徐州地区渐尖毛蕨孢子繁殖技术初探

韩 波， 高政平

(徐州生物工程职业技术学院， 江苏 徐州 221006)

随着生态文明建设的深入，需要大量优新园林植物资源，特别是观赏蕨类植物，已成为当今风景园林建设中的新宠儿。蕨类植物因其独特的美化、绿化、彩化和净化等功能，令人耳目一新的格调，受到人们越来越多的青睐和欣赏[1]。蕨类植物的孢子繁殖是一种快速繁育种苗的捷径，它具有繁殖量大、成本低廉、简单易行等诸多优势，是蕨类繁殖的最主要方式[2]。关于渐尖毛蕨的研究主要集中在孢子形态学特征、遗传多样性和配子体发育等方面[3]。本研究采用渐尖毛蕨孢子为试验材料，探索其孢子萌发因素、幼孢子体形成和孢子体幼苗后期生长发育，为进一步开发徐州地区蕨类资源、探索适合蕨类植物人工繁殖和规模化生产提供理论依据和技术指导。

渐尖毛蕨(Cyclosorusacuminatus(Houtt.) Nakai)别名金星草、小叶凤凰尾巴草、小水花蕨、牛肋巴、黑舒筋、舒筋草，为金星蕨科植物渐尖毛蕨的根茎或全草。株高0.8～1.5 m，根茎长而横生，叶柄长0.3～0.6 m，深禾秆色，叶片厚纸质，披针形，长0.6～1.0 m，宽0.15～0.3 m；羽片15～20对，互生，无柄，线状披针形，先端渐尖，基部截形，羽状浅裂至半裂。入药有清热解毒，祛风除湿，健脾之功效。孢子深褐色，两侧对称，单裂缝，极面观为椭圆形，赤道面观为半圆形，外壁具颗粒，周壁两层，外层向外隆起形成孢子纹饰，呈鸡冠状[4]；孢子囊群圆形，背生于侧脉中部稍上处，囊群盖大，圆肾形，棕色，膜质，最后卷缩，密生柔毛。

1 孢子的收集与保存

孢子采集时间为7—11月。剪取带有外观呈棕褐色孢子囊未开裂的孢子囊群的羽片，放于室内，下铺报纸进行自然干燥，3～5 d孢子囊开裂，约1周后，轻轻拍打干燥后的孢子叶，使孢子自然散落，用硫酸纸收集孢子。置于冰箱2～4 ℃的条件下保存。

2 播前处理

2.1 孢子处理

将渐尖毛蕨孢子用滤纸包好，用棉线扎紧，先在75%的酒精中浸泡15～20 s，然后再放入5%NaClO溶液浸泡5～8 min杀菌、消毒，用无菌水反复冲洗3～5次。在无菌培养皿中小心打开纸包，用少量无菌水将滤纸上的孢子冲入培养皿中，再将孢子悬浮液倒入已高压灭菌的三角烧瓶中，并用少量无菌水冲洗培养皿后一并倒入三角瓶，用封口膜封好三角瓶备用[5]。

2.2 土壤处理

2.2.1混合基质

渐尖毛蕨在徐州地区最适宜培养的是营养土∶沙壤土=1∶1混合基质。苗床长宽可以结合温室大棚尺寸而定。为了保证肥料的长效供应，床土施肥应采取基肥为主、化肥为辅的原则，用量为有机肥30 t·hm-2，氮肥0.3 t·hm-2，磷肥0.35 t·hm-2，钾肥0.1 t·hm-2。基质要严格过筛、加湿。

2.2.2土壤杀菌杀虫

1) 高温消毒法。在夏季高温时，用麦秸或稻草15 t·hm-2，铡成5 cm长短，均匀撒在地面上，再用石灰0.3 t·hm-2均匀施撒，翻地、藻水、铺膜，密闭大棚温室15～20 d，当土壤温度提升至60～70 ℃时能有效杀死土壤中的病菌和线虫[6]。

