鲜竹沥中1个新的萘酚

喻何云，赵敏敏，任琦，姚金龙，罗跃华，付辉政

1.江西省药品检验检测研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省医药学校，江西 南昌 330001

鲜竹沥是一味独具特色的传统中药，《本草衍义》称之为“痰家之圣剂”，为单方制剂鲜竹沥和复方制剂复方鲜竹沥液的主要原料，临床应用广泛［1-2］。鲜竹沥始载于梁代陶弘景的《本草经集注》，收载在1977年版《中国药典》一部［3］，之后历版药典均未收载，现被《中华人民共和国卫生部药品标准》（1992年）中药材（第一册）收载，其标准中制法为禾本科植物粉绿竹、净竹、毛竹及同属的数种植物的鲜杆经加热后自然沥出的液体，有清热化痰作用。临床应用于肺热咳嗽、痰多、中风舌强、小儿惊风、气喘胸闷等症状［4］。现行标准中涉及的检验项目有性状、以酪氨酸为对照的薄层色谱鉴别以及pH 值、总固体、相对密度检查项［4］，标准较低，产品质量不易得到有效控制。国家药典会将药材鲜竹沥列为2019年国家药品标准提高品种，研究表明，鲜竹沥主要含有酚酸、木脂素、氨基酸、糖等成分［5-12］。然而，目前对于鲜竹沥的炮制工艺机制以及表征其炮制工艺的质量标志物还没有确定，为了揭示其炮制工艺机制，建立反映其内在质量并符合工艺特点的质量标准，使得鲜竹沥价值能够得以充分挖掘，笔者在课题组化学成分和药理作用的前期研究基础上［13-18］，继续运用现代先进的分析手段，从药材鲜竹沥活性部位乙酸乙酯中分离得到了1个化合物，确定为5-（4-羟基-3，5-二甲氧基苯基）-1，3-二甲氧基-2-萘酚，该化合物为新化合物。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UltiMate 3000 高效液相色谱仪（美国赛默飞公司）；Varian UNITY INOVA 600 超导核磁共振仪（美国Varian 公司）；岛津20-AR 型半制备色谱仪（日本岛津公司）；Buchi 中压制备色谱仪（瑞士Buchi公司）；Micromass ZabSpec 质谱仪（美国Micromass公司）；EYELA SB-1000 旋转蒸发仪（日本EYELA公司）；UV-260 紫外分光光度仪（日本岛津公司）；XT5B 熔点仪（天津天光光学仪器有限公司）。C18填料为日本YMC 产品，制备色谱柱为YMC（5 μm，250 mm×20 mm）；柱层层析硅胶、薄层层析硅胶（青岛海洋化工厂）。

1.2 试药

CD3OD 为美国剑桥公司产品，水为Milli-Q 超纯水，甲醇和二氯甲烷为分析级试剂。毛竹采自江西省宜春市铜鼓县，由江西省林业科学院余林博士鉴定为禾本科刚竹属植物毛竹P.edulis（Carr.）J.Houz.的新鲜杆茎。标本现于江西省药品检验检测研究院中药标本馆存放。

2 方法与结果

2.1 提取和制备方法

取新鲜毛竹（5 t），先进行切断成1 米长左右并开片，将处理好的竹片放置在密闭不锈钢罐中，用生物燃料加热，收集滤出的液体，将液体浓缩得到鲜竹沥浸膏。取浸膏，用等量乙酸乙酯溶剂萃取3 次，合并萃取液，低温减压浓缩后得乙酸乙酯萃取部位干膏280 g。将干膏用硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇（10∶1～6∶4）洗脱，薄层色谱检视合并洗脱液，得流分Fr.1～Fr.9。Fr.2（13.6 g）进一步采用硅胶层析柱分离，二氯甲烷-甲醇（60∶1～30∶1）洗脱，薄层色谱检视合并洗脱液，得流分Fr.2-1～Fr.2-15。Fr.2-9（2.3 g）再经过中压ODS 柱色谱分离，以30%～60%甲醇为流动相梯度洗脱，经高效液相色谱检测，合并洗脱液得流分Fr.2-9-1～Fr.2-9-10。Fr.2-9-5（56.9 mg）经反相半制备液相色谱，以甲醇-水（30∶70）为流动相，得到化合物1（21 mg，tR=78.5 min）。

2.2 化学成分鉴定

化合物1：白色粉末，易溶于甲醇、丙酮、吡啶。mp 192～193 ℃；UV（CH3OH）λmax204 nm 和295 nm。HR-ESI-Q-TOF-MS 质谱给出准分子离子峰m/z:355.116 4［M-H］-（计算值为C20H19O6，355.118 2），根据氢谱和碳谱数据，确定化合物1的分子式为C20H20O6。

在化合物1 的1H-NMR 谱中，显示了一组ABC 邻位偶合系统苯环质子信号：δH7.22（1H,d,J=7.2 Hz），7.34（1H,t,J=8.4,7.2 Hz），7.90（1H,d,J=8.4 Hz）；一组A2苯环质子信号：δH6.73（2H,s）；一个苯环5 取代的单峰质子信号：δH7.12（1H,s）；4个甲氧基信号：δH3.96（3H,s），3.81（3H,s），3.87（6H,s）。在化合物1 的13C-NMR 谱中，显示20个碳信号，其中16个苯环碳信号；4个甲氧基碳信号。根据上述数据初步推测化合物1 可能为萘酚类化合物，将化合物1 与文献［19］所报道的Annulated HS结构比较，分子式一致，且结构基本相似，唯一不同的是4-羟基-3,5-二甲氧基苯基与萘环的连接位置不同。

在化合物1 的HMBC 中（图1），H-2',6'（δH6.73）与C-4（δC101.8）、C-5（δC140.8）、C-6（δC126.2）、C-9（δC127.8）相关，表明4-羟基-3,5-二甲氧基苯基连接在萘环的C-5 位。另外，1-OMe（δH3.81）与C-1（δC142.1）存在相关联、3-OMe（δH3.96）与C-3（δC151.0）存在相关联，说明2个甲氧基分别与C-1 和C-3位相连接。另外，OMe-3'，5'（δH3.87）与C-3''，5''（δC149.4）相关，表明2个甲氧基位于C-3'和C-5'位。

综上所述，化合物1 结构鉴定为5-（4-羟基-3,5-二甲氧基苯基）-1,3-二甲氧基-2-萘酚，结构和主要的HMBC 相关图见图1。详细核磁数据见表1。

表1 化合物1的1H-NMR 和13C-NMR波谱数据（600/150 MHz，CD3OD）

图1 化合物1的结构和主要的HMBC相关图

3 结论

鲜竹沥作为一味疗效确切且独具特色的传统中药，其发挥作用的药效物质还不明确，制约了对其进行深度开发与利用。本课题组在原来研究基础上继续对鲜竹沥化学成分进行研究，首次从鲜竹沥中获得1个新的萘酚类化合物，通过多种核磁波谱手段确定了其准确结构，命名为鲜竹沥素A，丰富了天然产物结构，也为揭示鲜竹沥镇咳祛痰功效提供了物质基础。