院外感染性肺炎分子检测技术的应用进展

丁洪锋

（天等县疾病预防控制中心，广西 崇左，532800）

院外感染性肺炎（ZCP）已成为公共卫生问题，其是指除院内感染以外的感染性肺炎，主要由多类病原体所导致[1]。目前，临床将ZCP可归纳为两大类：一类为自然疫源性疾病原诱发肺炎，另一类为社区获得性肺炎（CAP）[2]。CAP发病率逐年呈上升趋势，已成为全球范围内高经济负担疾病，以小儿、老年患者最为多见，且伴有不同程度的地区分布差异。而自然疫源性病源诱发的ZCP则以青壮年最为多见，且男性占比例较多[3]。而我国CAP患者只能培养常规病原体，且培养阳性率相对免疫学检测较低，一般为50%左右。同时部分对培养较高的细菌、病毒，无法通过常规分离培养进行判断[4]。现阶段，临床多以病原常规分离培养、血清学检测实施诊断，分子检测应用地区较为少见。但临床医师判断ZCP患者病原学相关信息相对较为困难，治疗时存在一定局限性，使其通常在等待结果期间，实施光谱抗生素及抗病毒治疗，进而直接增加抗生素滥用现象[5]。因此本文对ZCP实施分子检测技术进行分析，现综述如下：

1 细菌性、支原体、衣原体感染ZCP分子检测现状

细菌感染属于诸多地区，诱发CAP的关键因素。现阶段，以呼吸道致病菌的实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）的方案已产生，能够在较短时间内，检测多类常见致病菌，具有较佳的特异性及敏感度，特别是肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌等[6]。而对呼吸道标本分别实时荧光PCR检测和细菌培训，将两者实施联合试验，则可有效提高金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等检出率[7]。

1.1 嗜肺军团菌感染的ZCP分子检测嗜肺军团菌的分子检测技术具有多种，其暴露核酸分型鉴别技术、PCR相关技术、分子杂交的探针技术，其中以荧光定量PCR最为多见[8]。相关学者，将荧光定量PCR应用于肺炎患者呼吸道、血清标本的检测，也有学者，通过多重荧光定量PCR技术检测不同团菌属[9]。而我国也具有嗜肺军团菌检测方法的报道，通过嗜肺军团菌mip基因，制定相关引物，该技术具有安全性高、灵敏度高等优势[10]。

1.2 肺炎支原体感染ZCP分子检测PCR检测技术已在肺炎支原体疾病中得到广泛应用，其安全性、准确度以及灵敏度明显优于血清抗体检测[11]。相关学者，选择220例肺炎患儿肺泡灌洗液实施PCR检测，结果显示，肺炎支原体阳性率可达到50%。而实时荧光定量PCR与传统PCR相比较，更加简便[12]。

1.3 肺炎衣原体感染ZCP分子检测PCR技术能够准确、快速检测肺炎支原体。有关学者选择PCR技术筛选93例感染肺炎患者，其中肺炎衣原体感染率可达到32.6%[13]。而实时荧光定量PCR法与荧光抗体法，具有更高的检出率，能够用于临床诊断[14]。

2 病毒感染ZCP分子检测现状

而由病毒所诱发的ZCP，其流行特点、感染症状与细菌较为相似，故单一依据临床症状、分离培养进行检测病毒，存在明显局限性[15]。国内外诸多学者显示，通过分子诊断技术，对不同病毒实施检测方法，PCR技术已在应用于病毒性肺炎检测，以逆转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)使用较多，可适用于多类病毒，但检测非典（SARS）病毒时，疾病早期RT—PCR敏感性较低[16]。

3 寄生虫造成的ZCP分子检测

寄生虫诱发ZCP于临床较为少将，该症状、影响以及生化检查表现，与细菌或病毒造成的肺炎差异较低，故极易增加误诊风险。而造成肺炎的寄生虫包括多类，如溶组织阿米巴、疟原虫、利什曼原虫、弓形虫、蛔虫等[17]。在检测蛔虫时，一般选择Western blot技术，而随着分子生物学检测技术的完善，诸多寄生虫检测已逐步实施PCR技术[18]。

4 真菌造成的CAP分子检测

近年来，全国真菌感染发病率逐年呈上升趋势，一般以假丝酵母菌、毛霉、新生隐球菌、曲霉等，被公认为主要的机会致病菌，但目前在浅白隐球菌等不常见的真菌感染，明显呈上升趋势，故受到诸多医学者的广泛关注。相关研究发现，基于核酸的探究，能够补充常规真菌检测方案。目前，用于诊断真菌性疾病分子手段以PCR最为常见，其特异性、灵敏度均需有待上升。通常PCR局限性，无法合理分辨定植真菌和致病真菌，而实时荧光定量PCR则可进行[19]。大量文献证实，实时荧光定量PCR能够替代免疫荧光法。但现阶段，分子方案于检测真菌感染方面，伴有不同程度的缺陷性，如真菌细胞壁无法穿透，获得完整真菌难度系数较大，诸多商业生成的试剂和血管，伴有真菌DNA污染，造成实验诱发假阳性结果，同时真菌分子检测技术现阶段，尚未统一标准[20]。

5 小结

综上所述，于我国医疗系统中，临床专注于治疗，虽诊断属于最佳有效的前提，但受到多类因素的干扰，部分更先进、更准确、更快速的诊断措施，无法在临床得到广泛应用。同时疾控部分致力于疾病的检测，虽研究部分更先进的方案，但缺乏与临床的充分衔接。故疾控部门需与临床紧密结合互动，进而为诊断及治疗ZCP奠定一定基础。