2) 药液消毒法。用50%多菌灵可湿性粉剂，加50%辛硫磷乳油或5%阿维菌素、40%辛硫磷剂喷洒于土壤表层，经翻耕、灌水、使药液渗入土中，能有效杀死土壤中的病菌及虫类。

3 播种孢子

3.1 适时播种

在温室大棚中，一年四季均可以播种。结合徐州地区的环境条件，适宜的渐尖毛蕨孢子播种时间在3月上、中旬。

3.2 播种方法

将处理过的渐尖毛蕨孢子均匀地撒播在苗床上，用喷雾器喷透水后，及时盖上薄膜。

4 养护管理

4.1 光照管理

春天播种后，温室大棚上盖遮阳网，透光率40%左右，5月初揭开大棚薄膜，遮阳网继续盖上，至11月中旬揭去遮阳网。

4.2 水分管理

播种后最初的一段时间不必浇水，1周后揭开薄膜，每天喷雾1～2次，再盖上薄膜，保持空气湿度70%～90%。特别在60 d左右原叶体转幼孢子体期间，为有效促进精子移动，务必保证基质和原叶体表面湿润，应视湿度情况加强喷雾，保持空气湿度80%～100%，满足精卵结合所需要的水分条件。

4.3 移 植

孢子在适宜的条件下萌发生长为微小的配子体称原叶体，一般需经60 d左右成熟，当原叶体直径达0.3～0.5 cm时精子器和颈卵器发育成熟，精子器产生精子要以水为载体进行运动，以达到颈卵器与卵子结合完成受精过程形成合子，进一步发育成胚，进一步分化出蕨类植物的根、茎、叶。当观察到绿色原叶体，叶片2张，长度0.5 cm开始移植，移植前可以用竹签在苗床做穴，尺寸为直径0.8 cm、深0.5 cm，保持适宜穴距。移栽时用镊子轻轻夹取根部带土渐尖毛蕨孢子体，放置于每穴中央，轻压覆土，保持渐尖毛蕨孢子体根系与苗床基质充分接触。移植后随即用小孔喷雾器进行喷雾，每天3次，保持空气湿度≥80%、温度25 ℃左右，及时覆盖薄膜，适宜光照。小苗移栽后1周，为保证其快速生长，每周浇1～2次水，每2周喷施1次N、P、K三元复合肥(17-17-17)2 000倍液，保持环境通风良好和充足光照。

4.4 病虫草害防治

徐州地区渐尖毛蕨繁殖过程中主要的病害有赤霉病、白粉病、锈病，虫害有蚜虫、地下害虫、介壳虫，杂草有马唐、稗草、狗尾草、千金子及部分尖叶杂草和阔叶类杂草。具体防治方法如下：赤霉病用50%多菌灵可湿性粉剂1.5 kg·hm-2加水喷雾；白粉病、锈病用12.5%禾果利可湿性粉剂0.3～0.45 kg·hm-2，或15%粉锈宁可湿性粉剂0.75～1.5 kg·hm-2加水喷雾，间隔7～10 d喷一次，连防2～3次。蚜虫用40%氧乐果乳油1.5 kg·hm-2加水喷雾；地下害虫用40%辛硫磷乳油0.75～1.5 kg·hm-2拌炒香的麦麸45～60 kg，于傍晚撒于地面；介壳虫可采取释放瓢虫等捕食性天敌有效生物防治，也可选用低毒的选择性杀虫剂“邯科140”1 000倍液、毒死蜱600倍液等化学防治。禾本科杂草的马唐、稗草、狗尾草、千金子等，用精喹禾灵300 mL·hm-2兑水15 kg均匀喷施；对于尖叶杂草和阔叶类杂草混杂，可以选择甜菜安宁+高效氟吡甲禾灵。在使用除草剂时注意选择晴朗无风天气、尽量避开中午高温时段用药，严格按使用说明进行用药，不可随意增加或减少用药量。