益生菌预防新生儿ABO溶血并发新生儿坏死性小肠结肠炎的临床疗效分析

梅 涛，李晓英，张 琳，朱荣平

(常州市妇幼保健院新生儿科，江苏 常州 213000)

新生儿ABO溶血病(hemolytic disease of newborn，HDN)是新生儿常见的疾病之一，发病原因为母体与新生儿血型不同而出现同族免疫性溶血反应，HDN是新生儿血清总胆红素(total bilirubin，TBIL)升高的主要原因之一[1]。血清TBIL水平过高会导致一系列临床症状出现，常见有黏膜、皮肤、巩膜黄染等，持续升高还会出现中枢神经系统损伤，同时对患儿心、肝、肺、肾等多处脏器造成损伤，患儿出现坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)的可能性也会增大[2-3]。因此，改善新生儿溶血反应，降低TBIL水平是临床预防HDN相关并发症的主要手段[4]。目前，临床降低TBIL水平主要采用蓝光疗法、静脉滴注白蛋白，其对病情较轻的患儿疗效较好，但对病情危重、黄疸发生早的患儿治疗耗时较长[5]。为了尽快改善患儿临床症状，降低并发症发生率，临床需要找到更多方法对患儿进行干预治疗。经研究发现，益生菌可以调节人体肠道菌群，对NEC具有预防作用，但目前临床上关于益生菌对HDN患儿的预防作用研究结果较少[6]。基于此，本研究采用病例对照的方法，对78例HDN新生儿进行治疗，探讨其对HDN患儿的干预效果。

1资料与方法

1.1一般资料

本研究选取2019年9月至2020年9月于常州市妇幼保健院分娩的78例HDN新生儿为研究对象，将其随机分为观察组与对照组，各39例。纳入标准：①母儿血清学溶血检查符合《小儿内科学》HDN诊断标准[7]：母亲血型为O型，患儿血型为A型或B型，患儿伴有黄疸表现，血清学检测抗体释放试验阳性、抗人球蛋白试验阳性或游离抗体试验阳性；②监护人自愿参加并签署知情同意书。排除标准：①患有消化道畸形、复杂性先天性心脏病等各种先天性畸形；②染色体改变者或先天性宫内感染者；③药物过敏者。本研究获我院伦理委员会批准。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组HDN患儿基础资料比较Table 1 Comparison of basic data between the two groups of HDN

1.2研究方法

对照组采用常规治疗，包括纠正酸中毒、补液等退黄措施，蓝光照射7d，静脉注射10%人血白蛋白(进口药品注册证号S20160018)，剂量为1g/kg，使用1～3d。观察组在对照组基础上服用益生菌，益生菌制剂为培菲康(双歧杆菌三联活菌散，国药准字S10970104)，低于40℃冲服，或结合母乳、配方奶冲服，2.0g/袋，每次1/4袋，2次/d，持续治疗7d。

1.3观察指标

①测定两组治疗前、治疗7d后TBIL、红细胞计数(red blood count，RBC)、血红蛋白(hemoglobin，Hb)水平：采用OLYMPUS AU5400生化检测仪测定TBIL水平，采用美国生产的COULTER ACT 5diff AL仪检测RBC、Hb水平；②统计两组NEC发生率，参考Bell标准诊断[8]；③测定两组治疗前后肠屏障功能：采用分光光度计法测定二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO)、D-乳酸水平，其中DAO活力测定采用南京建成科技有限公司DAO试剂盒(生产批号20120926)，D-乳酸水平测定采用成都博世生物技术提供的D-乳酸试剂盒(生产批号BD0405)，测定时点同①；④测定两组治疗前后T淋巴细胞亚群水平：采用流式细胞检测法检测CD4+、CD8+水平，并计算CD4+/CD8+比值，仪器为美国BD公司的流式细胞仪CantoⅡ。

1.4统计学方法

2结果

2.1两组HDN患儿治疗前后TBIL、RBC及Hb水平比较

治疗前两组TBIL、RBC及Hb水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)，治疗后两组TBIL、RBC及Hb水平均低于治疗前，且治疗后观察组TBIL水平低于对照组，差异有统计学意义(t=3.776，P<0.05)，治疗后两组RBC、Hb水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 两组HDN患儿治疗前后TBIL、RBC及Hb水平比较Table 2 Comparison of TBIL,RBC and Hb levels before and after treatmentin the two groups of HDN

