妊娠期高血压疾病早期肾损伤患者检测血清胱抑素C及尿液肾损伤分子-1的临床意义

张 赟 苏家林 卢朝霞 谢淑琴 郑九生▲

1.江西省妇幼保健院产科，江西南昌 330000；2.江西省妇幼保健院肿瘤科，江西南昌 330000

妊娠期高血压疾病属于妊娠期常见并发症，严重影响孕产妇、围生儿健康，同时也是令母婴死亡的因素之一[1-2]。截止目前，临床未查询到头发妊娠期高血压疾病的病因，但随病症不断发展，妊娠期高血压疾病可能会损伤机体重要器官，其中肾损伤较为常见[3-4]。肾损伤临床判别指标为尿微量蛋白与肾小球滤过率，但两项数值的变化往往体现在较为严重的肾损伤之后，缺乏一定敏感性，因此不能对早期肾损伤进行评估[5-6]。基于此，本研究旨在探讨妊娠期高血压疾病早期肾损伤产妇检测血清胱抑素C（serun cystatin C，SCys C）、尿液肾损伤分子-1（renal injury molecule-1，KIM-1）的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至12月江西省妇幼保健院收治的30 例妊娠期高血压疾病早期肾损伤产妇作为试验组，选取同期30 例妊娠期高血压疾病而无肾损的产妇作为对照组。试验组产妇年龄22～37 岁，平均（29.5±4.0）岁；孕龄24～31 周，平均（27.5±3.0）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；单胎18 例，多胎12 例。对照组产妇年龄23～38 岁，平均（30.5±4.5）岁；孕龄25～32 周，平均（28.5±3.5）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；单胎19 例，多胎11 例。两组产妇的年龄、孕龄、孕次等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本次研究经医院医学伦理委员会审核批准。纳入标准：①处于妊娠期，孕周＞22 周；②意识清晰，沟通无阻碍；③24 h 尿蛋白定量水平增高；④产妇或家属对本研究知晓并签署知情同意书。排除标准：①同时参与另一研究者；②每日酗酒、抽烟者；③原发肾脏损伤者。

1.2 方法

实验试剂与设备： 尿KIM-1 试剂盒、 血清CysC试剂盒，全自动生化分析仪（西门子ADVIA2400），紫外线分光光度仪（型号：UV2100）。

两组产妇入院第2 天清晨采集尿液标本，离心分离处理后留取上层尿液，采用酶联免疫吸附法检测KIM-1，步骤如下：取出试剂盒与尿标本，在酶标包被板上设置选取10 孔标准品孔，将标准品与稀释液标准品加入孔内； 将样本稀释液直接标记为标准浓度0.1 mg/L；加样：选取空白孔与待测样品孔，将50 ml样品放入空白孔内； 将50 ml 样品稀释液放置空白孔； 依次在另一侧孔中放入40 ml 样品稀释液、10 ml待测样；在酶标板孔底部置入样品，期间尽量不去触碰孔壁，轻晃混匀。酶标板经版模加固封闭后，将其放入37℃保温箱内，时间为30 min；配备30 倍蒸馏水与30 倍浓缩洗涤液作为备用，将酶标板上板膜揭掉并将其甩干，在每孔内径洗涤后并注满，连续洗涤5 次之后将其甩干；将50 ml 酶标试剂放入每孔内，之后展开洗涤与温育；以此经50 ml 显色剂A、50 ml 显色剂B 加入每个孔内，混匀轻震，避开室温环境，显色15 min；在每孔内放置50 ml 终止液，此时蓝色会立即转化为黄色； 加入终止液15 min 后，利用酶标仪在450 mm 波长处测定每孔吸光度。

两组产妇入院2 d 清晨空腹下抽取静脉血，置于无菌管，室温静置10 min，2000 r/min，将血清离心分离，留取上清液，应用乳胶增强免疫比浊法测定血清Cys C 浓度。

