复杂信号通路参与调控水稻粒重相关基因研究进展

陈 可，周新桥，陈达刚，郭 洁，陈平丽，李逸翔，2，刘传光，陈友订

（1.广东省农业科学院水稻研究所/广东省水稻育种新技术重点实验室/广东省水稻工程实验室，广东 广州 510640；2.广东海洋大学滨海农业学院，广东 湛江 524088）

作为全球范围内最重要的粮食作物之一，水稻提供了约50%世界人口的每日主粮［1］。因此，研究高产、优质的水稻及其分子机理有着重要的生物学和生产实践意义。20 世纪50 年代开始的第一次“绿色革命”，包括水稻育种的半矮秆基因（semi-dwarf 1）sd1的应用、70 年代三系杂交水稻的应用，极大地促进了谷物产量增长［2］。这一阶段主要关注水稻和小麦半显性基因的应用及以胞质雄性不育（CMS）在杂交水稻的应用［3］。进入21 世纪，“超级稻”概念、“理想株型”模型及基因编辑技术的发展为我国水稻产量持续增长奠定了理论基础［4］。特别是在新冠病毒肆虐的2020 年以后，我国水稻生产又面临新的严峻挑战，“三胎”政策的开放促进人口增长、经济发展导致耕地过快减少的态势与“18 亿亩耕地红线”严防死守的矛盾等。2021 年中央一号文件把提升粮食和重要农产品供给保障能力作为加快推进农业现代化的首要任务。因此，如何突破传统育种瓶颈，将水稻分子育种和功能基因组学系统结合应用于水稻育种改良，已经成为新时代我国粮食安全和农业现代化面临的亟待解决的重大科学问题［5］。

水稻单株产量主要由有效穗数、每穗粒数、粒重3 个因素决定。多年来的水稻基础研究不断丰富水稻基因组序列信息和注释，并且超过120个主效及微效（数量性状遗传位点）QTLs 位点已经成功克隆、鉴定及功能分析［6］。在超过1 万年的水稻驯化过程中，人类通过人工选择产生了许多水稻亚种和品种，并且使得水稻的分布从热带地区扩展到温带地区的五大洲。近年来，基于图位克隆的遗传分析、规律成簇的间隔短回文重复（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats，CRISPR）及其衍生的基因编辑技术快速发展，在多种水稻农艺性状的研究中发挥了重要作用［7］。本文综述总结了近年来水稻粒重相关基因的研究进展，包括QTL 和质量性状相关基因，并且深入讨论其在现代农业育种上的应用，结合5G 时代数字化智能化生物现代育种，对我国目前生物育种4.0 时代进行展望。

1 水稻粒重影响因素及相关基因

水稻粒重（千粒重、鲜重）受到水稻粒长、粒宽、粒厚和灌浆等因素影响［8］，这些基因协同作用，共同调控水稻粒重这一数量性状，维持水稻产量的动态平衡。水稻的拔节孕穗期是营养生长与生殖生长的并进时期，这期间水稻生物量迅速增大，以幼穗发育为中心的生殖发育迅速起始，特别是水稻幼穗发育8 个时期中的第3 期-第2次枝梗原基及颖花原基分化期决定水稻穗型、第5 期到第8 期颖壳发育期决定水稻粒型。从细胞生物学角度来评估水稻粒重的变化，可以追溯到原基发育时分生组织的细胞数量、细胞分裂能力和细胞伸长范围等。而水稻幼穗分化完成期及水稻灌浆期是对已定型的完成授粉的水稻籽粒进行营养运输的二次分配（源-库-流理论）的时期，灌浆效率及淀粉等营养物质的组成均对水稻粒重产生明显影响。迄今为止，几乎大部分的主效粒重相关QTLs 已经被报道，多个综述也从不同角度总结这些基因及其作用［8-9］。除了上述因素外，颖壳的发育对水稻粒型的长度和宽度也有重要影响。水稻灌浆过程和胚乳发育过程影响光合产物及其积累。表1 为近年来克隆鉴定的影响水稻粒宽、粒长、粒厚及灌浆速率的QTL 和功能基因。

