液相色谱柱后衍生法快速测定马铃薯中10种氨基甲酸酯类农药残留

吴新华

（惠东县农业技术推广中心，广东 惠州 516300)

马铃薯是世界上仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物，生长周期短，单位面积产量高，营养丰富，用途广泛，在人们日常生活中占有十分重要的地位[1]。氨基甲酸酯类农药因具有杀虫效果显著，且分解快、残留期短、代谢迅速的特点[2]，正越来越多地被应用于农业生产，其残留对人体的危害也越来越受到人们的重视[3-4]，我国也出台了相应的限量标准[5]。目前，氨基甲酸酯农药残留检测多使用NY/T 761—2008标准[6]，该标准操作步骤多、时间长，影响检测效率；而关于使用QuEchERS快速处理样品的方法，目前的研究多结合气质联用仪或液质联用仪使用[7-12]，质谱仪的价格及使用成本均较高，基层检测机构较难实现。惠东县是全国较大的冬种马铃薯生产基地，2017年惠东县马铃薯种植面积达到8 700 hm2，马铃薯的质量安全检测工作也日益增多；因此，结合现有设备，研究操作简单、测定快速的马铃薯中氨基甲酸酯类农药残留液相色谱仪检测方法，以提高检测工作效率，这对惠东县马铃薯产业发展具有重要意义。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂

仪器：安捷伦液相色谱仪 1260Ⅱ（美国安捷伦科技公司）、柱后衍生仪Vector PCX（美国 Pickering科技有限公司）、高速匀浆机（德国艾卡公司）、样品粉碎机（德国飞利浦有限公司）。

试剂：10种氨基甲酸酯农药标样（涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、速灭威、克百威、甲萘威、异丙威、仲丁威）规格：100.0 μg/mL，来自农业部环境质量监督检验测试中心（天津）；氢氧化钠溶液、OPA试剂均来自美国Pickering科技有限公司，乙腈、甲醇均为色谱纯，水为去离子水，马铃薯为市售。

1.2 样品处理

取马铃薯可食部分，切块、充分混匀后放入样品粉碎机，制成待测样。准确称取20.0 g试样置于离心管中，加入10种氨基甲酸酯类农药（浓度均为10 mg/L）标样，加入40 mL乙腈，再加入氯化钠5 g，经18 200 r/min匀浆2 min，然后3 000 r/min离心6 min，使乙腈相和水相分层。吸取分层后的乙腈溶液5 mL，在50 ℃经氮吹至近干，加入甲醇定容至2 mL，最后用过滤膜过滤后装瓶待测。

1.3 液相洗脱条件

色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18 USP L1 Analytical，4.6 mm×250.0 mm；柱温40 ℃，进样体积10 μL；荧光检测器，入射波长330 nm，激发波长465 nm；梯度洗脱条件0 min，甲醇15%、2～8 min，甲醇25%、9 min，甲醇40%、10 min，甲醇45%、19～25min，甲醇80%、26 min，甲醇15%、流量保持1 mL/min.

1.4 柱后衍生条件

柱后衍生条件同NY/T 761—2008标准：0.05 mol/L氢氧化钠溶液，流速0.3 mL/min；OPA试剂，流速0.3 mL/min；反应器温度为水解温度100 ℃，衍生温度为室温。

2 结果与分析

2.1 马铃薯提取液净化选择

马铃薯提取液经匀浆、离心后获得上层清液，其颜色浅、清澈、表面也无油污状漂浮物，考虑色素、油酯类影响较小，基质液较干净。通过对上清液氮吹、甲醇定容、过滤后装瓶进样，获得液相色谱图（图1），发现样品杂质峰出现在3 min左右，目标峰在6 min之后，对几种氨基甲酸酯类农药定性不存在影响。在定量操作方面，采用无农药残留马铃薯制备基质空白，配制标准曲线，避免基质效应。

图1 10种氨基甲酸酯类农药色谱

2.2 标准曲线回归方程、相关系数、检出限

在0.02～1.00 mg/mL范围内，使用马铃薯基质液配制标准溶液，10种氨基甲酸酯农药浓度对应峰面积有良好的线性关系，相关系数均大于0.999 0，以信噪比等于3对应的目标化合物浓度作为方法的检出限，得出10种农药的方法检出限为0.008～0.010 μg/mL（表1）。

表1 10种氨基甲酸酯农药的标准曲线

2.3 回收率和精密度

对马铃薯样品添加3种不同浓度（0.05、0.10、0.20 μg/mL）标准样品，做3个平行样，10种氨基甲酸酯类农药回收率为77.1%～106.0%，相对标准偏差在1.2%～6.7%（表2），说明液相色谱柱后衍生法符合检测要求。

表2 10种农药的回收率、相对标准偏差

3 结论与讨论

本文参考NY/T 761—2016标准关于蔬菜水果中氨基甲酸酯类农药残留检测的方法，对马铃薯中氨基甲酸酯类农药残留检测前处理进行了优化，结果表明，直接将提取液氮吹至近干，再用甲醇定容进样检测，整个过程步骤少、回收率较好，且方法简单。该方法能同时准确检测马铃薯中10种氨基甲酸酯类农药残留，10种氨基甲酸酯类农药回收率在77.1%～106.0%，相对标准偏差在1.2%～6.7%，满足氨基甲酸酯类农药的定量检测要求，适合基层检测单位马铃薯中氨基甲酸酯类农药残留的批量检测工作。