厦门地区3 144例女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及宫颈病变筛查分析

许惠娟，刘 坤，郑景妹，姜秋利，鲁华东，许建芳

(复旦大学附属中山医院厦门医院 病理科， 福建 厦门 361015)

人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染是世界范围内一种常见的性传播疾病，它能够引起生殖道皮肤/黏膜发生一系列病变，与全球约5%的癌相关[1]。目前已知HPV型别200余种，其中约40种能够感染生殖道[2]。在这40种型别中，根据其致病力大小分为低危型和高危型[3]。筛查癌前病变和HPV免疫是减轻宫颈癌负担的有效预防策略，宫颈癌控制和预防的策略是通过有效筛查HPV、接种HPV、巴氏涂片检测和治疗癌前病变来早期检测[4]。通过使用HPV疫苗和宫颈癌筛查，高收入国家的宫颈癌发病率大大降低[5]。由于人群年龄分布、种族及相关生活方式的不同，HPV各个地区的感染情况存在差异[6]，所采取的疫苗型别是否应根据HPV的感染型别选择靶向型别的疫苗。了解本地区HPV 感染现状，提供疫苗接种策略，为宫颈疾病的诊断、治疗及预后提供参考。本研究对3 144例宫颈癌筛查妇女HPV感染及亚型分布分析，分析HPV联合液基薄层细胞检测(thinPrep cytological test,TCT)宫颈病变的临床价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象

1.1.1 病例：选取2019年5月至2020年6月在复旦大学附属中山医院厦门医院接受宫颈筛查的3 144例妇女为研究对象。患者年龄18～80岁，纳入标准：1)年龄≥18岁患者；2)患者21 h内无性生活；3)非月经期采集细胞学标本。参与本实验患者均对本研究知情同意，本研究已获复旦大学附属中山医院厦门医院伦理委员会的批准。

1.1.2 试剂：人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(北京博晖创新生物科技有限公司)；液基细胞处理试剂盒(LMG-100)、巴氏染色液[泰普生物科学(中国)有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 采集标本：临床妇科医师通过专业拭子在宫颈处顺时针旋转3圈以上，获取患者宫颈处的分泌物和脱落细胞。将宫颈刷插入样本品保存管底部，自刻度线处折断，封盖保存，室温送至病理科进行检测。

1.2.2 HPV基因分型的检测：博晖生物芯片法检测人体宫颈中的24种HPV亚型，经过核酸提取——PCR扩增——反向点杂交——CCD扫描分析实验结果。在微流控芯片上发现探针与目标DNA杂交的区域出现斑点，判别感染HPV及感染的亚型。

1.2.3 液基薄层细胞检查(Thinprep cytologic test,TCT)检测细胞病变：用TCT操作系统对采集到的样本进行程序化处理，制成液基薄层涂片，95%乙醇进行固定，随后巴氏染色处理，通过光学显微镜进行观察与结果统计。细胞学诊断报告根据Bethesda系统(the Bethesda system,TBS)进行判读。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用率(%)表示，组间比较采用卡方检验。

2 结果

2.1 3 144例妇女中HPV感染分布情况

本研究HPV基因分型检测型别为24种，包括高危型别18种，分别为16、18、31、33、39、35、45、52、51、56、58、59、66、68、82、53、73和83。低危型别6种，分别为6、11、42、43、44和81。3 144例妇女中HPV感染率为22.3%(704/3 144)，其中高危型HPV感染率为18.6%(585/3 144)，低危型感染率为3.8%(119/3 144)。感染率由高到低依次为HPV52、58、16、56、44、42，81、51、53和39。3 144例妇女HPV流行情况及基因型分布(图1)。704例HPV阳性患者中，单一感染患者550例，HPV阳性病例中以单一型别HPV感染为主，多重感染以双重感染为主。