表1 水稻部分粒重相关基因和QTLsTable 1 Partially grain weight related genes and QTLs

2 不同信号调控途径的水稻粒重相关基因

过去20 年的研究揭示了水稻粒重受到多种信号途径调控，包括泛素化修饰途径、植物激素信号途径、G 蛋白信号途径、光合产物积累运输相关途径、胚乳发育途径、表观修饰途径及小微RNA 途径等［27］。本文对上述途径的水稻粒重相关基因进行总结与梳理。

2.1 泛素化调控途径

泛素介导的蛋白酶体降解途径是细胞体内代谢和蛋白动态变化的主要途径。泛素化调控途径包括3 种泛素酶的协同作用：由泛素激活酶E1、泛素结合酶E2 和泛素连接酶E3 特异性识别靶蛋白并且标记泛素，进而受到蛋白酶体识别降解［28］。Grain Width 2（GW2）是粳稻主效调控粒宽的QTL,编码一个细胞核定位RING-type 的E3泛素连接酶。失活的GW2等位基因能增大细胞面积，过表达GW2造成粒型减少，表明GW2是一个水稻粒宽的负调控因子。GW2 能与几丁质酶（CHT14）和磷酸甘油酸酯激酶（PGK）相互作用，并通过改变这两个蛋白的活性和稳定性影响水稻种子碳代谢途径［18］。另外，水稻去泛素化酶15（OsUBP15）能够与水稻的泛素受体（OsDA1）相互作用，遗传证据显示OsUBP15 可能在功能上部分依赖GW2 通过泛素化和去泛素化的动态变化调控下游底物蛋白量的变化［19］。另一个去泛素化酶WIDE AND THICK GRAIN 1（WTG1，同OsOTUB1和GWC1）能够正向调控颖壳细胞延伸和稻米品质。Heading and Grain Weight（HGW）编码一个能够与多种水稻种子发育和开花期相关蛋白共表达的新的核质共定位多聚泛素结合酶（UBA）［20］。拟南芥中发现将泛素连接酶E3 和UBA 突变后明显影响种子护颖及表皮的发育，表明这条泛素介导的蛋白酶体降解途径在植物种子发育过程非常保守。

2.2 植物激素调控途径

植物激素参与了多种植物生长发育过程。到目前为止，几乎所有的植物激素（生长素、乙烯、赤霉素、细胞分裂素、油菜素内酯和茉莉酸等）均能调控水稻粒重，这些激素可能通过协同作用或拮抗作用调控水稻粒重。多种激素途径相关基因能够改变并产生多种水稻表型。

2.2.1生长素 作为第一个被发现的植物激素，生长素（Auxin）的作用是促进细胞分化与分裂。生长素在包括种子生长、胚胎发育及配子体形成等植物多个发育阶段发挥重要作用。生长素极性运输（PAT）和生长素信号传导同样影响籽粒发育成熟过程［29］。Tillering and Small Grain 1（TSG1）是FISH BONE（FIB）基因的等位基因，编码一个色氨酸氨基转移酶［30］。tsg1突变体对外源吲哚乙酸敏感，在水稻的4 个色氨酸氨基转移酶同源基因中，TSG1对生长素合成起主要作用。2018 年3 个课题组同时在Molecular Plant发表qTGW3/GL3.3/TGW3作为水稻新的粒重QTL 负调控粒型的研究成果［11,14-15］。这个QTL 位点编码一个糖原合成酶激酶3，能够分别与生长素响应因子OsARF4 和水稻主效粒型QTLGS3发生相互作用。OsARF多个基因参与水稻粒型调控作用。另一个水稻粒重的微效QTLGSA1编码一个UDP-葡萄糖转移酶，通过影响类黄酮介导的生长素含量变化及相关基因表达量形成抗逆和产量的动态平衡关系［31］。除了上文提到的OsARF4影响水稻粒型外，Qiao 等揭示一条全新的miR167a-OsARF6-OsAUX3调控水稻粒长和粒重的分子调控模块［32］；OsARF25的T-DNA 插入突变体表现出粒型变短的表型；稀穗基因Gnp4/LAX2能与OsIAA3互作干扰OsIAA3-OsARF25 调控模块，进而影响下游OsERF142/SMOS1（Small Organ Size 1）基因表达［13］。OsARF11正调控水稻粒型及植物发育过程［33］。SMOS1和SMOS2分别编码一个生长素调控的APETALA2 转录因子和与赤霉素相关的GRAS 转录因子〔与DWARF AND LOW-TILLERING（DLT）基因相同〕。这其中是否存在更广义的互作及调控机制，有待进一步研究。

