细针穿刺细胞学检查联合BRAF 基因检测在甲状腺微小乳头状癌诊断中的应用价值

廖鹏娟，杨 毅

（1 广州医科大学附属第二医院病理科 广东 广州 510260）

（2 惠州市中心人民医院病理科 广东 惠州 516000）

甲状腺癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，其中甲状腺微小乳头状癌（PTMC）是指癌灶直径≤10 mm 的甲状腺癌[1]。随着超声医学的发展及健康意识的提升，甲状腺微小乳头状癌的检出率逐年升高，甲状腺微小乳头状癌早期常无明显临床症状，但中晚期患者预后常不尽人意，如不及时治疗将严重威胁生命健康[2]。PTMC 的发病机制较为复杂，其预后和病理分期明显相关，因此早期诊断及治疗对患者的预后至关重要[3]。目前甲状腺微小乳头状癌的诊断方式较多，如彩超、超声造影、CT、穿刺等，但均有一定的误诊率而导致非必要的手术。本研究通过对比FNAC、BRAF 基因检测及FNAC 联合BRAF 基因检测评价其临床应用价值，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年6 月—2020 年5 月惠州市中心人民医院收治的120 例行手术治疗的高度疑似PTMC 的患者，其中男性37 例，女性83 例，年龄22 ～65 岁，平均年龄（40.2±2.3）岁。纳入标准：①彩超ACR TI-RADS 分类为4c 类或5 类者；②患者要求并同意手术；③本次研究所有患者对此研究知情同意。排除标准：①既往有甲状腺手术史；②1 月内出现急性甲状腺炎者；③合并有其他部位晚期恶性肿瘤者。

1.2 方法

FNAC：患者仰卧位，暴露穿刺部位，利多卡因麻醉，常规消毒铺巾，在彩超引导下定位需要穿刺的可疑恶性结节，用细穿刺针从不同部位快速反复穿刺抽吸，涂片、酒精固定后送检。穿刺结果按照甲状腺细针穿刺细胞病理学Bethesda 标准判定[4]。BRAF 基因检测：在超声引导下细针穿刺取材后，使用弗莱斯生物科技公司提供的BRAF 基因检测试剂盒，使用实时PCR 仪器对BRAF 基因是否突变进行检测。当BRAF 基因为突变型时为阳性，代表为恶性肿瘤，当BRAF 基因为野生型时为阴性，代表为良性肿瘤。

1.3 观察指标

以手术后的石蜡病理为诊断的金标准，分析FNAC、BRAF 基因检测及FNAC 联合BRAF 基因检测的敏感度、特异度和准确度。

1.4 统计学方法

使用SPSS 26.0 统计分析软件，计数资料以百分数（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 FNAC 及BRAF 基因检测与术后病理检查结果的统计分析

术后病理显示120 例患者中甲状腺微小乳头状癌98 例；非甲状腺微小乳头状癌22 例，其中：结节性甲状腺肿21 例，滤泡性腺瘤1 例。FNAC 联合BRAF 基因检测的敏感度及准确度均高于单独的FNAC 或BRAF 基因检测，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 120 例患者FNAC 及BRAF 基因检测与术后病理检查结果（例）

2.2 FNAC 联合BRAF 基因检测与术后病理检查结果

FNAC 联合BRAF 基因检测与术后病理检查结果的敏感度、特异度、准确度的统计分析见表2。

表2 120 例患者FNAC 联合BRAF 基因检测与术后病理检查结果（%）

3.讨论

甲状腺微小乳头状癌是最常见的恶性肿瘤之一，是甲状腺癌4 大病理类型中最常见的病理类型，占各种恶性肿瘤的近5%左右[5]。甲状腺微小乳头状癌早期常无明显的临床症状，较容易漏诊、误诊而延误治疗。彩超是评估甲状腺结节良恶性的主要的无创检查手段之一，但常有一定的局限性，不能达到确诊的目的[6]。因此及时准确的诊断并给予早期治疗是提升患者预后的关键[7-8]。

FNAC 是诊断甲状腺癌灵敏性和特异性最高的诊断方法[9]，其通过在彩超引导下行FNAC，通过观察细胞形态学变化来确诊甲状腺癌。但仍有15%左右的FNAC 结果为意义不明确的细胞异型性病变或细胞成分过少而无法诊断的情况。本研究中，120 例行FNAC 的患者中，有9.17%（11/120）的患者穿刺结果为无法明显细胞性质，仅45.45%（5/11）是需要行手术治疗的，说明穿刺存在一定的误诊率，导致了部分患者实施不必要的手术治疗。BRAF 基因分为野生型及突变型，BRAF 基因突变的最常见位点为V600E[10]。当V600E 位点发生突变后，可激活BRAF 激酶，进一步激活相关通路导致癌变的发生[11]。国内学者Xing 等[12]的研究提示BRAF 基因突变在甲状腺乳头状中的发生率为44%左右，且BRAF V600E 突变的存在与甲状腺乳头状癌患者癌症相关病死率的增加显著相关。

本文结果显示：FNAC 联合BRAF 基因检测的敏感度及准确度均高于单独的FNAC 或BRAF 基因检测，说明FNAC 联合BRAF 基因检测在诊断PTMC 方面有较高的临床价值，优于单独的FNAC 或BRAF 基因检测。FNAC 可以确诊大多数的PTMC，但是仍有一定的误诊率导致过度手术。可能的原因主要是穿刺者技术问题导致没穿到恶性细胞、穿刺细胞过少难以观察等。BRAF 基因位点中的V600E 突变是PTMC 最常见的基因突变位点，有报道称52%～87%的PTMC 可出现BRAF 基因V600E 位点的突变[13]。本文结果显示最终术后病理确诊为PTMC 的患者BRAF 基因突变率为54.08%，与其报道基本一致。在FNAC 的基础之上行BRAF 基因检测有助于降低单行FNAC 的误诊率，通过FNAC 联合BRAF 基因检测可使诊断的敏感度及准确度明显提升。

综上所述，对于可疑甲状腺微小乳头状癌的患者实施FNAC 联合BRAF 基因检测可明显提高诊断正确率，避免不必要的手术，具有较高的临床价值。