妊娠后期日粮中添加苜蓿草粉对母猪繁殖性能及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响

王怀树，白银锁，王建国，任 佳，卓 娜，高如军，武玉平，梁建勇，4

（1.鄂尔多斯市杭锦旗绿美农牧业开发有限责任公司，内蒙古 杭锦旗 017400；2.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古呼和浩特 010031；3.鄂尔多斯市杭锦旗农牧技术推广中心，内蒙古 杭锦旗 017400；4.甘肃农业大学，甘肃 兰州

730070）

苜蓿含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质及微量元素等营养物质，是家畜的优质蛋白饲料［1］。 苜蓿也含有较大比例的膳食纤维， 能够提高母猪生产性能，改善肠道微生物区系，促进营养物质消化吸收，提升母猪营养水平［2］。 研究表明，在母猪妊娠期日粮中添加苜蓿能显著降低刻板行为和便秘的发生次数，显著提升繁殖性能［3］，提高仔猪初生重和断奶时体重［4-5］。 另外，在妊娠母猪日粮中添加不同比例的紫花苜蓿鲜草和苜蓿青贮， 可改善母猪生产性能以及血液和初乳理化指标［6］。 苜蓿纤维可增加采食的日粮体积，提高母猪饱食感［7］，减少异常行为［8］，高纤维对母猪肠道微生物菌群变化及其代谢物的组成有积极影响， 从而改善肠道功能［9］，减少疾病，在一定程度上提高母猪的繁殖性能和养殖效益［10］。 生产上通常通过提高麸皮比例和添加青绿饲料改变妊娠母猪日粮的纤维水平［11-12］，缓解妊娠母猪因过度饲喂产生的异常行为。

苜蓿草粉中的粗蛋白质含量接近蛋白质饲料要求，且氨基酸平衡，赖氨酸含量高。在养猪业中，关于苜蓿饲喂效果的研究多集中在生长肥育猪方面［13-17］，对苜蓿草粉在妊娠母猪饲粮中的应用研究较少。为此，该试验在母猪妊娠后期饲粮中添加不同比例的苜蓿草粉， 研究对母猪繁殖性能以及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响，为苜蓿在妊娠母猪生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验地点

该试验在内蒙古鄂尔多斯市杭锦旗绿美农牧业开发有限责任公司养猪场进行。

1.2 试验材料

试验所用苜蓿草由该养殖场种植， 在花前期刈割，经自然干燥，加工成草粉，营养成分含量为干物质87.5%， 粗蛋白18.0%， 粗纤维23.0%，钙1.65%，磷0.35%。

1.3 试验设计

采用单因子完全随机试验设计，根据胎次（1胎）、体况、预产期等基本相近原则，选择40 头妊娠后期的大长母猪作为试验动物。 将试验母猪随机分为4 组，每组10 头，每头母猪及其产仔代表一个生物学重复。 4 组母猪日粮中分别添加0（对照组）、5%（5%苜蓿草粉组）、10%（10%苜蓿草粉组）和15%（15%苜蓿草粉组）的苜蓿草粉。 母猪配种后确定妊娠85 d 进入试验期， 分娩后试验结束。

1.4 试验日粮及营养水平

试验期间饲喂的日粮参考《猪饲养标准》（NY/T 65—2004）配制，满足妊娠后期母猪和哺乳母猪的营养需要，饲粮组成及营养水平见表1。

表1 试验饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.5 试验母猪饲养管理

试验母猪从入选试验当天开始饲喂试验饲粮，每日2 次（8：00、17：00 各1 次），自由饮水。 在妊娠后期日饲喂量为3.2 kg/头。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 繁殖性能指标仔猪出生12 h 内记录每头母猪的产仔数、产活仔数，测定仔猪初生窝重、初生个体重［18］。

1.6.2 血清生化、抗氧化、免疫指标

1.6.2.1 血样采集及血清制备在妊娠第111 天，晨饲前每组随机选取5 头母猪，前腔静脉采血10mL，将新鲜血液移入5 mL 采血管，静置30 min，待析出血清时3 000 r/min 离心10 min， 然后吸取上清液，用2 mL 离心管分装，立即放入-20 ℃冰箱保存待测。