2.2.2乙烯 作为唯一的气体植物激素，乙烯（Ethylene）在促进叶片衰老、水果成熟、种子休眠及种子的三重反应中发挥重要作用［34］。以“猫胡子”（MHZs）表型的乙烯相关的突变体揭示乙烯调控水稻发育过程的重要调控网络。MHZ3编码一个内质网（ER）定位蛋白。其蛋白N 端C端能够与OsEIN2发生相互作用。过表达MHZ3可显著增加OsEIN2 的数量和水稻种子大小［35］。EIN3 水稻同源基因OsEIL/MHZ6也通过实验证明与水稻种子大小呈正相关［36］。过量表达乙烯受体ETR2导致水稻粒重减少，类似结果在百脉根（Medicago sativaL.）也得到验证［37］。这些结果表明水稻粒型与乙烯信号传导呈正相关关系。与其相关的一个水稻基因OsSPMS1编码一个热精胺合成酶，通过负调控乙烯前体1-氨基环丙烷羧酸（ACC）含量调控水稻粒型［38］。Ahmadizadeh等总结和预测了拟南芥和水稻乙烯合成途径具有功能的编码基因，并且这些基因的启动子区顺式元件与光反应、缺水、细胞周期及水杨酸诱导相关。可以预期未来会有更多的乙烯相关基因与水稻粒重的调控关系被揭示［39］。

2.2.3赤霉素 赤霉素（Gibberellins，GAs）由一系列具有共同结构的植物激素家族组成，对种子萌发、株高增加、叶形态建成、开花诱导等有重要促进作用［40］。Grain Number per Panicle 1（GNP1）编码GA 20 氧化酶1（OsGAox1），参与水稻品种特青的穗粒数和产量的调控［41］。值得注意的是，其同源基因OsGAox2正是“第一次绿色革命”广泛应用的sd1基因［2］。Small and dwarf 2（sgd2）突变体表现出植株株高变矮及粒型减少等表型，通过正向定位发现该基因编码一个亮氨酸拉链Ⅱ（HD-Zip）家族转录因子，其通过转录水平调控多个GA合成相关基因的表达量，从而影响水稻粒型［42］。GAST 家族基因编码具有一个保守的富半胱氨酸多肽，其表达量受到GA的诱导［43］，迄今为止，3 个GAST 家族基因都被报道与水稻粒型相关，包括OsGASR9、GW6和OsGASR1［21,44-45］。这些结果表明，GAST 家族基因在调控GA 通路和水稻穗部发育功能方面高度保守和一致。细叶基因Narrow Leaf 2和Narrow Leaf 3编码WUSCHEL 同源盒3A（WOX3A）转录因子，能够特异性负调控GA 合成和GA 前体代谢物的动态平衡。过表达OsWOX3A基因能够模拟GA 缺陷表型，包括株高变矮、叶片变细、穗粒数减少及粒型变小［46］。综上，GA 信号调控途径能够显著影响水稻粒重相关表型。

2.2.4细胞分裂素 植物激素细胞分裂素（Cytokinin，CK）能够促进细胞分裂和细胞分化，主要在植物根部、茎部、顶端优势、细胞衰老、果实成熟、生物和非生物胁迫等生长发育过程发挥重要作用。在CK 合成过程中，异戊二酰转移酶（IPT）是重要的合成限速步骤，而细胞分裂素氧化酶（CKXs）调控CK 降解。外源施加CK能够抑制CKXs 表达，增加种子大小［47］。林鸿宣课题组报道一个水稻的盐旱耐受突变体dst能够增加水稻非生物胁迫抗性同时影响叶片宽度和水稻粒型。作为一个锌指转录因子，DST 能够结合H2O2代谢相关基因启动子区调控水稻对于非生物胁迫响应。进一步研究发现，DST 能够结合OsCKX2启动子调控OsCKX2在穗部表达。Glo 等发现MAPK6 能够直接结合DST 并且对其磷酸化以激活OsCKX2的表达［48］。水稻中过表达IPT基因能够增加水稻产量［49］。OsSGL编码一个未知功能结构域（DUF1645）蛋白正向调控CK 信号途径和水稻非生物胁迫。除此之外，对嘌呤渗透酶家族（OsPUPs）的研究表明其可以调控CK运输和改变种子大小和重量。OsPUP4（BG3）直接对远距离CK 运输和本地分布产生影响［50］。以上结果表明，CK 参与水稻的非生物胁迫响应和幼穗发育过程。

