卵巢子宫内膜异位囊肿患者血清及腹腔液中Th1/Th2细胞因子、IL-37、HE4表达及其临床意义

朱宸娴 夏丹丹 季骁梅

江苏省常州市妇幼保健院(213000)

卵巢子宫内膜异位囊肿(OEM)是一种特殊类型的子宫内膜异位症(EMS)，是由于具有生长功能的子宫内膜腺体、间质等组织种植于卵巢而形成异位囊肿[1]。可引起明显疼痛且影响生育功能，具有较强的侵袭性与复发性[2]。发病机制尚不十分清楚，近年诸多学者认为全身或盆腔局部免疫调节功能异常参与了OEM的发生发展，且与临床转归关系密切[3]。辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)是重要CD4+效应T细胞亚群，参与机体炎症反应影响免疫调节过程，被证实参与了EMS的发生发展过程[4]。人附睾分泌蛋白4(HE4)是一种新型卵巢癌肿瘤标志物，在正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织中低表达或不表达，但近年研究发现其在EMS中高表达，是否参与OEM的发生发展值得讨论[5]。本研究通过检测OEM患者血清及腹腔液中Th1/Th2细胞因子、白细胞介素-37(IL-37)、HE4表达，分析与OEM发病的可能作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月-2020年10月本院妇产科接受腹腔镜下卵巢囊肿剥除术的OEM患者102例作为OEM组，改良国际生育协会(AFS)分期[6]Ⅰ期15例、Ⅱ期23例、Ⅲ期39例、Ⅳ期25例。纳入标准：①符合OEM的临床诊断标准[7]，并经术后病理证实；②首诊未接受促性腺激素释放激素α(GnRH-α)或雌孕激素治疗；③有完整的临床资料及相关检查数据；④患者本人签署知情同意书。排除标准：①既往放疗及化疗史；②合并子宫肌瘤、子宫腺肌症及卵巢癌等妇科良、恶性肿瘤；③全身恶性肿瘤病史；④合并心、肝、肺、肾等重要脏器原发病或功能障碍；⑤合并自身免疫性疾病及其他可能影响机体免疫平衡疾病；⑥近6个月内有安宫黄体酮等用药史。另选同期行腹腔镜诊疗术的输卵管阻塞症患者68例为对照组，均无育龄期，既往月经规律且无月经异常史，无子宫肌瘤、子宫腺肌症、子宫内膜异位症等妇科疾病，术前3个月内未使用任何影响免疫平衡的药物，其余排除标准同OEM组。本研究经医院伦理委员会审批。

1.2 检测方法

两组孕妇均于入院当日或次日用药前，采集空腹外周静脉血分离血清置-80℃待测；于腹腔镜术中，采用负压吸引法吸取无血液污染的子宫直肠陷凹与子宫膀胱陷凹处腹腔液于无菌离心管中，分离血清置-80℃待测。采用酶联免疫吸附法检测不同标本Th1/Th2细胞因子、γ干扰素(IFN-γ)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-37、HE4水平。试剂盒由上海酶联生物科技有限公司生产。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 一般临床资料

两组年龄、体质指数(BMI)、生育状况、初潮年龄及月经周期等无差异(P>0.05)，月经时间OEM组长于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组一般临床资料比较

2.2 血清Th1/Th2细胞因子、IL-37、HE4

OEM组血清IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值低于对照组，IL-4、IL-6、IL-37及HE4水平均高于对照组(均P<0.05)。OEM组中，AFS分期早期(Ⅰ期+Ⅱ期)孕妇血清IFN-γ、IL-2水平及IFN-γ/IL-4比值均高于晚期(Ⅲ期+Ⅳ期)孕妇，IL-4、IL-6、IL-37及HE4水平低于晚期孕妇(均P<0.05)。见表2。

表2 不同组孕妇血清各检测指标水平比较

2.3 腹腔液Th1/Th2细胞因子、IL-37、HE4

OEM组腹腔液IFN-γ、IL-2水平及IFN-γ/IL-4比值均低于对照组，IL-4、IL-6、IL-37及HE4水平高于对照组(P<0.05)。OEM组中，AFS早期孕妇腹腔液IFN-γ、IL-2水平及IFN-γ/IL-4比值均高于晚期孕妇，IL-4、IL-6、IL-37及HE4水平均低于晚期孕妇(P<0.05)。见表3。

