血清OX40和OX40配体在老年急性脑梗死病人中的表达及临床意义

时岩 臧艳静 王素玉 刘树理

急性脑梗死占所有脑卒中的87%，是脑血供突然中断后导致的脑组织坏死，常伴有免疫炎症和氧化应激损伤、血管通透性增高和脑水肿等继发性病变［1］。急性脑梗死后1年内的死亡及残疾率达45%，特别对于老年病人，预后更差［2］。深入分析急性脑梗死的发病机制，并寻找潜在的生物学标志物，对改善病人预后有重要意义。越来越多的研究显示，炎症标志物可能是急性脑梗死的生物学标志物［3⁃4］。OX40是肿瘤坏死因子超家族成员之一，在B细胞、巨噬细胞和树突状细胞等免疫细胞中表达［5］。OX40及OX40配体（OX40 ligand，OX40L）是免疫应答中重要的协同刺激分子，在免疫性疾病、哮喘［6⁃7］、脑出血［6］和癌症［8］等疾病中表达增高。OX40和OX40L在急性脑梗死中的作用既往少有报道。本研究旨在分析OX40、OX40L与老年脑梗死病人神经功能缺损及预后的关系，为临床诊治提供依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2018～2019年本院收治的146例老年急性脑梗死病人为研究对象（观察组），其中男91例，女55例；年龄60～86岁，平均（72.87±8.24）岁；BMI为25.11±2.09；TOAST分型大动脉粥样硬化54例、心源性栓塞48例、小动脉闭塞44例；有吸烟史43例，饮酒史34例，房颤史41例，高血压史67例，糖尿病史52例，冠心病史58例。纳入标准：（1）符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》诊断标准［9］；（2）年龄≥60岁；（3）病例资料完整。排除标准：（1）入组前1个月内服用瑞舒伐他汀；（2）合并急慢性感染性疾病；（3）出血性脑卒中；（4）肿瘤性疾病；（5）免疫性疾病。另选取同期在本院体检的50例健康老年人为对照组，其中男38例，女12例；年龄60～80岁，平均（70.12±12.73）岁；BMI为24.17±3.78；高血压史14例，吸烟史9例，糖尿病史11例，饮酒史7例。2组年龄、性别、BMI、高血压史、糖尿病史、吸烟史和饮酒史比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.2 神经功能缺损评价方法 入院时采用NIHSS对老年急性脑梗死病人进行评价，该量表总分为42分，评分4～7分为轻度缺损，8～14分为中度缺损，≥15分为重度缺损［10］。

1.3 预后评价 出院3个月时，采用改良Rankin量表（mRS）对老年脑梗死病人的预后进行评价，mRS评分0～2分为预后良好，3～6分为预后不良［11］。

1.4 血清OX40和OX40L检测 入院时采集所有研究对象肘静脉血3 mL，2500 r／min离心15 min后收集血清。采用ELISA法检测血清OX40和OX40L表达水平，试剂盒均购于上海科顺生物科技有限公司，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 统计学方法 应用SPSS 20.0软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，2组间比较采用t检验；多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD⁃t检验；计数资料采用频数和百分比表示，组间比较采用χ2检验；血清OX40、OX40L与NIHSS评分的相关性用Pearson相关系数描述；绘制ROC曲线分析血清OX40和OX40L预测老年急性脑梗死病人预后的价值，计算AUC、灵敏度和特异度。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清OX40和OX40L比较 观察组血清OX40、OX40L水平分别为（76.12±12.13）pg／mL和（84.02±13.01）pg／mL，均高于对照组。神经功能轻度缺损组、中度缺损组、重度缺损组血清OX40和OX40L水平均高于对照组（P＜0.05），且病情越重，OX40和OX40L水平越高（P＜0.05），见表1。