2.2.5油菜素内酯 早在1979 年，科学家就从油菜分离出一类与人类类固醇结构相近的化合物并且命名为油菜素内酯（Brassinosteroids，BRs）［51］。BR 能够影响种子萌发、气孔形成、维管束分化、花粉育性及衰老等重要生理生化过程，特别是对株高、叶倾角、粒型及分蘖数等重要农艺性状产生显著影响。BR 合成途径或者信号传导缺陷突变体，包括D11，OsBR6ox/BRD1，D2，BRD2等，均表现出株高变矮、穗长变短、叶片颜色变深、水稻粒型变小等表型［52］。突变体Slender grain Dominant（slg-D）表现出BR 过量表型，包括植株松散、较大的叶倾角和更长水稻粒长［53］。GW5与一个糖原合成酶激酶2（GSK2）相互作用，通过对BR 信号传导通路BZR1 和DLT 磷酸化调控BR 介导的水稻粒型建成［22］。值得注意的是，GW5及其同源基因能够与BR 信号通路关键成分GSK2 和BIN2 互作导致DLT 和OsBZR1 的磷酸化程度降低［54］。一个含有OVATE 结构的家族蛋白成员（OFPs）被证明受到GSK2 的磷酸化过程参与BR 信号途径介导的水稻粒型调控。包括OFP1、OFP3、OFP8 及OFP14 等［55］。Yu 等在对水稻OFP 家族蛋白表达模式和亚细胞定位分析发现OFP15 也是具有BR信号诱导表达的特征，可能也参与BR 信号调控水稻株型和粒型性状［56］。

除了上述一直报道的BR 信号成员调控水稻粒型外，仍有许多新的未知的分子机制参与BR信号介导的水稻粒型调控。G-蛋白α 亚基D1/RGA1对BR 处理呈正相关，其功能失活突变体d1表现出株高变矮及小粒［57］。进一步研究发现D1/RGA1能够与一个U-BOX 结构域的E3 泛素连接酶（TUD1）发生相互作用，d1tud1-5双突变体表现出节间缩短、叶倾角减少、粒型变小等表型［58］。另一个大的转录因子家族GATA 包括锌指结构域和DNA 结合区域，对OsGATA7进行RNAi和基因敲除发现，转基因水稻对BR 处理不敏感，而过量表达则表现出相反表型［59］。除了上述这些基因外，丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）与BR 信号通路有很强的交互作用。SMALL GRAIN 1（SMG1）编码水稻OsMKK4基因，其突变体smg1表现出与D61/OsBRI1，OsBZR1，OsGSK2和DLT缺陷突变体类似的BR缺乏表型［60］。Dwarf and Small Grain 1（DSG1）编码OsMAPK6，其作为OsMKK4 下游靶基因共同调控水稻粒型。MAPK 上游OsMKKK10 结合并且磷酸化OsMKK4 调控水稻粒型大小。其功能失活突变体osmkkk10突变体表现出更小的水稻粒型和粒重。组成性过表达（CA-OsMKKK10）表现出穗型和粒型增大。GRAIN SIZE AND NUMBER 1（GSN1）能够对MAPK6 进行去磷酸化修饰，参与GSN1-MAPK 分子调控模块［61］。在MAPK调控途径最上游，类受体激酶（RLK）OsER1 能够对OsMPKKK10 进行磷酸化，通过MAPK 信号调控途径影响DST［48］。除此之外，小G 蛋白OsRac1 也可以与OsMAPK6 相互作用正向调控水稻粒型［62］。作为主要的调控水稻粒长QTL，qGL3/GL3.1编码一个Kelch 重复丝/苏氨酸蛋白磷酸激酶OsPPKL1，其底物包括细胞周期蛋白Cyclin-T1;3 和GSK3［12］。综上所述，BR 信号途径、MAPK 信号途径通过磷酸化修饰精确调控水稻粒型和穗型动态平衡。

