不同培养条件对北虫草干重及蛋白质含量影响

刘芳，魏彪，殷霈瑶，刘影，金虎

(黑龙江省林业科学院牡丹江分院，黑龙江 牡丹江 157010)

北虫草(Cordycepsmilitaris)又名北冬虫夏草、与冬虫夏草同属异种，药理作用与冬虫夏草类似[1]。北虫草中含蛋白质、氨基酸、虫草素、虫草多糖等多种有效成分，药用价值很高，是一种药食两用真菌[2-6]。蛋白质作为北虫草中重要的营养指标，对评价其营养价值具有重要意义。为此，对不同培养下北虫草干重及蛋白质含量进行对比分析，找出最适宜北虫草的人工栽培条件。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌种。试验用菌种由黑龙江省林业科学院牡丹江分院提供。

1.1.2 培养基。大米，营养液。(营养液配方为葡萄糖20 g/L，酵母粉10 g/L，磷酸二氢钾2 g/L，硫酸镁2 g/L，维生素B110 mg，加水定容至1 L。)

1.2 试验方法

1.2.1 培养基制备。将大米和配制好的营养液灌装到580 mL组培玻璃瓶中，放入121 ℃高压灭菌锅中，灭菌30 min，出锅泠却后接种并用聚丙烯薄膜封口。经过暗培养、菌丝生长、转色、子座生长几个阶段后，待子实体成熟即可采收，采收后将北虫草子实体置于40 ℃干燥箱内烘干至恒重，取出称取每瓶子实体干重。

1.2.2 蛋白质测定。按照GB 5009.5-2010食品中蛋白质的测定方法测定北虫草中蛋白质含量，按要求进行试样处理，用凯氏定氮法测定其蛋白质含量。每个试验重复3次，试验结果取平均值。

1.2.3 试验方案。选取影响试验结果的四个关键因素，分别为基质用量，基质料液比，接种量和培养基pH值。以北虫草子实体干重、蛋白质含量为指标，用L9(34)进行正交试验。各因素水平见表1。

表1 试验因素及水平表

2 结果与分析

2.1 不同培养条件对北虫草干重的影响

北虫草需要在适宜的pH值范围内才能正常生长。培养基内含水量高低直接影响北虫草菌丝发育，只有基质用量和基质料液比配比准确，经高压灭菌后培养基内含水量才能促进北虫草菌丝萌发[7-8]。接种量的多少关系到北虫草的子座密度，从而影响其产量。

由表2可见，以北虫草子座干重为指标的正交试验最佳培养条件为A2B1C2D3，即当基质用量为40 g，基质料液比为1∶1.4，接种量为3.2 mL，培养基pH值为7时，北虫草干重为5.85 g。由极差分析可以看出，培养条件对北虫草子座干重的影响显著顺序依次为D>A>B>C，即培养基pH值>基质用量>基质料液比>接种量。

表2 正交试验结果分析表

2.2 不同培养条件对北虫草蛋白质含量的影响

由表3可见，以北虫草蛋白质含量为指标的正交试验最佳培养条件为A2B2C3D1，即当基质用量为40 g，基质料液比为1∶1.5，接种量为4.8 mL，培养基pH值为6时，北虫草蛋白质含量为21.86 g/100 g。由极差分析可以看出，培养条件对北虫草子座干重的影响显著顺序依次为A>C>D>B，即基质用量>接种量>培养基pH值>基质料液比。

表3 正交试验结果分析表

3 结论与讨论

试验结果表明，不同培养条件对北虫草的干重和蛋白质含量影响不同。只有各培养条件均达到适宜水平，才能促进北虫草的生长发育。当基质用量为40 g，基质料液比为1∶1.4，接种量为3.2 mL，培养基pH值为7时，北虫草子座干重最大，为5.85 g；基质用量为40 g，基质料液比为1∶1.5，接种量为4.8 mL，培养基pH值6时，北虫草中蛋白质含量最高，为21.86 g/100 g。