2.2两组HDN患儿NEC发生率比较

观察组NEC发生1例(2.56%)，对照组发生7例(17.95%)，观察组NEC发生率低于对照组，差异有统计学意义(χ2=5.014，P<0.05)。

2.3两组HDN患儿治疗前后肠屏障功能比较

治疗前两组DAO、D-乳酸水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后观察组DAO、D-乳酸水平低于对照组，差异均有统计学意义(t值分别为8.184、9.017，P<0.05)，见表3。

表3 两组HDN患儿治疗前后肠屏障功能比较Table 3 Comparison of intestinal barrier function between the two groups ofHDN children before and after

2.4两组HDN患儿治疗前后T淋巴细胞水平比较

治疗前两组CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后观察组CD4+、CD4+/CD8+高于对照组，CD8+低于对照组，差异均有统计学意义(t值分别为6.272、6.251、3.006，P<0.05)，见表4。

表4 两组HDN患儿治疗前后T淋巴细胞亚群水平比较Table 4 Comparison of T lymphocyte subsets before and after treatment between the two groups of

3讨论

ABO血型不合是新生儿发生HDN的常见原因，HDN是患儿体内TBIL升高的主要原因之一，TBIL升高会导致患者出现一系列并发症，NEC是常见并发症之一[9]。NEC作为一种炎症性肠病，其发病率及死亡率均较高，临床表现为腹胀、呕吐等，严重时甚至会出现暂时性休克，威胁患儿生命安全。因此，临床需及时采取有效措施降低TBIL水平及HDN并发症发生率[10]。

3.1益生菌治疗HDN患儿可显著改善患儿TBIL水平

本研究中，治疗后两组TBIL、RBC及Hb水平显著低于治疗前，治疗后观察组TBIL水平显著低于对照组，治疗后两组RBC、Hb水平比较差异无统计学意义,提示益生菌治疗HDN患儿可显著改善患儿TBIL水平，但对RBC、Hb水平改善不明显。其原因可能为益生菌可以调节人体胃肠道菌群构成比例及数量，增加肠道内厌氧类菌群数量，降低有害菌群的数量，改善肠道微生态平衡，同时具有一定抗感染作用。另外，益生菌可通过减少结合TBIL分解来降低未结合TBIL数量，还可通过刺激肠道蠕动来使TBIL从肠道内排出，以此降低TBIL水平[11]。益生菌对RBC、Hb水平改善不明显可能是样本量较小、治疗时间较短所致，还需要长期的观察。

3.2益生菌治疗HDN患儿可显著降低NEC发生率，改善患者肠屏障功能

本研究观察组NEC发生率低于对照组，治疗后观察组DAO、D-乳酸水平低于本组治疗前及对照组治疗后，提示益生菌治疗HDN患儿可显著降低NEC发生率，改善患者肠屏障功能。有学者对817例新生儿HDN并发新生儿NEC的高危因素分析发现，未发生NEC的新生儿使用益生菌治疗的占比显著高于发生NEC的新生儿，表明益生菌对HDN患儿发生NEC具有较好预防作用，与本次研究结果相符[12]。其原因分析如下：益生菌可以补充肠道所需的正常菌群如双歧杆菌、乳酸杆菌、酵母菌等，刺激其生长与繁殖，同时抑制外源细菌定植和内源致病菌如致病性大肠杆菌、葡萄球菌、肠球菌等过度繁衍，以此调节肠道内菌群微生态平衡，提高肠屏障功能，发挥免疫调节作用，恢复肠道吸收消化功能，降低NEC发生率[13]。同时益生菌在酸性环境和胆汁中稳定，在肠黏膜定植并进行黏附，使肠道产生抗微生物的物质修复肠黏膜，还可通过促进肠上皮细胞粘蛋白分泌来改善患者肠屏障功能[14]。

3.3益生菌治疗HDN新生儿可显著提高患儿机体免疫功能

本研究中，治疗后观察组CD4+、CD4+/CD8+高于本组治疗前及对照组治疗后，CD8+低于本组治疗前及对照组治疗后，提示益生菌治疗HDN新生儿可显著提高患儿机体免疫功能。益生菌主要通过对细胞因子的调节作用来对T淋巴细胞免疫作用产生影响，一方面，益生菌可调节树突状细胞对T淋巴细胞的调控；另一方面，益生菌还可以通过细胞信号转导途径，影响细胞因子的产生，激活巨噬细胞，以此提高患儿机体适应性免疫功能和固有免疫能力，改善CD4+/CD8+比值[15]。

综上，益生菌治疗HDN新生儿可显著降低TBIL水平，降低新生儿NEC发生率，改善患儿肠屏障功能和机体免疫功能，值得临床推广。