2.3 G 蛋白调控途径

异源三聚体G 蛋白（G-proteins）在植物和动物信号传导通路差异较大，由Gα、Gβ 和Gγ组成，水稻中调控多种激素、干旱、抗病、侧根形成等发育过程［63］。水稻中G 蛋白均已报道与穗部发育、粒型、灌浆速率及每穗粒数等直接相关。上文提到Gα（RGA1）蛋白通过调控BR 信号途径影响水稻粒型。Gβ（RGB1）正调控水稻粒型和株型［64］。Gγ 则包括RGG1、RGG2、GS3、GGC2 及DEP1［65］。然而，虽然DEP1 蛋白结构上类似GS3，但是DEP1 的表型却与GS3 相反，DEP1是正调控水稻粒型基因［66］。G-蛋白下游靶基因包括编码OsMADS1基因等的转录活性影响水稻粒型和胚乳淀粉含量［67］。综上所述，G蛋白信号途径对水稻粒型影响起重要调控作用。

2.4 光合作用及胚乳发育调控途径

颖壳大小及灌浆程度是影响水稻粒重和品质的重要因素。对于水稻粒型的有关综述已多次指出调控颖壳细胞伸长和分裂和胚乳发育相关基因对水稻粒重的影响［68］。QUASIMODO2（OsQUA2）编码一个果胶甲基转移酶，对胚乳细胞壁乳糖醛酸的甲基酯化有重要作用，支持了光合产物远距离运输的“源-库”理论［69］。液泡转换酶OsINV2 和OsINV3 正向调控水稻淀粉组成和糖代谢过程，特别是OsINV3 对水稻粒型正向调控［70］。OsSWEET4编码一个糖转运蛋白促进六碳糖从韧皮部向胚乳细胞的转运影响水稻粒重［26］。另外一个膜蛋白GRAIN-FILLING RATE 1（GFR1），通过与Rubisco 小亚基相互作用调控水稻种子灌浆速率［25］。

胚乳颗粒的形成是一个复杂过程，胚乳主要由两种多聚物组成，直链淀粉和支链淀粉的比例影响稻米品质。多年来，大量稻米品质相关突变体如f loury endosperm（FLOs）已经被揭示与胚乳正常形成、水稻粒重密切相关。包括FLO2、FLO7、FLO10、FLO11-2、FLO13及FLO19等，他们编码不同的基因在不同调控途径发挥作用，影响胚乳及正常灌浆［27］。此外，水稻细胞核Y家族对于水稻灌浆期调控非常重要。如OsNFYB1的RNAi转基因植株表现出垩白率增加，通过结合GCC 盒ERF 转录因子和OsYUC11等调控水稻灌浆期表型［10,71-72］；OsNF-YB1、OsNFYC12 和OsbHLH144 三者形成复合体通过减少OsYNF-YB1 被26S 蛋白酶体降解的数量维持OsNF-YB1 的稳定性，OsNF-YC12 也可以通过结合FLO6和OsGS1;3启动子区调控稻米品质［27］。除了上述这些基因外，OsNF-YC10、OsNF-YB9、OsNF-YC2、及OsNF-YC4参与水稻穗形态建成和粒型发育调控［73-75］。上述这些结果表明，细胞核Y 家族蛋白调控水稻粒型和品质。

2.5 表观修饰调控途径

表观修饰主要指不改变DNA 序列的可遗传表型变化［76］。对组蛋白的包括H3 和H4 的甲基化、乙酰化修饰在水稻的功能研究最为透彻。作为第一个参与表观修饰调控的水稻粒型QTL，GW6a编码一个含有GNAT 结构域组蛋白乙酰转移酶Osg1HAT1，过表达GW6a 能增加颖壳细胞数量、籽粒灌浆速率、籽粒大小及千粒重；此外，Osg1HAT1 也促进参与组蛋白H4 乙酰化修饰［23］。通过酵母双杂交实验筛选，水稻DA1 的同源蛋白HDR3 能够与GW6a 发生相互作用。HDR3 是一个能够正向调控水稻籽粒大小的具有泛素结合活性的泛素受体蛋白，有趣的是，HDR3 是通过增强GW6a 泛素化水平来延缓而不是促进GW6a 依赖26S 蛋白酶体的降解，从而提高GW6a 蛋白数量和酶活增强后者对下游靶基因的表达调控［77］。SDG725编码一个H3K36 甲基转移酶，其功能缺失突变体展现出类似BR 缺陷表型，包括植株矮化、叶倾角减少基小圆粒表型［78］。另一类PcG多梳蛋白也被验证通过H3 甲基化调控影响胚乳发育状态。两个同源基因OsFIE1 和OsFIE2 对水稻粒宽、稻米品质等产生多种影响，特别是OsFIE2 能够通过影响OsMADS6的H3K27me3 甲基化程度影响水稻花器官发育过程［24,79］。这些基因表明各类表观修过调控与水稻粒重有密切的调控关系。

