食品补充检验方法 蔬菜水果中灭蝇胺残留量的检测 液相色谱-串联质谱法

项林敏 邢银英 陈建 毛理鹏

摘要：本方法在标准方法《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》（NY/T 1725-2009）的基础上，简化步骤，通过提取与净化，建立液相色谱-串联质谱法测定蔬菜水果中的灭蝇胺分析方法。结果表明，采用简化后的前处理方法测定蔬菜水果中的灭蝇胺，加标回收率为86.2～102.1%，标准偏差为2.5%～6.7%，其回收率和精密度都能达到分析检测要求。运用该方法对实际样品进行分析，操作简单，结果可靠，可为蔬菜水果中灭蝇胺的批量快速检测方法研究提供数据参考。

一、背景

灭蝇胺为1，3，5 -三嗪类昆虫生长调节剂低毒杀虫剂，有非常强的选择性，对双翅目幼虫有特殊活性。其作用机理是使双翅目昆虫幼虫和蛹在形态上发生畸变，成虫羽化不全或受抑制。该药极性强具有触杀和胃毒作用，并有强内吸传导性，持效期较长，但作用速度较慢。灭蝇胺用于防治黄瓜、茄子、四季豆、叶菜类等农业害虫。灭蝇胺要达到杀虫的效果，必须经过作物的吸收，然后才能作用于害虫， 因此残留周期较长，需要足够的间隔期才能有效降解。而不少种植户为了卖相好，存在没有严格按规定采摘期进行采摘的情况，从而导致超标。少量的农药残留不会引起人体急性中毒，但长期食用农药残留超标的食品，对人体健康有一定影响。

查看近6年的国家食品安全抽捡实施细则，发现除2017年没有检测灭蝇胺项目外，2016-2021年均有不同类别蔬菜检测此项目，但细则中要求采用的检测方法均为NY/T 1725-2009《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》。

这几年，农药残留一直是食品安全的热门话题，与人们的生活息息相关，老百姓都很关心哪些蔬菜农药残留超标严重，哪些可以放心吃，哪些要少吃。为了让老百姓买得放心，吃得安心，近几年各地市场监管局加大了农产品的抽检力度，但报道豇豆中灭蝇胺超标的现象屡有发生。2021年上半年浙江省蔬菜监督抽检分析报告显示：2021年上半年浙江省组织实施蔬菜监督抽检12763批次产品，检出不合格416批次，不合格率3.26%，其中豆类蔬菜抽检948批次，不合格113批次，不合格率为11.92%，相较 2020年上升5.74%。其主要涉及不合格细类是豇豆（109批次）和菜豆（4批次），豇豆农药残留超标的情况较为严重。2021年上半年，监督抽检蔬菜涉及不合格项目28个，其中农药残留超标项目24个，禁用农药项目2个，重金属残留超标项目2个，总计不合格598项次，主要不合格项目为腐霉利150项次，占全部不合格项次的25.08%，居第一;灭蝇胺54项次，占全部不合格项次的9.03%，居第四。分析报告还显示，豇豆不合格项目有灭蝇胺、倍硫磷、克百威等12项农药残留超标，其中灭蝇胺监督抽检707项次，不合格54项次，不合格率7.64%，居首位。可见豇豆灭蝇胺农药残留超标现象严重。

二、问题

目前，果蔬中农药多残留分析方法主要有液相色谱法（LC）和液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。而液相法NY/T 1725-2009，前处理步骤繁琐，溶剂消耗较大，耗时较久，经过两次旋蒸，一次过小柱，一次氮吹，长时间的前处理导致回收率不佳，且流动相为高比例的乙腈对仪器影响较大，很容易因杂峰造成检测结果不准，光谱图特异性不明显。而在液质方面，虽然在最新发布实施的GB 2763-2021中蔬菜水果灭蝇胺检测方法推荐为GB/T 20769-2008《水果和蔬菜中450中农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，该方法推荐使用 Atlantis T3 C18 反相色谱柱，在实际应用中发现，有些化合物在反相色谱中并没有得到保留，反而因基质干扰，溶剂效应严重，导致峰型不好，定量困难，这类化合物在国家标准中标明为定性鉴别的农药及相关化合物，而灭蝇胺就在这类化合物之中，故没有合适的方法来定量检测灭蝇胺。

三、对策

基于上述问题，有必要建立一种建立液相色谱-串联质谱法测定蔬菜水果中的灭蝇胺分析方法，作为补充检验方法，在较低检出限的情况下快速批量检测样品，能够方便检测机构选择合适自己的方法进行检测，提高检测效率。新的液质方法见下文：

1、仪器与试剂

液相色谱串联质谱仪Agilent 6470QQQ配有ESI源，美国安捷伦公司;超声波清洗器;高速冷冻离心机;;漩涡振荡仪;电子天平;塑料离心管;乙腈;甲酸、乙酸、乙酸铵;0.2μm有机滤膜。基质分散固相萃取剂：50mgPSA、150mgMgSO4、10mgGCB。实验样品为菜场随机购买。灭蝇胺标样购自上海安谱。

2、提取方法：称取10g样品（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入1%乙酸-乙腈溶液20mL，均质0.5 min，摇匀，4000 r/min 离心5min。取上清液1.0mL，加适量基质分散固相萃取剂净化，剧烈振摇1min，4000 r/min离心5 min，取上清液用0.2μm 滤膜过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪测定。

3、标准溶液配制：称取10g空白样品通过前处理步骤制备空白基质溶液，将标准中间液稀释至适合浓度曲线。

4、测定：色谱柱：Eclipse Plus C18 RRHD（1.8μm，3.0×50 mm）;流动相：A-甲醇、B-水（含5 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸）;梯度洗脱程序见表1，流速为0.2 mL/min，进样体积2 μL，柱温30℃，定量/定性离子对：167/85、167/125。

13、结论：该检验方法加标回收率为86.2～102.1%，标准偏差为2.5%～6.7%，其回收率和精密度都能达到分析检测要求。运用该方法對实际样品进行分析，操作简单，结果可靠，可为蔬菜水果中灭蝇胺的批量快速检测方法研究提供数据参考。

四、建议

1、适时发布灭蝇胺补充检验方法，提高检测效率

NY/T 1725-2009《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》，该方法前处理步骤复杂，耗时久，回收率不稳定，不适合批量检测工作，建议尽快出台灭蝇胺的液质补充检验方法，并在GB 2763和国家食品安全抽检实施细则中增加该检验方法，方便检验机构自行选择合适的方法检测，提高效率。

2、规范制度，提高农药使用水平

农药残留超标现象依然较为严重，不少农户缺乏足用药安全间隔期的意识，不考虑药害后果，建议我省市场监管局、农业执法部门双管齐下，严格执行用药规定，规范用药制度是提高蔬菜食品安全的重中之重。

3、提高监督抽检的靶向性

对不合格率较高产品（豇豆）和项目（灭蝇胺）加大监管力度并提高抽样频次，适时开展专项整治行动，通过优化抽检方案，靶向制定检验项目，扩大抽样业态，坚持以问题为导向，突出重点环节、重点区域，精准施策，努力促进食品安全状况的根本好转。