2.2 不同年龄组宫颈组织病理学检测结果HPV感染分布情况

3 144 例患者共分成 5个年龄组，60岁以上年龄组的HPV阳性检出率最高，其次是51～60岁年龄组和30岁及以下年龄组。30～40岁年龄组的 HPV 阳性人数占总阳性人数的占比最高，其次为30岁及以下年龄组(表1)。不同年龄组HPV感染情况存在差异(P<0.01)，且不同年龄组HPV高危感染情况存在差异(P<0.05)。535例进行TCT检测的HPV阳性患中，高度鳞状上皮内病变(HILS)患者中60岁以上人群检出率较高，其次为41～50岁年龄组。低度鳞状上皮内病变(LSIL)患者中，30岁及以下年龄组检出率较高，其次为41～50岁年龄组。低度鳞状上皮内病变可能(ASC-US)，30岁及以下年龄组检出率较高，其次为51～60岁年龄组(表1)。

表1 不同年龄段宫颈组织病理学检测结果及HPV感染情况Table 1 Results o f HPV infection and cervical lesions in different age groups[n(%)]

2.3 LSIL、HSIL和ASC-US患者中HPV感染情况

704例HPV感染患者中有535例同时进行TCT检测。其中585例高危型HPV患者中有444例进行TCT检测，119例低危型HPV患者中有90例进行TCT检测。LSIL、HSIL和ASC-US患者中HPV各亚型分布(表2)。HPV阳性患者宫颈病理学检测结果中以单一高危型感染较为多见，单一低危型HPV感染其次。多重感染包含双重高危型HPV感染，双重低危型HPV感染，3种及3种以上高危型HPV感染以及HPV高危和低危型合并感染。其中以双重高危型HPV感染为主HPV(表1)。单一高危型HPV组与多重高危型HPV组患者宫颈病理学结果有差异(P<0.01)。

HR.high risk；LR.low risk图1 3 144例妇女中HPV流行情况及基因型分布Fig 1 Prevalence and genotype distribution of HPV among 3 144 women

表2 LSIL、HSIL 和ASCUS患者中HPV亚型分布

3 讨论

HPV的持续感染被认为是宫颈癌和癌前病变的重要原因[7]。加强对高危型HPV感染的检测，以便早期发现宫颈癌变趋势，对HPV感染者应以重视，给予早期干预。本研究发现本地区HPV感染亚型前3位依次为52、58和16型，与国内其他学者报道有所不同，但相同于这些报道的是HPV感染率排名靠前的亚型均包含有这3种亚型[8-9]。本研究中，3 144例宫颈癌筛查妇女HPV感染率为22.3%，高危型HPV感染率18.6%，低危型感染率3.8%。由于中国人口多、地域广，人群年龄分布、种族及相关生活方式的不同，HPV各个地区的感染情况存在差异[6]。一项全球性的Meta分析表明，HPV-16和HPV-18是世界范围内与宫颈病变相关的HPV最流行的类型，而HPV-52和HPV-58在东亚女性中更为普遍[10]，本结果与之是一致的。535例HPV阳性患者有32%与不同的宫颈病变等级的发生相关。HPV阳性患者宫颈病理学检测结果以单一高危型感染较为多见，多重感染以双重高危型HPV感染为主。与单一高危HPV感染相比，多重高危型HPV感染组患者促进宫颈病变的发展。

本研究还发现不同年龄组HPV感染情况存在差异。60岁以上年龄组的阳性检出率最高， HILS患者中60岁以上人群检出率较高，其次为41～50岁年龄组。老年妇女的免疫力随着年龄的增长而下降，特别是绝经前和绝经后妇女，消除既往和新感染的能力减弱，因此HPV感染的高发也发生在老年妇女[11]。HPV阳性人数最高发生在30～40岁年龄组，该年龄组宫颈筛查基数较大。LSIL患者及ASC-US患者中，均为30岁及以下年龄组检出率较。年轻女性中HPV感染的高患病率可能与不良的性习惯有关，虽然年轻女性的HPV感染率很高，但大多数HPV感染可能在1～2年内自动清除，因此HPV感染的患病率将会降低[12]。通过本次研究发现携带高危HPV并且年龄>40岁的妇女宫颈癌前病变比例较高，应列入宫颈癌前病变或子宫颈癌的重点筛查对象。为本地区女性的HPV筛查和预防策略提供了一定的参考价值，由于中西方乃至国内不同地区HPV亚型差异，未来新一代HPV疫苗的接种应该更具有针对性。