2.6 microRNA 调控途径

microRNAs（miRNAs）是一类存在植物体内非编码RNA。经过多种miRNA 加工酶加工后，其最终产物能够靶向结合某些特定基因序列调控他们的翻译起始或者促进这些基因降解。miRNA参与许多植物生长发育过程调控，包括生物胁迫及非生物胁迫反应、环境适应性及衰老等［80］。OsSPL14（IPA1）编码一个SPL 家族转录因子，是重要的调控水稻茎秆和粒型的QTL。其受到水稻miR156调控［81-82］。OsSPL14基因通过结合水稻株型基因OsTB1和OsDEP1启动子区分别调控植物的株型和穗型。过表达miR156能显著减少OsSPL14的表达量而表现出矮化、茎杆变细及分蘖变少等表型。另外一个SHORT INTERNODES 1（OsSHI1）编码一个含有IGGH 结构域的转录因子也可以与IPA1 结合，相互拮抗调控水稻株型［83］。上述这些基因构建了以IPA1为中心的水稻株型和粒型的调控网络。SPL 家族的另外一个成员OsSPL16编码一个正向调控水稻粒宽的QTL，同样受到miR156的调控，同时其作为转录因子调控结合GL7/GW7 启动子区促进颖壳细胞伸长［16,84-85］。OsSPL13是第一个通过全基因组关联分析（GWAS）找到的调控水稻粒重和产量的QTL［86］。其3’-UTR 同样包含一个miR156的结合区域。此外，OsSPL13结合在Small and Round Seed 5（SRS5）基因的启动子区调控颖壳细胞大小。上述结果构建miR156-OsSPL13/GLW7-SRS5水稻粒型调控网络［17］。OsSPL18可以结合在OsDEP1启动子区，也受到OsmiR156k的靶向降解，表明一个新的OsmiR156k-OsSPL18-OsDEP1的调控网络参与水稻粒型建成［87］。OsSPL9 通过直接激活RCN1调控水稻早期穗粒数原基发生［88］。Jiang 等对水稻的SPL 家族蛋白进行总结和分类，也揭示了另外8个SPL家族蛋白存在穗部表型［89］。

除了miR156调控水稻粒型穗型外，其他miRNA 也参与了水稻粒型调控过程。OsmiR535是OsSPL7/12/16的靶向miRNA，下游对OsPIN1B、OsDEP1、OsLOG及OsSLR1的表达量调控［90］。OsmiR397调控OsLAC基因影响穗部的粒长、粒宽和千粒重［91］。OsmiR396通过影响Growth Regulating Factor（GRF）转录因子的表达调控水稻穗粒数和粒型关系，建立了OsmiR396-GRF-GIF调控网络［92］。Zhao 等通过应用Short Tandem Target Mimic（STTM）方法阻断OsmiR159与靶基因的相互作用，发现多个MYB 结构域基因，如OsGAMYB 和OsGAMYBL1，表达量明显上调，进而对水稻株高、叶长和粒型进行调控［93］。OsmiR530分别靶向OsPIL15和OsPL3正调控水稻粒型［94］。上述结果说明，miRNA 通过靶向与水稻粒重相关基因来影响水稻粒型。

3 结语与展望

水稻粒型发育及调控是一个复杂过程，除了受到许多基因参与调控，环境因素包括营养、田间管理、种植区域等也有显著影响。本文综述总结了水稻粒重相关的表观调控途径、转录水平、蛋白质互作等分子调控过程，与光合作用、蔗糖运输等代谢过程及细胞分裂与分化细胞学层面调控过程。这些基因相互作用，有的形成调控网络发挥作用，有的仍然不清楚其具体功能。目前多个证据表明，水稻不同性状之间存在微妙的动态平衡［31,48,61］。本文从泛素化途径、G-蛋白偶联途径、激素调控途径、光合作用调控途径、表观调控途径和micro-RNA 调控途径列举和整理与水稻粒重相关的重要QTL 和功能基因。由于合子（胚和胚乳）决定种子大小，在作物驯化过程受到强烈人工选择以优化种子大小与品种有益等位基因组合。不同物种在进化过程可能存在相似的调控机制［9］。比如拟南芥的DA1基因调控种子大小，在水稻中也有相似机制［19］；拟南芥MAPK 信号途径调控植物广谱抗病性分子机制，然而在水稻中主要在调控水稻粒型和穗粒数平衡［61］。此外，对于多基因调控网络的研究也大大加深我们对于水稻粒重这一复杂性状的分子机理了解。如OsmiR156k-OsSPL18-OsDEP1、OsmiR396-GRFGIF调控网络等［87,92］。这些信号调控网络之间的相互影响和调控关系需要在未来投入更多的研究，包括多组学联合分析等以便能更加全面构筑水稻粒重调控网络，为未来实现真正意义上分子模块设计育种打下坚实理论基础。

