朱俊峰,于书云,杨建生
(1.江苏省昆山市第一动物防疫站,江苏 苏州 215334;2.江苏省昆山市畜牧兽医站,江苏 苏州 215300)
猪伪狂犬病是一种危害全球养猪业健康发展的重大疫病。该病的暴发主要与引进带毒种猪、不重视防疫工作、易感动物多、消毒管理不当及免疫接种不科学有关。由于猪伪狂犬病可导致新生仔猪死亡率、妊娠母猪流产率和产死胎率增高、育肥猪生长发育迟缓以及种公猪不育等不良后果,严重影响养猪业规模化和现代化发展。目前对猪伪狂犬病的诊断方法有很多种,可通过病毒分离鉴定、PCR或血清学诊断来提高诊断的准确率。同时,笔者结合生产经验,总结出猪伪狂犬病的综合防治措施。
猪伪狂犬病的致病原为猪伪狂犬病病毒,该病毒直径约150~180nm,受gE、gD和gI等多个基因调控。如果敲除主控基因,可有效降低病毒毒力,这也是猪伪狂犬基因缺失苗的制备原理。猪伪狂犬病病毒对外界具有一定的耐受力,在冬季干燥环境下可存活46 d,夏季可存活30 d。猪伪狂犬病病毒对酸碱具有一定的抵抗力,pH4~9均能稳定存活,5%石炭酸溶液、1%氢氧化钠溶液、乙醚或氯仿均能灭活,而且对紫外线具有较高的敏感性。
猪在冬季和春季气温较低时容易感染,如果处于分娩高峰期的母猪感染则仔猪出生也后会被感染。发病猪主要以15日龄内的仔猪为主,发病最早为4日龄,死亡率超过85%。随着猪群年龄增长及抗病力增加,猪伪狂犬病的发病率和死亡率也会相应下降,成年猪的感染症状也会较轻[1],大多数呈现轻微发病,死亡率极低。
除了猪是猪伪狂犬病的易感动物外,牛、羊等反刍动物,猫、犬等家养动物也能够感染,人偶尔也有发病报道。
伪狂犬病猪、伪狂犬带毒猪及伪狂犬带毒鼠类是该病的主要传染源。猪伪狂犬病毒可随着病猪的鼻液、唾液和乳汁等分泌物排出,也能够通过尿液排出,动物感染后可持续排毒长达1年时间。带毒鼠类也可作为传染源将疫情扩大。
猪伪狂犬病毒可通过胎盘垂直传染给胎儿,泌乳母猪感染该病7 d左右乳中有病毒出现,新生仔猪吸吮带毒乳汁后即被感染;健康猪只直接接触病猪破损的皮肤或与感染猪自然交配(或人工授精)均能感染;健康猪只接触被病毒污的染物品(如饲料、饮水和用具)均能感染。
猪伪狂犬病的潜伏期为3~6 d,不同年龄猪只的发病率和死亡率不同,日龄越小的仔猪死亡率越高。
新生仔猪由于自身免疫力较低,感染后一旦出现神经症状,死亡率接近100%。仔猪感染后体温升高至41~41.5℃,表现为兴奋、流涎、流鼻涕、咳嗽、呼吸困难、全身肌肉痉挛及运动障碍,部分病仔猪狂躁不安、结膜发炎、眼球震颤及肌肉抽搐。病情严重的仔猪身体仰曲,最后昏迷衰竭死亡。如果治疗及时,可在7 d内康复,而耐过仔猪会发育不良,最终成为僵猪[2]。
病猪主要表现为呼吸系统症状,即体温略微升高、咳嗽、打喷嚏、流涎及体重增长缓慢,此外还会出现角弓反张和运动失调等精神症状。
适配母猪不发情或屡配不孕,返情率高;妊娠母猪流产率、产弱仔率和产死胎率均增高,同时伴有腹泻和呕吐症状,妊娠母猪流产率可达50%。
种公猪的睾丸萎缩或肿胀,精子活力下降,甚至完全失去种用价值。