表1 2组血清OX40和OX40L水平比较（±s，pg／mL）

表1 2组血清OX40和OX40L水平比较（±s，pg／mL）

注：与对照组比较，∗P＜0.05；与轻度缺损组比较，＃P＜0.05；与中度缺损组比较，△P＜0.05

组别 OX40 OX40L对照组（n＝50） 34.78±9.03 42.09±6.85轻度缺损组（n＝32） 63.09±12.02∗ 73.09±8.45∗中度缺损组（n＝72） 73.23±6.34∗＃ 80.34±6.03∗＃重度缺损组（n＝42） 87.09±8.64∗＃△102.89±20.12∗＃△

2.2 血清OX40、OX40L与神经功能缺损的关系 相关分析显示，NIHSS评分与OX40、OX40L均呈正相关（r分别为0.578和0.701，P＜0.01）。

2.3 血清OX40、OX40L与预后的关系 预后不良组有49例病人，其血清OX40、OX40L蛋白表达水平均高于预后良好组（P＜0.01），见表2。单因素及多因素Logistic分析结果均提示，OX40和OX40L是老年急性脑梗死病人预后的独立影响因素，见表3。ROC曲线分析结果显示，OX40、OX40L预测病人预后的AUC分别为0.793和0.854，二者联合检测可将AUC提高至0.914，见表4。

表2 不同预后组血清OX40和OX40L水平比较（±s，pg／mL）

表2 不同预后组血清OX40和OX40L水平比较（±s，pg／mL）

注：与预后良好组比较，∗∗P＜0.01

组别 OX40 OX40L预后良好组（n＝97） 68.34±10.10 76.20±17.37预后不良组（n＝49） 84.03±13.87∗∗ 92.76±22.14∗∗

表3 预后影响因素的单因素和多因素分析

表4 血清OX40、OX40L预测临床预后的效能分析

3 讨论

脑梗死发生后，组织和外周血炎症因子发生变化，炎症因子可能有助于急性脑梗死预后的判断［12］。OX40及其配体在免疫炎症损伤中起重要作用，本研究旨在分析OX40、OX40L与神经功能缺损的关系及其预测急性脑梗死病人预后的价值。

T细胞是免疫应答过程中的重要细胞，具有免疫监视作用［13］。OX40和OX40L是一对重要的共刺激分子，能够为T细胞活化提供刺激信号。OX40主要表达于活化的T细胞表面，而OX40L主要表达于抗原提呈细胞上，OX40／OX40L信号通路在T细胞增殖、活化和凋亡中起到重要作用，有助于放大自身免疫反应，进而影响疾病的发生和发展［14］。动脉粥样硬化是脑梗死发生的主要原因，有研究发现，OX40L与动脉粥样硬化相关［15］。本研究结果显示，急性脑梗死病人血清中OX40和OX40L表达水平明显高于健康人，提示OX40和OX40L可能参与了急性脑梗死的发生。另外，重度缺损组血清OX40、OX40L水平均高于轻度缺损组和中度缺损组，且相关分析提示NIHSS评分与OX40、OX40L水平呈正相关，说明OX40和OX40L与急性脑梗死病人的神经功能缺损严重程度有关。

OX40和OX40L可能是疾病预后的评价指标，有研究发现，OX40和OX40L高表达与进展期肺腺癌及非小细胞肺癌病人的不良生存预后有关［6，16］。本研究结果显示，预后不良组血清OX40、OX40L水平均高于预后良好组，OX40、OX40L预测病人预后的AUC分别为0.793和0.854，说明OX40和OX40L对急性脑梗死病人的临床预后有一定早期预测价值。

综上所述，老年急性脑梗死病人血清OX40、OX40L水平明显高于健康人，OX40和OX40L与神经功能缺损严重程度有关，并且有助于早期预测病人的临床预后。本研究也存在一些局限性，例如未检测病人血清OX40、OX40L水平的动态变化，其表达特征在未来需要进一步分析。OX40／OX40L在急性脑梗死中的具体作用机制也需要深入探讨。