基因编辑技术经过过去十多年的蓬勃发展，目前已经开发出TALEN 系统、Cas9 系统、Cas12系统以及单碱基编辑器ABE 等［95］。值得注意的是，目前利用启动子编辑微调基因表达产生多种不同性状已有课题组出现相关报道。早在2017 年，美国冷泉港Zachary B.Lippman 课题组就提出利用多个不同基因家族成员的自然或者人工改良等位基因进行花序的改良，达到从野生番茄向人工番茄快速驯化的目的［96］。扬州大学刘巧泉课题组和华南农业大学刘耀光课题组分别利用CRISPRCas9技术对稻米品质基因Waxy基因进行启动子、5’-UTR 及内含子区进行基因编辑，获得不同的新等位Waxy基因，改良水稻稻米品质［97-98］。最近，李钱锋课题组等对水稻Glucan,Water-Dikinase 1（GWD1）基因进行启动子编辑获得其弱突变的遗传改良材料，能够实现在不改变水稻主要农艺性状的同时对水稻稻米透明度和种子萌发状态的改良［99］。除了水稻稻米品质改良，对水稻细菌性条纹病抗病基因Xa13启动子编辑获得提高水稻细条病抗性但是并没有降低花粉的育种改良材料在以后水稻高产抗病育种过程的应用也是一个很好的例子［100］。这些都预示着对水稻粒重相关基因的启动子编辑具有重要的生物学和生产实践意义。

随着水稻基因组变异组学的发展，更多的不同水稻品种材料在单碱基SNP 差异、序列变异（SV）差异为水稻育种和分子设计育种聚合不同优良性状改良提供新的思路［101］。这些在不同品种的水稻序列变异不仅挖掘更多新的有效等位基因，在育种生产上应用；另外也可能解决过去QTL 定位出现的问题，新的变异可能隐藏着的新的功能性基因在水稻“四性”的作用值得重视。除了经典遗传学在水稻育种方面的应用，发展智慧农业，物联网和农村5G 建设也是推动我国农业高质量发展，乡村振兴的重要举措。目前，华南地区以广东省农业科学院和地市政府联手打造的产学研结合基地，农村产业园、大田规模化种植基地、设施园艺标准示范基地等也在逐步建设，这将引领农业农村现代化在2025 年、2035 年不同时间取得阶段性进展。与之相配套的技术也在不断开发。比如，中国农业科学院都市农业研究所最近利用6 种矮秆品种结合定制光谱LED 光源为水稻不同生育期提供最佳光环境同时精确调控各种环境因素，实现对大田环境120 d 生育期水稻压缩至60 d，并且实现相当于单产652 kg/667m2巨大应用潜力。2007 年研发出水稻“三控”施肥技术，该技术是以控肥、控苗、控病虫为主要内容的高效施肥及配套技术体系，与传统施肥方法相比，一般减少氮肥20%，水稻增产10%左右，氮肥利用率提高10%以上，有效分蘖增多，无效分蘖减少，病虫害和倒伏大幅减轻，多年来的成功应用使得该技术已成为广东省和农业部主推技术［102-103］。除此之外，利用农机自动导航作业与无人旋耕机、播种机、插秧机、喷雾机和收获机的有机结合，华南农业大学罗锡文院士打造的“无人农场”是国家“智慧农业”示范的典型例子，争取“无人农场”5 年后进入推广阶段、10 年后加快推广速度，完成技术转化。这些技术的配套实施将极大有助于我们国家水稻生物育种、打造智慧农业，打赢种业翻身仗。