%肟菌·戊唑醇可用作交替使用杀菌剂。

烟草赤星病菌；杀菌剂；毒力测定

【研究意义】烟草赤星病是由(Fr.) Keissler引起的一种叶部真菌性病害[1]，主要发生在烟叶成熟后期，严重影响烟叶的产量和品质，从而造成不同程度的经济损失[2-3]。【前人研究进展】烟草赤星病是一种典型的流行病，流行速度快，潜育期短，在烟草生长季节可多次反复侵染植株[4-5]。烟草赤星病一般从植株下部叶片向上部逐渐扩展，发病初期呈现黄褐色小斑点，后逐渐扩大为圆形或长圆形的深褐色病斑[6]，病斑呈现多重同心轮纹，同时轮纹上有绒毛状褐色霉层，霉层为病原菌的分生孢子和分生孢子梗[7-8]。烟草赤星病发病严重时，常导致多个病斑相连，使得病斑处穿孔破裂，从而导致整片烟叶破碎而失去经济价值[9]。【本研究切入点】目前烟草赤星病的防治主要以化学防治为主[10]，市面上防治效果较好的药剂主要为菌核净和多抗霉素，由于长期大量使用这2类药剂，导致了抗药性和农药残留的产生，在部分烟区已经表现出防效降低现象，以及菌核净禁用等现象[11-12]，为此需要筛选更多低毒、高效、降解速度快的杀菌剂，为烟草赤星病的防治提供帮助。【拟解决的关键问题】本研究以56%啶酰·肟菌酯、50%啶酰菌胺、30%肟菌·戊唑醇、72%霜脲·锰锌、80%戊唑醇、30%丙硫菌唑、50%氯溴异氰尿酸这7种杀菌剂为材料，测定其室内毒力，以期为烟草赤星病的化学防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

烟草赤星病菌（）由江西农业大学农学院植物病理实验室-80 ℃下保存，使用前活化。

1.2 供试药剂

56%啶酰·肟菌酯SC（京博农化科技有限公司）、50%啶酰菌胺WG（巴斯夫中国有限公司）、30%肟菌·戊唑醇SC（浙江中山化工集团股份有限公司）、72%霜脲·锰锌WP（京博农化科技有限公司）、80%戊唑醇WP（陕西先农生物科技有限公司）、30%丙硫菌唑SC（安徽久易农业股份有限公司）、50%氯溴异氰尿酸WP（绿亨科技集团股份有限公司）。

1.3 供试药剂对病原菌的毒力测定

1.3.1 菌丝生长速率法 将供试菌株接种于PDA平板上，25 ℃恒温培养7 d，制备直径为1 cm的菌饼备用。各供试药剂先用无菌水配置成母液，再用无菌水稀释，配置成6个不同浓度梯度的药液。各药剂的试验浓度梯度为：0.1，0.5，1，5，10，50 mg/L。分别取1 mL稀释液加入装有9 mL灭菌PDA培养基的三角瓶中，摇匀后倒入直径10 cm的培养皿内，凝固后制成含药平板培养基。将直径为1 cm的菌饼接种于含药PDA培养基上。对照组为加无菌水的PDA培养基，每个处理3次重复。将接种后的培养基置于25 ℃培养箱中黑暗培养，7 d后用“十字交叉法”测量菌落直径。计算各处理组菌落增长直径及菌丝生长抑制率[13]。菌丝生长抑制率按下式计算。

菌丝生长抑制率=（对照组菌落增长直径-处理组菌落增长直径）/对照组菌落增长直径×100% （1）

1.3.2 孢子萌发法 用无菌水配置孢子悬浮液（105～106孢子/mL）。各待测药剂浓度梯度与菌丝生长速率法中的浓度梯度相同。用移液枪吸取20 μL孢子悬浮液于凹玻片内，再分别加入20 μL各浓度梯度的药液，配成含药剂的孢子悬浮液。对照组为加入等量无菌水，每个处理3次重复。将凹玻片置于培养皿内25 ℃黑暗保湿培养，24 h后镜检孢子萌发情况，每个处理随机观察3个视野，共100个孢子。计算孢子萌发率及药剂对孢子萌发的抑制率[13]。孢子萌发率和萌发抑制率分别按以下公式计算。

孢子萌发率=孢子萌发数/检查孢子总数×100% （2）

孢子萌发抑制率=（对照组孢子萌发率-处理组孢子萌发率）/对照组孢子萌发率×100% （3）

1.4 数据处理

数据采用SPSS25.0软件进行统计分析。以各药剂浓度的对数为横坐标（x），抑制率的几率值为纵坐标（y），求出各药剂对供试菌株的毒力回归方程及有效抑制中浓度（EC50值）和相关系数（R2）。

2 结果与分析

2.1 7种杀菌剂对菌丝生长的抑制作用

7种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长的抑制作用测定结果见表1，不同浓度下56%啶酰·肟菌酯对烟草赤星病菌菌丝生长抑制效果见图1。由表1可知7种杀菌剂抑制菌丝生长的EC50值介于0.152 5～86.976 1 mg/L，其中56%啶酰·肟菌酯、50%啶酰菌胺、30%肟菌·戊唑醇、72%霜脲·锰锌、80%戊唑醇这5种杀菌剂对菌丝生长的抑制活性较强，其EC50值分别为0.152 5，0.160 3，0.242 0，1.813 7，4.566 3 mg/L，而30%丙硫菌唑和50%氯溴异氰尿酸对菌丝生长的抑制活性弱，其EC50值分别为14.845 7，86.976 1 mg/L，均显著大于10 mg/L。

