单唾液酸四己糖神经节苷脂钠联合亚低温对新生儿HIE血清炎症因子、神经损伤及神经行为的影响

曹 娟，王红怡，霍开明，吴振奎，陈慧玉

(1.海南现代妇女儿童医院儿科，海南 海口 571100；2.海南医学院第二附属医院儿科，海南 海口 570311)

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)具有高致残率等特点，是造成新生儿后期神经功能障碍和死亡的一个主要原因[1]。既往研究指出，采用全身亚低温疗法进行治疗不仅可有效降低患儿全身温度，而且可有效调节患儿脑部耗氧量，从而具有保护神经元的作用[2]。单唾液酸四己糖神经节苷脂钠为含有唾液酸的鞘糖脂，由神经酰胺和寡糖链组成，能轻易透过血脑屏障，下调兴奋性氨基酸水平，减轻机体神经毒性，促进神经元生长分化，有助于治疗HIE。为此，本文通过前瞻性随机对照研究，分析单唾液酸四己糖神经节苷脂钠联合亚低温对HIE患儿血清炎症因子、神经损伤及神经行为的影响，旨在探究单唾液酸四己糖神经节苷脂钠联合亚低温在HIE患儿中的治疗效果。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2016年1月至2019年6月于海南现代妇女儿童医院收治的HIE新生儿84例为研究对象。纳入标准：①1min Apgar评分≤3分；②足月儿；③获得患儿家属知情同意；④具有全身亚低温治疗的适应证。排除标准：①合并其他先天性疾病；②宫内感染；③颅内出血者；④母亲伴有药物依赖史、吸毒史；⑤中途退出研究。将所有研究对象随机分为对照组和联合组各42例。对照组男24例、女18例，孕周(39.78±1.85)周，剖宫产15例、阴道分娩27例，1min Apgar评分(2.92±0.23)分，出生体重(3 002.13±346.75)g，出生时间(7.63±1.27)h，脐动脉血pH(6.53±1.37)。联合组男16例、女26例，孕周(39.95±2.13)周，剖宫产19例、阴道分娩23例，1min Apgar评分(2.86±0.26)分，出生体重(2 976.58±364.36)g，出生时间(7.54±1.31)h，脐动脉血pH(6.64±1.32)。两组患儿男女比例、孕周等非研究临床资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经海南现代妇女儿童医院伦理委员会批准通过。

1.2治疗方法

两组首先均行常规对症治疗，包括控制血压，限制液体输入量，纠正水、电解质失衡，维持动脉血气，降低颅内压，营养支持治疗，呼吸支持等。对照组采取单唾液酸四己糖神经节苷脂钠治疗，将20mg单唾液酸四己糖神经节苷脂钠(国药准字H20050184)溶于50mL 0.9% NaCl溶液内静脉滴注治疗10d，每天1次，间隔15d为1个疗程，共治疗3个疗程。联合组采取单唾液酸四己糖神经节苷脂钠+全身亚低温治疗，其中单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的用法、用量与对照组相同；全身亚低温疗法：将患儿置于26℃的空调房，行全身亚低温26～28℃的远红外辐射，将探头置于患儿鼻咽部，控制患儿皮肤温度为33.0～34.5℃，鼻咽部温度控制在33.5～34.5℃，直肠温度为34.0～35.0℃，亚低温维持治疗3d。

1.3观察指标

分别于治疗前和治疗结束后，取两组患儿清晨空腹外周静脉血3mL，3 000r/min离心10min，分离血清，置于-80℃冰箱内保存待测。采用酶联免疫吸附法对患儿血清神经损伤标志物和炎症因子的水平进行检测，试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司。血清神经损伤标志物包括S100β蛋白、髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)，血清炎症因子包括白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)。神经行为的改善状况采用神经行为测定评分量表(neonatal behavioral neurological assessment，NBNA)评价，该量表由一般反应、原始反射、主动肌张力、被动肌张力和行为能力5个项目组成，总分40分，以37～40分判为正常，反之为异常[3]。

1.4统计学方法

2结果

2.1治疗前后两组患儿血清炎症因子的比较

治疗后两组患儿血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于治疗前(P<0.05)，且治疗后联合组患儿血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于对照组，差异有统计学意义(t值分别为4.982、5.894、5.791，P<0.05)，见表1。

表1 两组患儿治疗前后血清炎症因子水平比较Table 1 Comparison of serum inflammatory factor levels before and after treatment in the two groups of

