犬细小病毒病的诊断与防控

孙华博 韩雨童 宫冉冉 曹珂炜 国桂海 韩照清

（山东省临沂市临沂大学 276000）

1 犬细小病毒病的病原分析

1.1 犬细小病毒的发现

犬细小病毒病的病原为犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)。最早在1977年，Eugster和Nairn在美国通过电镜观察患有出血性腹泻犬的粪便发现了CPV粒子。1978年，Thomson和Kelly在肠炎症状的犬中分离出该病毒。1982年，由中国人民解放军兽医大学首次在国内分离出CPV。

1.2 犬细小病毒的生物学特性

该病毒属于犬细小病毒科细小病毒属，基因组含有大约5323个核苷酸。CPV粒子有VP1、VP2和VP33种多肽，其中VP2基因为衣壳蛋白的主要编码基因，占编码基因总量的90%，其编码的衣壳蛋白可诱导机体产生中和抗体。VP2蛋白中的主要抗原位点的变异可能导致该病毒的抗原特性和宿主范围发生改变。因此，VP2基因常是CPV分子流行病学调查的主要靶基因[1]。该病毒对多种理化因素和常用消毒剂具有较强的抵抗力，室温可存活3个月；60℃下可存活1h；在低温条件下仍具有侵染性；常用消毒剂酒精、乙醚、氯仿等不能使其灭活，但次氯酸钠、-丙内酯可以杀死该病毒[2]。

2 犬细小病毒病的发病特点

2.1 流行时间

犬细小病毒病一年四季都可发病，以冬季春季为高发季节。寒冷、潮湿、拥挤等能引发动物机体的应激反应，或饲养管理方式突然改变、卫生条件差等其他因素会导致动物机体免疫力下降都能促使动物更易发病。

2.2 易感犬类和传染源

研究表明，犬细小病毒感染与品种关系不大，但也有统计表明，纯种犬及外来犬比土种犬发病率高。幼犬和老年犬为易感群体，发病率和死亡率高。病犬排泄物、呕吐物和唾液中都含有病毒，病毒能通过污染的食物和环境等造成传染。康复犬的粪尿中长期带有病毒，且能在粪便中存在数年，隐性感染的犬也带有病毒，都属于危险的传染源。除此之外，有研究表明，人、苍蝇、蟑螂及一些犬的寄生虫都能作为犬细小病毒的携带者。

2.3 症状表现

在临床上，犬细小病毒感染的病犬分为肠炎型和心肌炎型，潜伏期为1～2周。

2.3.1 肠炎型

肠炎型患病犬多见于6～12月龄的幼犬，病初表现为发热(40℃以上)、精神萎靡、食欲不振、呕吐、眼结膜潮红、鼻镜干燥，发病1d后开始出现腹泻症状。病情初期表现粪便较软，颜色呈咖啡色、灰色、番茄酱色或乳白色。随病程的发展，排便次数增加，粪便中带有血液，并有恶臭味[3]。出现血便数小时患病犬表现为严重脱水、体重减轻。肠道出血严重的病例，如果不能及时纠正脱水症状会造成死亡。

2.3.2 心肌炎型

多见于28～42日龄幼犬，该病例的病程较短，病犬先兆性症状并不明显。病犬开始没有表现明显的症状，轻度腹泻，个别的突然呼吸困难，心力衰弱或心律不齐，短时间死亡，治愈率极低。

3 犬细小病毒病的病理变化

犬细小病毒病感染是由犬细小病毒侵入机体所导致，细小病毒感染是全身性感染，病毒的侵入主要是由血流传播到各个器官，后出现病毒血症，病毒侵入机体后主要攻击肠上皮细胞和心肌细胞，但肠炎病症较为明显，病毒感染肠引窝胚上皮组织，导致上皮组织破坏，使得肠绒毛变短，细胞更新受损。病毒导致心肌细胞受损，细胞变细、变长，使得肌纤维疏松，出现断裂。心肌与心内膜出现心肌变薄，心脏扩张，出现化脓性坏死灶，有出血斑纹。心肌毛细血管扩张出现出血、充血的现象[4]。

4 犬细小病毒病的诊断

4.1 临床诊断

在临床上，该病毒的诊断症状分为出血性肠炎和非化脓性心肌炎，感染前期（2个月左右)的病犬以出血性肠炎为突出特征，常延迟发病，表现为呕吐、腹泻、厌食、发热和粪便带血等临床症状。采集病犬的血液分析可见白细胞计数减少，需及时治疗以防病情加重。发病中期，病犬呕吐频率增加，腹泻加重，排泄物带血，病犬抵抗力降低[5]。发病后期，病犬失水严重，电解质失衡，甚至出现机体酸中毒。

