浅谈饲料中粗蛋白含量测定注意事项

裴艳艳

（漯河市畜产品质量安全检测检验中心，河南 漯河 462000）

蛋白质在生命活动中是一种重要的物质基础，在畜禽营养中具有非常重要的地位，其作用是其他营养物质不可取代的。饲料中粗蛋白质是所有含氮化合物的总称，包括蛋白质和其他一些非蛋白质含氮化合物。粗蛋白是饲料营养成分中的一个主要营养指标，也是评价饲料营养价值的重要指标之一。因此，在饲料检测中粗蛋白含量的测定是必测的常规检测项目。国标法测定饲料中的粗蛋白采用凯氏定氮法，由于操作过程相对复杂，如果操作不当，就会导致检测结果不准确。笔者通过查阅相关资料，总结在近些年饲料粗蛋白检测操作实践中积累的经验，谈谈在粗蛋白检测过程中应注意的事项。

1 样品的采取与制备

根据样品的产地、品种、成熟度、均匀度、存活状态、新鲜度、生霉情况抽取有代表性的饲料样品，按照四分法取得分析样本，粉碎或研磨，样品通过0.42 mm 标准筛，混匀，装入密封容器中备用。粉碎过程要快，避免样品的成分发生变化。由于饲料样品颗粒较大，成分复杂，检测时称量样品少，如果细度不够，导致称样时样品不均匀，会产生结果误差。

2 样品的称取

国标GB/T 6432-2018 中规定试样用分析天平称取0.5～2g（含氮量5mg～80mg），一式两份，确保结果准确。试样的称样量应根据具体情况而定，浓缩料、配合饲料、鱼粉、豆粕等蛋白含量较高的样品称取量适当稍低点，稻谷、玉米等蛋白含量较低的样品称取量适当稍高点。结合笔者多年经验，浓缩饲料（粗蛋白含量≥40%）称样量在0.5 g～0.6 g 之间，配合饲料（粗蛋白含量≤20%）称样量在0.6 g～0.8 g 之间，避免在滴定盐酸标准溶液体积过小，减少实验误差，增加结果的准确性。称样时应让样品紧贴样品勺，避免取出的样品洒落。每称完一个样品后，都应该用定量滤纸擦拭干净取样勺，避免影响下一个样品取样。

3 样品的消化

消化时速度要缓慢，开始要用小火，待样品焦化后，逐步缓慢加大火力，防止火力过大含氮物质以气体的形式损失，而造成检测结果偏低。消化时将溅到瓶壁上的黑渣摇入瓶底硫酸溶液中，以避免消化不完全。消化过程要控制好温度，过低则消化时间长，消化不完全，所以消化时最好采用可调式电炉。样品消煮过程中，凯氏瓶内可以加几粒玻璃珠，用以防止硫酸涨沸流失。当消化液达到透明状态时，并非表示样品已消化完全，至少还须加热消化2 h 左右，防止蛋白含量结果偏低。

4 样品的蒸馏

开始时要先打开冷凝水，蒸馏之前检查每根乳胶管是否漏气，整个装置应该是密封完全的，不能漏气，否则产生的氨气逸出会影响检验结果。做样品检验之前，要用0.2 g 硫酸铵代替样品检查整个装置的气密性。加样之前应把整流管末端浸入吸收液，样液加入蒸馏装置后，用蒸馏水冲洗进样口，先塞好入口玻璃塞，并在进样口处用蒸馏水密封，然后再加入碱液，加入时要缓慢，不可太快。蒸馏时间以反应室液体沸腾时开始计时，蒸馏时间低于4 min，蛋白含量偏低，蒸馏时间5 min，蛋白含量相对稳定，蒸馏时间过长，含量没有明显增加，增加检测时间。

5 样品的空白测定

是衡量整个操作过程中一个非常重要的综合性指标，良好的空白值是保证检测结果准确的前提，粗蛋白的空白测定是用0.5 g 蔗糖代替样品，消耗0.1 mol/l 盐酸标准滴定溶液的体积不得超过0.2 ml 或者消耗0.02 mol/l 盐酸标准滴定溶液的体积不得超过0.3 ml。检测时若空白值偏高可能是所用试剂级别不够、试验用水不纯或玻璃器皿不干净等原因造成的。

6 样品的滴定

是检测粗蛋白含量的最后一步，滴定用的盐酸标准溶液浓度必须准确，否则直接影响检测结果。滴定前要将滴定管中所有的气泡排出，调节好活塞的松紧度，防止滴定液洒漏。滴定时读数不准、滴定液洒落会影响蛋白含量的检测结果。