1.6.2.2 测定指标测定的血清生化指标包括总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）含量，计算白蛋白与球蛋白比值（白/球比）；谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活力。 测定的血清抗氧化指标包括总抗氧化能力 （T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）活力、超氧化物歧化酶 （SOD） 活力、 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力。 测定的血清免疫指标包括免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 含量。

1.6.2.3 测定方法血清生化、 抗氧化和免疫指标均按照试剂盒（购自中生北控股份有限公司和北京华英生物技术研究所） 说明书提供的方法进行测定。 测定仪器为迈瑞BS-420 全自动生化仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产品）和华卫德朗DR-200BS 酶标分析仪 （无锡华卫德朗仪器有限公司产品）。

1.7 数据分析

所有试验数据采用Excel 统计表格进行汇总整理，利用SPSS 19.0 统计学软件对数据进行单因素方差分析，应用Duncan 氏法进行多重比较。 试验数据使用“平均值±标准误”的形式表示。

2 结果与分析

2.1 添加苜蓿草粉对母猪繁殖性能的影响

由表2 可知，10%苜蓿草粉组的仔猪初生窝重显著（P＜0.05）高于对照组以及5%和15%苜蓿草粉组， 产仔数和产活仔数高于对照组以及5%和15%苜蓿草粉组 （P＞0.05）；3 个苜蓿草粉处理组的仔猪初生个体重高于对照组（P＞0.05）。

表2 日粮中添加不同比例苜蓿草粉对母猪产仔性状的影响

2.2 添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清生化指标的影响

由表3 可知， 日粮中添加不同比例的苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清总蛋白和球蛋白含量无显著（P＞0.05）影响，但3 个苜蓿草粉添加组母猪的血清球蛋白含量与对照组相比有所提高。 10%苜蓿草粉组母猪的血清白蛋白含量显著（P＜0.05）低于对照组，白/球比也显著（P＜0.05）低于对照组，2项指标与5%和10%苜蓿草粉组差异不显著 （P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉降低了妊娠后期母猪的血清谷草转氨酶活力（P＞0.05），提高了谷丙转氨酶活力（P＞0.05）。 添加不同比例的苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清总胆固醇、 甘油三酯和尿素氮含量无显著（P＞0.05）影响，但10%苜蓿草粉组的血清总胆固醇含量低于其他组， 甘油三酯含量高于其他处理组。 5%和10%苜蓿草粉组母猪的血清葡萄糖含量显著 （P＜0.05） 高于对照组，与15%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）。

表3 日粮中添加不同比例苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清生化指标的影响

2.3 添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清抗氧化指标的影响

由表4 可知，10%苜蓿草粉组母猪的血清总抗氧化能力显著（P<0.05）高于对照组和15%苜蓿草粉组，与5%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）；5%苜蓿草粉组母猪的血清总抗氧化能力显著（P<0.05）高于对照组，与15%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）。10%苜蓿草粉组母猪的血清丙二醛含量显著（P<0.05）低于对照组以及5%和15%苜蓿草粉组，后三者的血清丙二醛含量无显著（P>0.05）差异。 10%苜蓿草粉组母猪的血清谷胱甘肽过氧化物酶活力显著（P<0.05）高于对照组，与5%和15%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）。10%苜蓿草粉组母猪的血清超氧化物歧化酶活力显著 （P<0.05）高于对照组以及5%和15%苜蓿草粉组，5%和15%苜蓿草粉组母猪的血清超氧化物歧化酶活力显著（P<0.05）高于对照组，5%苜蓿草粉组母猪的血清超氧化物歧化酶活力与15%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）。 各处理组母猪的血清过氧化氢酶活力差异均不显著（P>0.05）。

表4 日粮中添加不同比例苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清抗氧化指标的影响

2.4 添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清免疫指标的影响

由图1 可知，10%苜蓿草粉组母猪的血清免疫球蛋白IgA 和IgG 含量高于其他处理组， 但差异均不显著（P>0.05）；10%苜蓿草粉组母猪的血清免疫球蛋白IgM 含量显著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉组， 与对照组和15%苜蓿草粉组差异不显著（P>0.05）。