剖检后无典型病变。如果病猪出现运动失调及抽搐等神经症状,剖检可见脑膜出现不同程度水肿、充血和出血症状;如果病猪有咳嗽症状,扁桃体可见多个灰白色病灶及化脓坏死性炎症,肺部呈小叶性肺炎及出血性炎症,肝脏有大量大小不等的坏死灶,肾有点状出血炎症,脑实质有点状出血症状;如果病猪临死前有腹泻症状,则大肠内容物稀薄,仔猪肠内容物存在许多未消化的凝乳块,肠系膜有炎症。
根据病猪的临床症状和剖检结果可进行初步诊断,但是由于成年猪只的症状不典型,诊断难度较大,也容易误诊。因此需要在初步诊断的基础上通过病毒分离鉴定、PCR检测、免疫荧光标记检测和血清学检测等实验室诊断进行确诊。
采集病猪口腔及鼻腔分泌物,或流产组织或病变组织(若猪只未出现典型症状,可以采集病猪三叉神经节)分离病毒,接种至敏感细胞内,培养24~72 h。如果细胞的折光性增强,而且细胞多呈葡萄串状聚集在一起,表明细胞发生融合而形成合胞体。将上述细胞传一代,制作细胞悬浮液给家兔(猪伪狂犬病阴性)皮下注射。如果注射后不久,家兔的注射部位出现搔痒、红疹和溃烂等症状,而且3 d左右发生死亡,可确诊为猪伪狂犬病。
根据猪伪狂犬病毒基因序列设计特异性引物,采集病料,PCR扩增目的片段,或通过荧光定量PCR检测荧光信号进行快速判断。
采集病料,带分子标记上荧光素的抗体与病料抗原发现结合反应,其反应复合物带有荧光,置于荧光显微镜下可检测出病毒。免疫荧光标记方法简单、快速,和病毒分离鉴定结果一样具有较高的可靠性,但不适合育肥猪或隐性带毒猪,也不适合免疫荧光标记方法。
酶联免疫吸附检测是一种适合大量样本筛选的检测方法,检测耗时短、成本低,特异性和灵敏度较高,可作为替代病毒中和实验的诊断方法。
猪场发现病猪后要及时采取隔离措施,紧急免疫猪伪狂犬病基因缺失弱毒活疫苗,30~45 d后加强免疫1次。为了降低猪群的感染风险,要及时对被病猪污染的猪舍及用具用清水冲洗,用1%烧碱溶液带猪喷雾消毒,猪舍地面和墙壁用5%烧碱溶液喷洒消毒。为了预防人员感染和带毒出场,必须对人员的衣物及鞋帽进行喷雾和紫外线消毒。病死猪、流产组织、病死胎、排泄物和污染物必须经过严格的无害化处理。
仔猪35~40日龄可通过滴鼻免疫接种伪狂犬基因缺失疫苗,每只猪注射1.0 mL。如果新生仔猪接种,滴鼻剂量减半。如果猪场有发病史,可在猪群80日龄注射接种2.0 mL。后备母猪配种前30 d肌肉注射伪狂犬基因缺失疫苗,妊娠母猪产前25~30 d注射2.0 mL,种公猪每半年肌肉注射2.0 mL。如果猪场疫情严重,需要每个季度免疫1次,并定时做好全群抗体检测工作。如果猪只多次的检验结果均为阳性,需要及时淘汰病猪[3]。
首先,猪场应分群管理,根据不同猪群的生长阶段饲喂相应的饲料,保障饲料营养均衡,并有足量的维生素和矿物质摄入。其次,定期驱虫,每个季度对猪场驱虫1次,可在每100 kg饲料中拌入15 g伊维菌素粉剂,连续喂服1周,能够降低猪的寄生虫感染风险,缩短出栏时间。第三,猪场发现阳性猪只,隔离治疗后要定期对病猪进行血清学检测,如果连续检测仍为阳性感染猪,则对病猪淘汰处理,净化猪群,阻断猪伪狂犬病毒的传播途径。