甘薯脱毒苗快繁技术

刘 洋 陶春来 崔绍玉 石 颖 靳国旺 曹立娜 高君慧 张 丹 杜德玉

（廊坊市农林科学院 河北 廊坊 065000）

甘薯属于无性繁殖作物，在种植过程中容易受到病毒侵染，造成产量降低、品质变差，近年来发现的甘薯复合病毒病(SPVD)更成为甘薯的毁灭性病害，对产量影响巨大，减产幅度高达50%~90%[1-2]。

1 脱毒培养

1.1 茎尖剥离。选取生长健硕、茎尖饱满的甘薯植株，取顶芽2 cm，用水冲洗2~3 遍备用。于无菌环境中，将幼芽用75%的酒精浸泡30 s 后，再用2%的次氯酸溶液消毒5 min，浸泡于无菌水中备用。将茎尖置于解剖镜下，用手术刀将茎段上可见叶片剥离，切取0.1~0.3 mm 的茎尖分生组织，接种到分化培养基(MS 培养基+1.0 mg/L 6BA+0.5 mg/L IAA)上。于27 ℃±1 ℃、光强3 000 lx、每天13 h 光照处理条件下培养，诱导芽的形成。

1.2 成苗。在分化培养基中培养20 d，待茎尖膨大变绿后，将其转入MS 培养基上培养成苗，30 d 后将小苗转入MS 培养基中继代培养。

1.3 病毒检测。组培苗扩繁后，长至5~6 片叶时进行病毒检测。采用RT-PCR 检测[3]或甘薯病毒芯片快速检测方法，针对甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯潜隐病毒(SPLV)、甘薯曲叶病毒(SPLCV)及甘薯病毒G(SPVG)等甘薯主要病毒进行检测。

1.4 组培苗扩繁。选取脱毒成功长至5~7 片叶的脱毒苗，在无菌环境中截取2 cm 左右茎段，每茎段须有2 ~ 3 个节，转入MS 培养基上，于温度27 ℃±1 ℃、光强3 000 1x、每天光照13 h 条件下培养，每30~40 d 扩繁1 次。

2 移栽驯化

选择地势高燥、通风向阳、土壤肥沃疏松，并且3 年以上没有种过甘薯且无根腐病、黑斑病、茎线虫病等土传病害的温室进行脱毒苗移栽驯化。温室上下通风口及入口须安装60 目的防虫网，入口要设2 道防虫纱门。整平育苗畦，畦宽120~150 cm。将配好的育苗土铺在畦上，厚10 cm。育苗土成分为草炭土∶蛭石=1∶1，最佳湿度(体积含水量)为15%~25%。

选取培养室内生长健壮、苗龄35~40 d 的脱毒苗放于温室中，培养1 d，再将培养瓶盖全部打开驯化2~3 d 后移栽至苗床，行距8 cm，株距5 cm。移植后及时浇定根水，在畦上支小拱棚。育苗棚温度应保持在25 ℃~32 ℃。栽后3 d 需进行底部小通风，5~7 d后将膜全部揭开。前2~5 d 于弱光下培养。

揭开膜后1~2 d 内结合浇水喷洒75%的百菌清可湿性粉剂800~1 000 倍液或50%的多菌灵可湿性粉剂600~800 倍液。每隔10~15 d 喷施10%吡虫啉可湿性粉剂2 000 倍液和19%溴氰虫酰胺50 ml/亩。温室内悬挂黄色粘虫板，粘虫板悬挂在甘薯苗上方15~ 20 cm 处。每亩悬挂规格为25 cm ×30 cm 的黄板25~30 块，或20 cm×30 cm 的黄板30~35 块。主要防治蚜虫、烟粉虱等虫害。

3 温室扩繁

脱毒苗移栽前进行深耕起垄，耕地深度25 cm，起垄高度20 cm，垄距100 cm，垄顶宽40 cm，垄底宽80 cm。起垄同时需铺设滴灌带，铺地膜。结合耕地每亩施用腐熟有机肥15 00~2 500 kg，N 8~10 kg，P2058~10 kg，K2O 15~18 kg。并且移栽前需对土壤进行消毒，每亩地用50%多菌灵可湿性粉剂1~1.2 kg或50%甲基托布津可湿性粉剂4 ~ 5 kg，10%噻唑磷颗粒剂1 ~ 1.5 kg，均匀撒在土壤中。温室地温达到16 ℃进行脱毒苗移栽，株距13~16 cm，行距20 cm，双行栽种，栽植密度8 000~10 000 株。温室温度控制在25 ℃~32 ℃为宜。视墒情及时浇水，生长期每隔10 ~ 15 d 喷1 次10%吡虫啉可湿性粉剂1 500 ~2 000 倍液和19%溴氰虫酰胺50 ml/亩，防治虫害。

4 网室扩繁

地温平均在16 ℃以上可进行网室移栽。网室移栽前进行深耕起垄，耕地深度25 cm，起垄高度30 cm，垄距120 cm，垄顶宽50 cm，垄底宽90 cm。起垄同时需铺设滴灌带，铺地膜。脱毒苗按株距18~25 cm，行距30 cm 栽于垄上，双行栽种，栽植密度4 500~6 000 株。网室土壤施肥、消毒及移栽后田间管理与温室扩繁相同。