图1 日粮中添加不同比例苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清免疫指标的影响

3 讨论

3.1 妊娠后期日粮中添加苜蓿草粉对母猪产仔性状的影响

目前，在规模化养猪场，为了控制妊娠母猪体况和限制营养储备过剩（特别是脂肪过度储备）而对其进行限饲，通过调整妊娠后期的饲料摄入量，最大限度地缓解分娩前的负能量平衡， 并提高哺乳早期的饲料摄入量和初生仔猪的体重［19］。 研究发现，在母猪妊娠后期饲喂高纤维日粮，能改善母猪肠道功能［20］，增加采食和休息时间，减少刻板行为和攻击行为［21］，有助于降低维持能量需要，增加孕体生长的能量供应［22］。 这可能是该试验中10%苜蓿草粉组的仔猪初生窝重显著（P<0.05）高于对照组的原因。而15%苜蓿草粉组的试验数据表明，该组仔猪初生窝重低于对照组和5%及10%苜蓿草粉组，可能是该组苜蓿草粉的添加比例过高，这与廉红霞［5］的研究结果类似。

近年来，母猪饲养中高纤维日粮的应用引起了越来越多的关注，这主要是由于其对母猪生产和繁殖性能有潜在益处。 在该试验中，妊娠后期母猪日粮添加苜蓿草粉提高繁殖性能，这可能与苜蓿草粉中含有丰富的纤维素有关。 该研究发现，苜蓿草粉处理组母猪的仔猪初生个体重有所提升， 但未达到显著水平（P>0.05），这与其他学者［5-6，23］的研究结果相似。

3.2 日粮中添加不同比例苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清生化指标的影响

母猪的血清生理生化指标主要反映体内代谢及健康状况。 血清总蛋白主要由白蛋白和球蛋白组成， 总蛋白含量的高低取决于动物机体蛋白质的代谢功能强弱， 能反映动物营养水平和蛋白质在体内的沉积状况。当血清总蛋白含量升高时，提示机体蛋白质合成功能加强， 有助于促进动物生长［6］。 该研究结果表明，日粮添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清总蛋白含量无显著影响 （P>0.05），说明妊娠后期日粮中添加苜蓿草粉对母猪机体蛋白质合成水平没有影响。 球蛋白主要参与机体的体液免疫，白蛋白与球蛋白比值（白/球比）的高低反映了动物对疾病抵抗能力的强弱， 比值越小说明球蛋白的含量越高，机体的免疫功能越强。该研究中， 添加不同比例苜蓿草粉的母猪与对照组相比，血清球蛋白含量有一定上升（P>0.05），而10%苜蓿草粉组的血清白蛋白含量显著（P<0.05）低于对照组，使其白/球比显著（P<0.05）低于对照组。结合血清免疫球蛋白指标测定结果，10%苜蓿草粉组免疫球蛋白IgA 和IgG 含量均高于其他处理组（P>0.05），IgM 含量显著（P<0.05）高于5%苜蓿草粉组， 说明添加10%苜蓿草粉对妊娠母猪的免疫功能有一定的改善作用。

该研究中， 添加不同比例的苜蓿草粉降低了母猪血清谷草转氨酶活力， 提高了谷丙转氨酶活力，但与对照组相比差异均不显著（P>0.05），说明在日粮中添加苜蓿草粉不会影响妊娠母猪的肝脏功能，这一结果与吕先召［24］报道一致。血清中的谷草转氨酶和谷丙转氨酶活力是反映动物机体应激程度、蛋白质合成与分解状况、肝脏和心脏受损程度的敏感指标［25］。该研究中，添加不同比例苜蓿草粉母猪的血清谷草转氨酶活力与对照组相比有所降低（特别是10%苜蓿草粉组），可能与苜蓿草粉中的抗氧化活性成分有关， 提高了机体的抗应激能力。

