Wnt/β-catenin 在卵巢癌发展机制中的研究

徐芳娣，高 军

（1.赣南医学院，江西 赣州 410028；2.南昌大学第三附属医院，江西 南昌 330000）

卵巢癌（ovarian cancer，OC）是妇科常见的恶性肿瘤之一，起病隐匿，其死亡率位列女性癌症死亡原因第5 位[1]。卵巢癌患者早期常无症状，晚期表现为腹胀、腹部包块、腹腔积液等症状，其主要治疗方法为手术联合化疗法，但仍存在卵巢癌化疗耐药或复发等问题。体外研究表明[2]，shRNA 介导的β-catenin沉默可抑制卵巢癌A2780 细胞增殖和集落形成。β-catenin 是Wnt/β-catenin 信号通路中的关键枢纽，在多种人类疾病尤其是肿瘤的发生发展中起重要的调节作用。有研究发现[3]，在卵巢子宫内膜样癌中，β-catenin 和CDX2 单独或联合表达是卵巢癌患者有效的预后标志物。杨尊敬等[4]在卵巢浆液性癌组织Wnt/β-catenin 信号通路蛋白的研究中发现，患者Wnt/β-catenin 信号途径蛋白WNT1、β-catenin表达量在Ⅰ～Ⅱ期上皮性卵巢浆液性癌患者中较高，FIGO 分期为Ⅲ～Ⅳ期与Wnt/β-catenin 信号通路密切相关。本文就Wnt/β-catenin 通路的激活过程及其与卵巢癌的关系作一综述，以期为卵巢癌的防治提供参考。

1 Wnt/β-catenin 通路的激活过程

Wnt/β-catenin 信号通路由Wnt 配体触发，而β-catenin 是此信号通路途径的“中枢”，可以激活下游蛋白cyclin D1、c-Myc 等基因的表达，而这些蛋白具有负责细胞周期、增殖和存活的功能。当Wnt信号未激活时，Wnt 配体不与卷曲蛋白（FZD）结合，使得驻留在细胞质中的降解复合物[AXIN，APC，DVL，酪蛋白激酶1（CK1）和糖原合酶激酶（GSK-3β）] 结合并促进细胞质中游离的β-catenin 蛋白的降解，其具体过程是CK1 和GSK-3β 使β-catenin磷酸化，磷酸化的β-catenin 靶向于（泛素连接酶蛋白）βTrCP 介导的泛素化，随后蛋白酶体降解，此时在细胞核内的转录阻遏物Groucho 与转录因子TCF结合并抑制其转录活性[5]。当Wnt 信号激活时，存在Wnt 配体与FZD 和LRP5/6 的结合，并促进DVL 的募集以及促使降解复合物向膜的迁移，降低了降解复合物磷酸化并降解细胞质中β-catenin 的能力[6]。因此，细胞质中的β-catenin 积累并转移到细胞核中，从而取代了Groucho 并与TCF 结合，与共激活因子一起启动下游靶基因的转录[7]。Shen G 等[8]研究表明，Wnt3a/b-catenin/TCF7L2 信号轴可以降低卵巢癌对曲妥珠单抗的敏感性。因此，抑制Wnt/βcatenin 信号通路可以抑制卵巢肿瘤的生长和进展。

2 Wnt/β-catenin 信号通路与卵巢癌的关系

2.1 Wnt/β-catenin 信号通路与蛋白分子相互作用调节卵巢癌的发展 研究发现新的蛋白分子作用于Wnt/β-catenin 通路，控制卵巢癌的发展。Zhang H等[9]对SFRP1 基因转染人OVCAR4 细胞进行研究，结果发现基因β-catenin、cyclin D1、c-Myc 的表达量明显减少，它能抑制癌细胞的增殖和侵袭，提示SFRP1 可能通过Wnt/β-catenin 信号通路抑制卵巢癌细胞的发生。Wang Y 等[10]研究发现，R 型蛋白酪氨酸磷酸酶受体（PTPRR）通过去磷酸化使βcatenin 失活而抑制卵巢癌中Wnt/β-catenin 通路并在卵巢癌中发挥肿瘤抑制作用。Croce S 等[11]研究表明，与雌激素反应过强的GREB1 融合转录本可导致原发和复发肿瘤中低磷酸化的核β-catenin 过表达，核β-连环蛋白的积聚导致Wnt/β-catenin 信号通路的激活。Liao YM 等[12]研究表明，子宫内膜样腺癌组织中SOX17 的表达下调，β-catenin 和cyclin D1 mRNA 的表达上调，且5-AZA 可以使SOX17 的表达上调，β-catenin 和cyclin D1 的表达下调，从而抑制卵巢癌的增殖及发展。以上蛋白分子均通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路来控制卵巢癌的发展，其可能成为卵巢癌新的潜在治疗靶点。