4.2 快速诊断

犬细小病毒的快速诊断方法常使用CPV胶体快速检测试纸，该方法检测速度快，操作简便快捷，而且准确率高。具体操作为取犬少量粪便，用生理盐水均匀混合，吸取1～2滴混合液滴入试纸，5～10min后试纸的颜色发生变化，若出现1条色线，说明检测为阳性；出现2条色线，说明检测为阴性。

4.3 实验室诊断

常用的实验室检测方法如下。（1)PCR检查：PCR检查技术是在DNA水平上对病毒和细菌等病原微生物进行诊断的方法[6]。PCR检测的敏感度高且特异性强，特别是随着PCR技术逐渐成熟，PCR诊断试剂盒、套式PCR、特异等位基因PCR等应用使得病毒的检测更加准确。（2)血凝试验（HA)和血凝抑制试验（HI)：可以简单快速地诊断粪便和组织样品中的病毒[7]。该方法是取病犬新鲜粪便或病死犬肠内容物，按照病毒分离的方法获得病毒悬液，再进行HA和HI试验。（3)病毒分离：可从CPV诱导的心肌炎和肠炎中分离出病毒，进行鉴定。（4)酶联免疫吸附试验（ELISA)：这种检测方式既可以检测抗体也可以检测抗原，具有便捷、敏感、特异性强等优点。双抗体加心ELISA法是一种迅速、简单、灵敏、适用于犬粪便CPV抗原检测的诊断试验方法。（5)免疫层析方法：近年来，市场上有出售的免疫层析（Immunochromatography,IC)试纸条，因其使用靶向不同表位的单克隆抗体作捕获和检测抗体，所以价格较高。而使用CPV重组截短VP2蛋白产生兔多克隆抗体作捕获抗体和单克隆抗体做检测抗体，组装成新的试纸条，其灵敏度与特异性和商用的试纸条相似。单克隆抗体和兔多克隆抗体组合的方法降低了成本，为检测CPV抗原提供了可接受的替代方案[8]。

5 犬细小病毒病的防治

5.1 预防

犬细小病毒对外界的抵抗力强，存活时间较长，传染性极强。确诊后应立即将病犬进行隔离饲养。防止病犬与健康犬直接或间接接触传染，犬舍及场地用0.5%的过氧乙酸等反复消毒，排泄物和呕吐物应及时处理干净，并对病犬的饲料用具消毒。消毒液中84和杜邦-卫可均是有效消毒剂。日常做好防疫消毒工作，主要是对犬舍内外进行严格的彻底消毒，至少每周一次。为防止疫病的发生，应严格做好免疫接种。目前多次接种疫苗是预防本病的根本措施。幼犬应在6～8周龄开始接种疫苗，每隔2～4周免疫一次，持续到16～18周龄；16周龄以上未接种过疫苗的可以每隔2～4周免疫一次；配种前的母犬应在两周前免疫一次，提高幼犬母源抗体水平[9]。做好犬细小病毒病的诊断，注意与细菌性肠炎、出血性胃肠炎、中毒性肠炎、传染性肝炎、犬瘟热等疾病进行区别诊断。

5.2 治疗

（1)对病犬初期首先实施隔离，应配合使用单克隆抗体和高免血清治疗，提高治愈率。另外，应用广谱抗多病免疫球蛋白、干扰素α或巨力肽等药物治疗早期使用都有良好效果。目前有试验表明，使用母体血或康复犬血治疗效果明显。

（2)补液疗法：对病犬禁止直接饮食饮水，病犬脱水较轻，无呕吐且有饮欲时可以口服补充盐液。病犬脱水严重时应通过输液等方式进行补水，如使用5%葡萄糖盐水加入5%碳酸氢钠注射液给予静脉注射。可根据脱水的程度决定补液量的多少，纠正病犬的电解质平衡，防止机体严重脱水、器官功能降低、体内酸碱失调，导致机体死亡[10]。

（3)止血：可以选用肾上腺素、维生素K等。止吐，持续性呕吐可以使用阿托品或氯丙嗪等药物或使用地塞米松和庆大霉素1:4混合一次灌入直肠。止泻：严重的持续性腹泻可使用呋喃唑酮、水杨酸铋等。防止继发性感染：可以使用庆大霉素、氨苄西林、头孢曲松钠等。通常细小病毒病的治疗不能使用地塞米松药物，容易引起严重的拉血症状。

（4)痊愈后对犬的饮食要注意控制，避免喂食肉类等不易消化的食物。可以口服酵母片来辅助恢复肠胃。

（5)对于病死犬应作无害化处理，将病死犬消毒深埋或焚烧处理，对病死犬的环境彻底消毒。