血清中的总胆固醇含量是评价动物脂质代谢的重要指标。 总胆固醇是血液中各种脂蛋白所含胆固醇的总和。 廉红霞［5］研究表明，在妊娠母猪饲粮中添加苜蓿草粉显著（P<0.05）降低了母猪血清总胆固醇含量， 而该研究中添加苜蓿草粉组母猪的血清总胆固醇含量也呈现降低的趋势 （P>0.05）。 这主要是由于苜蓿中含有多种营养活性物质（如苜蓿皂苷），能改善动物机体脂类代谢，降低血清胆固醇含量。 王彦华［26］研究了日粮中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷对育肥猪血清生化指标的影响，结果表明，添加苜蓿草粉能显著（P<0.05）降低血清胆固醇含量， 而添加苜蓿皂苷能极显著（P<0.01）降低血清胆固醇含量。 原因可能是哺乳动物消化道不能吸收皂苷， 但皂苷能与胆固醇结合排到体外，从而增加胆固醇的排泄量，降低动物血清中胆固醇的含量［27］。另一种原因可能是，纤维素中的可溶性多糖增加消化物黏度， 从而增加胆固醇和胆汁酸的排泄量，反过来影响肝脏胆固醇代谢，导致血清胆固醇浓度降低，从而起到降脂效果［5］。Shang 等［28］研究了饲粮中添加甜菜渣和麦麸对妊娠后期母猪血清胆固醇含量变化的影响， 得到了相似的结果。

尿素氮是蛋白质代谢的主要产物， 直接反映蛋白质在体内的吸收利用情况。 该试验中各处理组之间血清尿素氮含量没有显著差异 （P>0.05），说明日粮中添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪的蛋白质代谢没有影响且母猪肝肾功能正常。 该试验结果表明，添加5%和10%苜蓿草粉能显著（P<0.05）提高妊娠母猪血清中的葡萄糖含量， 而随着苜蓿草粉添加比例的增加，15%苜蓿草粉组的血清葡萄糖含量降低，与对照组差异不显著（P>0.05），说明添加适当比例的苜蓿草粉能提高血清中葡萄糖的含量， 而苜蓿草粉添加过量会减弱母猪肠道对营养物质的消化吸收。综上说明，添加10%苜蓿草粉有利于妊娠母猪对营养物质的消化吸收。

3.3 添加苜蓿草粉对妊娠后期母猪血清抗氧化指标的影响

苜蓿是多年生草本植物，含有苜蓿皂苷、黄酮类物质、多糖类物质及抗氧化肽等，具有提高动物抗氧化性能的作用。 王彦华等［1］研究表明，在日粮中添加苜蓿草粉和苜蓿皂苷对育肥猪的抗氧化性能有一定的改善作用。 总抗氧化能力可直接反映机体抗氧化酶的活力， 间接反映机体所受脂质过氧化损伤的程度。该研究结果表明，不同比例苜蓿草粉添加组的血清总抗氧化能力均高于对照组，5%和10%苜蓿草粉组显著高于对照组（P<0.05），提示在日粮中添加适当比例的苜蓿草粉， 可改善妊娠后期母猪的机体抗氧化能力。

超氧化物歧化酶、 过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶在清除机体活性氧中起到重要作用，其活力直接反映机体的抗氧化性能， 间接反映机体清除自由基的能力。 丙二醛是生物膜脂质过氧化的重要产物，能加剧膜的损伤，可通过测定丙二醛含量衡量组织膜脂过氧化的程度。 该试验结果表明，添加10%苜蓿草粉可显著（P<0.05）提高妊娠后期母猪血清中的谷胱甘肽过氧化物酶活力，这与陈越等［29］报道的持续饲喂苜蓿干草可以显著（P<0.05）提高乳牛全血中谷胱甘肽过氧化物酶活力的研究结果类似。 此外， 该研究中，5%、10%、15%苜蓿草粉组母猪的血清超氧化物歧化酶活力显著（P<0.05）高于对照组；10%苜蓿草粉组母猪的血清丙二醛含量显著（P<0.05）低于对照组。 综合来看，10%苜蓿草粉在提升母猪机体抗氧化能力方面表现最佳。

4 结论

在妊娠后期日粮中添加不同比例的苜蓿草粉，对母猪繁殖性能和血清生化、抗氧化和免疫指标具有一定的改善作用， 且添加比例为10%时综合效果最佳。