表3 不同组孕妇腹腔液各检测指标水平比较

3 讨论

OEM是EMS最常见的病理类型之一，病灶位于卵巢组织中，囊肿内液含有大量细胞损伤因子、炎症因子、蛋白水解酶等损伤正常细胞的物质，可导致卵巢组织损伤，不及时治疗可导致囊肿周围细胞改变，增加不孕发生风险，甚至与肿瘤的发生发展有关[8]。近年来神经-内分泌-免疫调节网络失衡在OEM发病中的作用受到广泛关注，甚至有学者认为OEM是一种自身免疫性疾病，且免疫机制紊乱与OEM相关疼痛具有密切关系[9]。

Th1和Th2细胞及相关因子平衡调控与多种疾病的发生发展有密切关系[10-11]。Th1细胞过度活化可能攻击错误目标，诱发“组织特异性”病症；相反，Th2细胞过度活化、过度抑制Th1细胞时，机体容易发生感染或者肿瘤[12-13]。有研究显示，多种炎症细胞因子参与了全身及局部炎症-免疫调节，尤其是盆腹腔局部免疫功能失衡导致无菌性炎症反应增强，加速OEM的发生发展[14]。本研究结果显示，OEM患者存在明显的免疫抑制状态，Th1/Th2平衡整体向Th2漂移。鉴于OEM患者多存在腹水，故加行腹腔液指标检测，结果显示，OEM组腹腔液IL-4、IL-6均高于对照组，IFN-γ、IL-2水平与IFN-γ/IL-4比值均低于对照组，认为OEM存在局部免疫紊乱，Th1/Th2平衡漂移参与了OEM的发病过程。与此同时，本研究还发现晚期OEM患者中免疫抑制更为明显，考虑为IL-4、IL-6等异常增多并局部富集巨噬细胞、浆细胞等，促进子宫内膜异位的扩散与转移。同时，IL-6可刺激内皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子分泌，加速血管再生，介导OEM的生长与扩散，进一步加重病情[15]。IL-37是一种新型抗炎因子，可抑制多种前炎性细胞因子释放，并可抑制树突状细胞活性，从而抑制炎症反应的发生发展[16]。研究显示，其表达水平与IFN-γ呈显著负相关性，过表达可导致机体免疫调节紊乱以及局部炎症反应，参与OEM的发生发展[17]。本研究中，OEM组血清及腹腔液中IL-37水平均高于对照组，且在晚期分期患者中升高明显，这与Kaabachi等[18]报道基本相符。证实IL-37过表达可能参与了OEM的发生发展，但其机制仍不明确。

既往研究表明，OEM可增加部分卵巢癌亚型的患病风险[19]；OEM的恶性转化率可达0.3%～0.8%，尤其是在以不孕症为主要症状的患者中恶性转化风险明显升高，且40%的子宫内膜样腺癌以及50%透明细胞性卵巢癌与OEM有关[20]。HE4基因在正常卵巢组织及多数妇科良性病变中呈低表达水平，在卵巢癌中呈明显高表达，且诊断灵敏度及特异度优于传统癌症标志物CA125，近年研究发现其在某些类型的EMS中也可出现表达水平升高现象[21]。本研究中，OEM组血清及腹腔液中HE4水平均高于对照组，且分期为晚期孕妇更高。推测OEM尤其是晚期OEM可能具有恶性转化风险，这对评估OEM的分期恶化风险可能有指导意义。

综上所述，OEM患者存在Th1/Th2平衡漂移，主要表现为血清及腹腔液IFN-γ、IL-2降低及IL-4、IL-6、IL-37及HE4水平升高，尤其是在Ⅲ、Ⅳ期OEM患者中变化明显，以腹腔液中各指标改变尤为突出；认为Th1/Th2细胞因子失衡及IL-37、HE4过表达参与了OEM的发生发展。