1.3 观察指标及评价标准

比较两组产妇的尿N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine，NAG）、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 水平及不良母婴结局发生率。①观察两组肾功能相关指标，判定依据：尿NAG 正常值0.3～12 U/L；24 h 尿蛋白定量正常值＜150 mg；SCys C 正常值0.5～1.1 mg/L；KIM-1 正常值＜1 μmol/L；②不良母婴结局包括胎儿生长受限、新生儿窒息、新生儿低血糖与呼吸窘迫。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，两组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组产妇肾功能指标的比较

试验组产妇的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组产妇肾功能指标的比较（±s）

表1 两组产妇肾功能指标的比较（±s）

组别 尿NAG（U/L）24 h 尿蛋白定量（mg）SCys C（mg/L）KIM-1（μmol/L）试验组（n=30）对照组（n=30）t 值P 值8.91±1.24 1.72±0.35 30.565 0.000 272.08±26.88 118.13±15.39 27.223 0.000 7.05±1.02 0.86±0.12 33.012 0.000 3.26±0.44 0.86±0.13 28.651 0.000

2.2 两组不良母婴结局发生率的比较

试验组的不良母婴结局胎儿生长受限、新生儿窒息、 新生儿低血糖与呼吸窘迫发生率均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

3 讨论

通过文献资料分析，妊娠期高血压引起的肾损伤在孕产妇死亡原因中排在前三，由此可知，该疾病属于孕产妇严重并发症，同时在临床产科中属于重要研究课题之一[7-8]。该疾病发展过程中，产妇全身出现异常，即原本体内正常小血管发生痉挛，继而引发血管内皮细胞损伤，严重时或疾病病程发展，会逐渐发生局部缺血，令其原有器官、系统血液灌流量降低[9]。血肌酐属于人体肌肉代谢生成的小分子物质，会经肾小球过滤，随尿液排出，因此临床将该指标作为反应肾小球过滤功能的标志之一。尿素氮主要是由肾脏排泄的蛋白质分解产物，机体肾功能产生改变时，尿素氮正常排泄受到影响，其含量升高，因此临床会采用两项指标对早期肾损伤进行判断。但因检测数据结果灵敏度较低，加之该水平值结果易受到他类干扰因素，因此不能直观地对早期肾损伤进行诊断，从而临床需选取早期肾损伤标志物为疾病实施诊断与早期治疗[10-11]。

尿NAG 临床中属于肾功能相关指标，可对肾脏进行监测。该指标为早期肾脏损伤监测指标之一，各种肾脏实质性疾病引起的肾小管损害都有可能会导致尿NAG 升高。Cys C 属于人体中的一种血清因子，即半胱氨酸蛋白酶抑制，其属性可与体内所有核细胞进行合成、分泌，因此稳定生成速率较高[12]。该抑制剂体积、分量较小，因此在肾小球中可自由畅行，并顺利留置原尿中，但该因子存在于原尿中时，临近肾脏近曲小管会将其全部吸收，吸收后实施分离与分解，分解可成为小分子肽或是氨基酸。分离后的因子，肾脏近曲小管无法再次进行吸收与释放[13-14]，故可将Cys C作为临床上对肾小球滤过功能的理想内源性物质之一。KIM-1 最早发现是在1998年临床动物实验中，其本质在临床中属于T 细胞免疫球蛋白黏膜结构域1。有研究发现，KIM-1 的表达方式与其他细胞不同，或是不以任何表达形式，但当机体受多类疾病损伤时，该指标会显现与肾小管上皮细胞表面的表达中，即表达形式可为，水平值处于上升阶段，且KIM-1 作为Ⅰ型跨膜糖蛋白时，其表达数据也只会在肾脏损伤时出现，故而临床将其指标作为诊断早期肾小管损伤的标志物之一[15]。本研究结果显示，试验组产妇的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示Cys C、KIM-1 检测可用于对妊娠期高血压早期肾损伤产妇的早期筛查。

综上所述，SCys C、UKIM-1 检测对于妊娠期高血压疾病早期肾损伤诊断具有一定价值。