2.2两组患儿治疗前后血清神经损伤标志物的比较

治疗后，两组患儿血清S100β蛋白、NSE及MBP的含量均降低(P<0.05)，且治疗后联合组血清S100β蛋白、NSE及MBP含量均低于对照组，差异有统计学意义(t值分别为6.736、7.626、7.942，P<0.05)，见表2。

表2 两组患儿治疗前后血清神经损伤标志物比较Table 2 Comparison of serum nerve injury markers before and after treatment in the two

2.3两组患儿治疗前后神经行为测定评分及不良反应的比较

治疗后两组患儿神经行为测定评分均明显增高(P<0.05)，且治疗后联合组的神经行为测定评分高于对照组，差异有统计学意义(t=5.191，P<0.05)，见表3。两组治疗期间均未发生药物及亚低温不耐受或其他不良反应。

表3 治疗前后两组患儿神经行为测定评分比较分)Table 3 Comparison of neurobehavioral measurement scores of the two groups of children before

3讨论

既往研究报道，亚低温疗法可阻滞多种炎性介质的释放，从而可有效减轻机体炎症状态，改善脑缺血再灌注损伤[4]。另有研究指出，亚低温疗法可有效抑制脑细胞凋亡途径，减轻反应基因抑制缺氧缺血的作用，从而在一定程度上具有保护神经功能的效果[5]。既往研究发现，新生儿HIE炎症反应与机体内不同炎性细胞因子及患儿脑组织受损的过程存在显著关系，特别是IL-1β、IL-6、TNF-α等均可引起机体发热甚至休克等不同病理反应[6]。

3.1联合治疗对炎症状态的影响

IL-1β、IL-6、TNF-α均与HIE患儿的病理过程密切相关[7-9]。既往研究表明，IL-6作为重要的促炎症反应因子之一，其对中枢神经系统不仅有着神经保护的作用，而且有着神经毒性的作用；TNF-α作为重要的细胞因子之一，是经单核巨噬细胞分泌而成，其在不同人体生理过程中发挥着显著的调节作用[10]。本研究结果表明，在单唾液酸四己糖神经节苷脂钠静脉滴注治疗的同时，联合应用全身亚低温疗法可有效抑制IL-1β、IL-6、TNF-α等多种炎性介质的释放，从而有效改善HIE患儿血清促炎因子的水平，抑制机体炎症状态。两者联合治疗，可减轻神经毒性，增加脑血流量，减少脑组织氧耗，保护神经元，缓解HIE患儿脑部炎症状况。

3.2联合治疗对氧化应激和神经行为的影响

S100β蛋白、NSE、MBP均为神经氧化应激因子，亦是临床常用于反映神经损伤的主要标志物。其中，S100β蛋白主要处于雪旺细胞、少突胶质细胞及星形胶质细胞中，可有效调节细胞形态，且在神经细胞分化方面具有重要作用，同时对神经可塑性具有一定影响。已有研究表明，外周血中S100β蛋白水平越高，预示着神经受损程度越严重，提示二者具有显著正相关关系[11]。NSE是一种糖酵解过程中产生的催化酶，分布于中枢神经组织中，具有良好的稳定性，在维持神经细胞生理功能方面具有重要的作用[12]。研究表明，在发生脑病后，因神经浆膜功能及结构受损，使得NSE自神经元胞内释放并入脑脊液，进而渗入外周血，使得其在外周血中的水平明显升高，这亦是判断脑损伤的一项重要标志[13]。本研究显示单唾液酸四己糖神经节苷脂钠静脉滴注+全身亚低温疗法可有效改善HIE患儿神经行为，减轻神经损伤，对患儿神经功能具有一定的保护作用。原因可能为神经节苷脂能轻易透过血脑屏障，下调兴奋性氨基酸水平，减轻机体神经毒性，促进神经元生长分化[14-15]。神经节苷脂可增加脑血流量，保护脑细胞膜，促进轴突生长，增强神经营养及重构[16]；亚低温可减少脑组织氧耗，保护神经元，缓解铁介导的神经毒性作用。两者联合可有效缓解HIE患儿脑部炎症状况，对其神经元细胞起到良好的保护作用，进而有助于改善患儿脑部神经功能，最终能够促进疾病的康复[17]。

综上所述，在单唾液酸四己糖神经节苷脂钠静脉滴注治疗的同时，联合应用全身亚低温疗法可有效改善新生儿HIE血清促炎因子的水平，改善神经行为，减轻神经细胞损伤，因此该联合疗法具有潜在的临床应用前景。