Dong P 等[13]研究发现，PCNP 与β-catenin 结合促进了β-catenin 核转位，进而激活了Wnt/βcatenin 信号通路；且在shRNA-PCNP 介导的SKOV3 和A2780 细胞中，β-catenin、p-GSK 及Bcl-2、N-cadherin 表达下调，而E-cadherin 表达上调，揭示沉默PCNP 能介导卵巢癌细胞周期停滞，诱导其凋亡；与此同时，因PCNP 调控了卵巢癌EMT 相关基因N-cadherin、E-cadherin 的表达，进一步证明PCNP 可通过激活Wnt/β-catenin 途径加剧卵巢癌的演变。杨宏毅[14]研究发现，TNKS1 的沉默使卵巢癌细胞AXIN 的表达上调，但是Snail、PC、CyclinD1、MDR、MMP－9 等Wnt/β-catenin 信号通路靶蛋白的表达下调，最终抑制卵巢癌细胞体外增殖、细胞集落形成、肿瘤发生，阻断体内细胞周期进程，降低卵巢癌细胞的生长和迁移能力，有效提高卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性，提示TNKS1 激活Wnt/βcatenin 途径促进卵巢癌的发生，成为卵巢癌迁移、侵袭干预的靶点以及潜在的预后标志因子。冯姗姗等[15]体外研究表明，赖氨酰氧化酶样蛋白2（lysine oxidase-like protein 2，LOXL2）的沉默可抑制卵巢癌细胞的活性并诱导凋亡，其机制可能与LOXL2 抑制Wnt/β-catenin 信号途径有关，揭示LOXL2 可作为干预卵巢癌增殖的靶点。Mehdi S 等[16]研究表明，LY75 被敲除后会抑制上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR8 中N-cadherin、β-catenin 的表达，但能促进E-cadherin，Axin1 的表达，提示LY75 的表达与间充质-上皮转化相关基因的改变有关，表明沉默LY75 可以抑制上皮性卵巢癌细胞间充质-上皮转化。邓琳[17]研究发现，卵巢癌组织环氧化酶2（cyclooxygenase-2，COX2）通过Wnt/β-catenin/EMT 途径促进卵巢子宫内膜异位症恶变及卵巢透明细胞癌转移。以上研究表明，其为正向调控Wnt/β-catenin通路的蛋白分子，它们可能是卵巢癌潜在预后标志物和治疗靶点。

2.2 Wnt/β-catenin 信号通路与RNA 相互作用调节卵巢癌的发展 RNA 也可调控卵巢癌的发生、发展。Zhuang XH 等[18]体外实验表明，沉默上皮性卵巢癌中长链非编RNAHOXB-AS3 可以使β-catenin、cyclin D1，c-Myc，N-cadherin 表达减少，E-cadherin 表达增加，抑制卵巢癌细胞的转移，揭示长链非编RNAHOXB-AS3 可能成为卵巢癌患者转移的预后判断因子。Zhou Y 等[19]研究表明，过表达miR-133a-3p 可使卵巢癌细胞中的β-catenin、cyclin D1、Wnt3a、APC 基因的表达量减少，从而抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭，提示miR-133a-3p 也可以作为卵巢癌潜在的治疗靶点及预后标志因子。Liu L等[20]研究证明，micR-6089 高表达可抑制SKOV3 细胞及OVCAR3 的增殖、迁移、侵袭，并抑制Wnt/βcatenin 信号通路的活性，所以micR-6089 可成为卵巢癌潜在预后标志物及治疗靶点。Liu HR 等[21]研究表明，UL4B 基因是miR-217 的靶基因，其可以抑制该基因的表达，进而抑制Wnt/β-catenin 信号通路的激活，逆转耐药，抑制细胞侵袭和迁移，促进细胞凋亡，因此miR-217 可以为卵巢癌治疗耐药提供新希望。RNA 分子通过调控Wnt/β-catenin 信号通路抑制卵巢癌的增殖、迁移、侵袭及间质转化，增强卵巢癌细胞化疗敏感性，其可能成为干预卵巢癌转移的潜在靶点。

2.3 Wnt/β-catenin 信号通路与药物相互作用调节卵巢癌的发展 陈茹等[22]研究表明，淫羊藿苷处理CAOV3 细胞后，细胞中β-catenin、cyclin D1，c-Myc的mRNA 水平下调，从而抑制CAOV3 细胞的增殖。另有研究表明[12]，经5-AZA 处理的HEC1A 细胞中SOX17 的表达量上调，β-catenin，cyclin D1 的表达量下调，从而抑制子宫内膜癌的发生发展，因此5-AZA 也有望通过Wnt/β-catenin 信号通路抑制卵巢癌的增殖，为卵巢癌的治疗提供新的方法。龚建明等[23]研究发现，羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A，HSYA）可能通过促进menin 表达，导致βcatenin 降解，抑制下游癌基因MMP-7 和Survivin的表达，间接抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭，促进其凋亡。Mehdi S 等[16]研究发现，XAV939 通过下调LY75 负向调控上皮性卵巢中的β-catenin 及Ncadherin 的表达，抑制上皮性卵巢癌细胞的侵袭及上皮间质化。Zhou B 等[24]研究发现，尼日利亚菌素与顺铂联合治疗可以进一步下调经顺铂单一处理的卵巢癌细胞中的β-catenin、GSK-3β、Axin2、MMP7、Vimentin 的表达量，上调E-cadherin 蛋白表达，从而抑制卵巢癌的迁移和侵袭。

3 总结

卵巢癌早期发病隐匿，是女性生殖系统恶性肿瘤中死亡率最高的癌症，卵巢癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药等与Wnt/β-Catenin 途径的异常激活有着密切联系。此外，蛋白分子、RNA 分子及药物阻断Wnt/β-Catenin 途径，可抑制卵巢癌的发展，可能成为干预卵巢癌转移的潜在治疗靶点。