图1 不同浓度下56%啶酰·肟菌酯对烟草赤星病菌菌丝生长抑制效果

表1 7种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长的抑制作用测定结果

图2 各药剂浓度为1 mg/L时对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制效果

2.2 7种杀菌剂对孢子萌发的抑制作用

7种杀菌剂对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制作用测定结果见表2，各药剂浓度为1 mg/L时对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制效果见图2。由表2可知7种杀菌剂抑制孢子萌发的EC50值介于0.127 2～27.045 8 mg/L，其中50%啶酰菌胺、50%氯溴异氰尿酸、56%啶酰·肟菌酯、72%霜脲·锰锌、80%戊唑醇、30%肟菌·戊唑醇这6种杀菌剂对孢子萌发的抑制活性较强，其EC50值分别为0.127 2，0.133 3，0.208 8，1.319 1，1.821 8，3.128 2 mg/L。但30%丙硫菌唑对孢子萌发的抑制活性较低，其EC50值为27.045 8 mg/L，显著大于10 mg/L。

表2 7种杀菌剂对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制作用测定结果

3 结论与讨论

本试验采用菌丝生长速率法和孢子萌发法分析了7种杀菌剂对烟草赤星病菌的毒力，结果表明，50%啶酰菌胺、56%啶酰·肟菌酯、72%霜脲·锰锌、30%肟菌·戊唑醇对菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制效果，其中50%啶酰菌胺和56%啶酰·肟菌酯的抑制效果最为显著。本结果与沈宏等[14]、陈杰等[15]对烟草赤星病菌药剂筛选的研究结果类似。啶酰菌胺通过叶面渗透在植物中转移，抑制线粒体琥珀酸酯脱氢酶，阻碍三羧酸循环，干扰细胞的分裂和生长，对病害有神经活性[16]。啶酰·肟菌酯通过细胞色素b与c1之间的电子传递而阻止细胞ATP合成，从而抑制其线粒体呼吸而发挥抑菌作用[15]。本试验还发现50%氯溴异氰尿酸对于菌丝生长的抑制活性不强，但对于孢子萌发的抑制活性较强，因此该药物适合在发病前期孢子萌发阶段进行预防应用。30%丙硫菌唑对菌丝生长和孢子萌发的抑制活性均不强，因此不建议使用该药剂对赤星病菌进行防治。

基于本试验结果，建议在进行烟草赤星病田间防治时可优先选用50%啶酰菌胺和56%啶酰·肟菌酯，72%霜脲·锰锌和30%肟菌·戊唑醇可以用作交替使用杀菌剂。本试验只在室内测定了药剂对菌丝生长和孢子萌发的抑制活性，对烟草实际生产中的药剂防治效果有待进一步研究。

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Determination of Laboratory Toxicities of Different Fungicides on Tobacco Brown Spot

CAI Liang1, HU Changzhi2, ZHANG Wenmei2, LI Songyan1, CUI Ruqiang1*

(1. School of Agronomy Science, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China; 2. Guangchang Branch of Fuzhou Tobacco Company, Guangchang, Jiangxi 344000, China)

This study was conducted to screen effective fungicides for the prevention and control of tobacco brown spot.The virulence of seven fungicides againstwere determined by mycelial growth rate method and spore germination method.The EC50values of 56% boscalid-oxime, 50% boscalid, 30% oxime tebuconazole, 72% fenoxycarb-manganese zinc, 80% tebuconazole, 30% prothioconazole and 50% chlorobromoisocyanuric acid in the mycelial growth rate method were 0.152 5, 0.160 3, 0.242 0, 1.813 7, 4.566 3, 14.845 7, 86.976 1 mg/L. While, the EC50values of 50% boscalid, 50% chlorobromoisocyanuric acid, 56% boscalid-oxime, 72% thiram-manganese zinc, 80% tebuconazole, 30% oxime tebuconazole, and 30% prothioconazole in the spore germination method were 0.127 2, 0.133 3, 0.208 8, 1.319 1, 1.821 8, 3.128 2, 27.045 8 mg/L. The control effect of 56% boscalid-oxime onin tobacco was the best inhibitor of mycelial growth among the seven fungicides, with EC50of 0.152 5 mg/L; and, the best inhibitor of spore germination was 50% boscalid, with EC50of 0.127 2 mg/L.56% boscalid-oxime and 50% boscalid could be preferred for experimental field prevention and control of tobacco brown spot, and 72% fenoxycarb-manganese zinc and 30% oxime tebuconazole could be used as alternate fungicides.

; fungicide; toxicity test

S435.72

A

2095-3704（2021）04-0465-04

蔡梁, 胡长志, 张文梅, 等. 不同杀菌剂对烟草赤星病菌室内毒力测定[J]. 生物灾害科学, 2021, 44(4): 465-468.

2021-11-24

2021-12-08

抚州烟草公司项目（抚烟科[2018]8号）

蔡梁（1996—），男，硕士生，主要从事植物病理研究，liangcai996@163.com；

通信作者：崔汝强，教授，博士，cuiruqiang@qq.com。