苹果新病害—苹果痣状疮痂病*

任维超，刘 娜，李寿永，张振芳，练 森，李保华

（1 青岛农业大学植物医学学院，山东266109）（2 烟台市蓬莱区大辛店镇农业综合服务中心）

近年来，山东省烟台市套袋苹果上发生1 种新病害，对果实外观影响很大。该病于2013 年发病较为严重，2020 年再次大面积严重发病，烟台产区绝大部分苹果园都发现了此种病害，一般果园果实发病率在1%以下，个别果园病果率超过3%。目前，国内尚无该病的有关研究报道，为此作者对该病的病原进行了分离鉴定，并参考国外的有关资料，分析了病害的发病规律和条件，并提出防治建议。

1 病害症状

该病主要出现在摘袋后的果实上，为疮痂状或粗皮状病斑（图版1）。病斑圆形，规则，直径5～20 mm，表皮木栓化，粗糙，黄褐色至黑褐斑，边缘黑色，为病菌的菌丝层，部分病斑的中央隆起（图版1）。病菌仅危害果实的表皮，影响外观，果肉完好，果实品质不受影响。病果入库后，病菌仍能生长扩展，在病斑外围形成黑色环状条带，为病原菌在角质层下放射状扩展形成的菌丝层。多数病果上1～2 个病斑，发病严重的果实上有几十个病斑（图版1）。

2 病原鉴定及病害命名

刮取病斑组织，能镜检到病菌的分生孢子（图1-A）和分生孢子梗（图1-B）。分生孢子淡褐色，椭圆形或卵圆形，瓜子状或葫芦状，单胞或双胞，内有油球，大小为4.1～6.2 μm×10.3～15.8 μm。分生孢子萌发从侧面或顶端产生芽管。分生孢子梗丛生，暗褐色，无分枝，直立或弯曲，3.2～6.3 μm×25.0～47.0 μm。分生孢子梗芽生式产孢，合轴式延伸，分生孢子脱落后，留有孔状孢子痕（图1-B）。

图1 苹果痣状疮痂病分生孢子（A）和分生孢子梗（B）

挑取单个孢子，转入马铃薯＋葡萄糖＋琼脂培养基（PDA）上培养，30 d 后可形成灰黑色菌落。菌落圆形，边缘灰白色，气生菌丝短，绒毛状（图2-A）。病菌在培养基上生长速度缓慢，生长最快的菌株25 ℃下培养30 d，菌落直径能达到1.5 cm（图2-B）。

图2 苹果痣状疮痂病（V.asperata）菌落

挑取单个孢子纯化病原菌，以纯化病菌的DNA为模板，利用ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCG G-3′）和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）通用引物可以扩增出病菌的ITS 序列，序列长度为549 bp。将扩增出的序列在NCBI 数据库中BLAST比对，发现扩增序列与国外报道病菌（Venturia asperata）的相似度高达99.6%。利用检测V.asperata的特异性引物[1]，以从病斑表层组织中直接提取的DNA 为模板，在检测的11 个病斑中都能扩增出特异性条带（图3）。根据病菌的ITS 序列、特异引物的扩增结果、孢子和孢子梗的形态，以及在果实上造成的症状，参照新西兰、加拿大、法国和意大利的研究结果，初步确认该病由病原菌Venturia asperataSamuels&Sivanesan 侵染所致。

图3 苹果痣状疮痂病（V.asperata）扩增出的特异性条带

国外报道，V.asperata在苹果果实上能引起非典型的疮痂病症状（Atypical scab-like symptoms）[2]，而黑星病菌（Venturia inaequalis）在果实上诱发的症状属于典型的疮痂病症状。黑星病菌诱发疮痂病的症状，木栓化组织厚，病斑凹陷，开裂，果实畸形。V.asperata所导致的疮痂症状，木栓化层仅限表层组织，木栓化组织薄，似黑“痣”，随果实生长开裂，不影响果实生长。根据V.asperata导致的疮痂症状与苹果黑星病菌所导致疮痂症状的不同，可把“苹果痣状疮痂病”作为其中文名称，以区别于其他病害。目前，该病主要分布在烟台苹果产区的‘富士’品种上，套袋果实发病相对较重，海棠和‘嘎拉’果实上偶有发现。

3 发病规律及条件

V.asperata于1975 年首次在新西兰报道。1973年，Samuels 和Sivanesan 在苹果越冬病叶上检查黑星病菌的子囊孢子时，发现1 种与苹果黑星病菌子囊孢子形态不同的子囊孢子，并对其形态和分类地位进行研究，最终定名为V.asperataSamuels &Sivanesan[2]。1985 年，加拿大在苹果落叶上也发现该种病菌[3]。V.asperata一直被认为是苹果落叶上的一种腐生菌，直到2007 年Caffier 等在法国南部发现V.asperata能在苹果果实上引起非典型的疮痂病症状（Atypical scab-like symptoms）。在法国西南部，由V.asperata侵染所造成的果实发病率在不同果园差别很大，从10%到60%不等[1]。Caffier 等用V.asperata的分生孢子接种苹果叶片和果实，都能侵染。病菌接种2 周后，幼嫩叶片上能观察到产孢病斑，其面积占到整个叶面积的40%～50%，病斑没有明显的症状，只产生非常稀疏霉层。在果实上，病菌引起典型的痣状疮痂病斑。病菌能在苹果落叶上越冬，越冬后能产生子囊孢子，在法国南部子囊孢子自3 月底开始释放直到5 月底结束（初花后1个月）[1]。2018 年，意大利北部苹果产区也发现了V.asperata在苹果果实上引起的痣状疮痂病斑[4]。

目前，苹果痣状疮痂病在我国的发病规律和条件尚不清楚。根据国外的研究结果，结合我国发病情况分析，在我国苹果痣状疮痂病菌也应该在苹果落叶上越冬，越冬后产生子囊孢子，在4—6 月幼果生长期遇雨后释放，并随气流传播侵染幼嫩果实和叶片。病菌侵染幼嫩的叶片后，虽没有明显的症状，但可产生分生孢子，分生孢子随雨水传播再侵染果实和叶片。果实在套袋前已被病菌侵染，但没有表现出明显的症状。5—6 月是痣状疮痂病菌侵染果实的主要时期，也是病害防治的关键时期。5—6月多雨的年份，可造成病菌的大量侵染，如2013年和2020 年。

4 苹果痣状疮痂病的防控

根据V.asperata的生物学特性推测，痣状疮痂病虽不会像黑星病那样在苹果上形成严重危害，但在5—6 月多雨的年份，会导致大量果实受侵染。随清园彻底清除果园内和周边的落叶，5—6 月多雨年份可于降雨前或降雨后随其他病害的防治喷施2～3 次杀菌剂，可有效地控制苹果痣状疮痂病的危害。