Tim-3血清水平对类风湿性关节炎疾病进展与免疫功能的影响

邹晓军

类风湿性关节炎是临床较为常见的自身免疫性疾病，其常常合并有间质性肺炎以及慢性心功能不全[1]，临床特征主要包括滑膜炎性反应以及增生。研究发现，类风湿性疾病的进展与机体的T细胞活化显著相关[2]。T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域分子-3（T cell immunoglobulin and mucin-domaincontaining molecule-3，Tim-3）是机体重要的负性共刺激性分子，主要在患者的Th1细胞中表达，与机体的半乳糖凝集素（Galectin9）共同参与适应性负性调节的免疫调节作用[3，4]。多种动物模型研究发现[5]，在自身免疫性疾病的进展中，通过对Tim-3/Galectin9信号通路的显著性激活，诱导Th17的显著凋亡，刺激T细胞的增殖，维持T细胞的平衡，进一步对Th1/Tc1平衡进行调控[6]。但是目前对于类风湿性疾病的进展与血清学Tim-3之间的相关性研究较少[7]。本研究主要分析Tim-3血清水平对类风湿性关节炎疾病进展与免疫功能的影响，为临床提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料本研究采取前瞻性研究，选取我院2017年2月～2021年2月收治的类风湿性关节炎患者120例作为研究对象，其中男69例，女51例，年龄31～69岁，平均（59.11±1.09）岁，根据类风湿性关节炎患者病情评价（DAS28评分）[8]，其中低度活动患者41例，中度活动患者35例，高度活动患者44例。另选取同期进行健康体检的志愿者120例作为对照组，两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。患者均签署知情同意书，且本研究经伦理委员会论证通过。

表1 两组患者的一般资料比较

患者入选标准：①符合类风湿的诊断标准[9]；②均知情同意。排除标准：①肝肾功能异常；②其他自身免疫性疾病；③精神或认知功能障碍；④合并恶性肿瘤等。

1.2 研究方法对所有研究对象肘静脉采血4ml，采用酶联免疫法对患者的Galectin9水平进行检测，实验试剂来自上海罗氏，操作流程严格按照说明书 进行。

1.3 观察指标①比较两组患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平。②比较不同严重程度患者的CD4+Tim-3、 CD8+Tim-3水平。③比较两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。④比较不同严重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。⑤分析CD4+Tim-3、CD8+Tim-3与CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水 平以及疾病进展的相关性。

1.4 统计学方法数据均采用SPSS 20.0软件进行汇总分析。其中计量资料以±s表示，采用t检验或者方差分析，计数资料以率表示，采用卡方检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比较观察组患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 两组患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比较

2.2 不同严重程度患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比较不同严重程度患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平差异有统计学意义（P<0.05），经过两两比较，随着疾病进展，患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平显著升高，见表3。

表3 不同严重程度患者CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比较

2.3 两组患者的免疫功能比较观察组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于对照组，CD8+水平显著高于对照组，见表4。

表4 两组患者的免疫功能比较

2.4 不同严重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+水平比较不同严重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平差异有统计学意义（P<0.05），随着疾病的进展，患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著降低，CD8+水平显著升高，见表5。

表5 不同严重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+水平比较

2.5 相关性分析通过相关性分析，患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+呈负相关，与CD8+和疾病进展呈正相关，见表6。

表6 相关性分析

3 讨论

Tim-3又被称之为T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3，其主要在成熟的Th2细胞内分化成熟[10]，同时在CD8+T细胞、NK细胞、树突状细胞、肥大细胞以及内皮细胞中表达。在基因的多态性分析中[11]， Tim-3的多态性与类风湿性疾病呈现显著的相关性。国外研究已证实[12]，在Tim-3的基因多态性分析中，其包含的6个单核苷酸的结合位点可能与类风湿性疾病的发病呈现显著的相关性。而在基因多态的分析中，-574T>G以及4259G>T多态性与类风湿性关节炎的疾病进展显著相关[13]。

本研究中，通过对患者的CD4+T细胞以及CD8+T细胞的Tim-3水平的分析，可知在CD4+T细胞以及CD8+T细胞中Tim-3均呈较高水平表达。提示Tim-3在类风湿疾病的进展中发挥重要的调控作用[14]。国内研究已证实[15]，Tim-3与CD4+CD25+Foxp3+细胞呈现显著的相关性。推测患者的Tim-3可能对于调节性T细胞具有显著的抑制性作用，进一步促进类风湿性关节炎疾病进展。同时也有学者研究证实[16]，在CD4+T细胞以及CD8+T细胞中Tim-3 mRNA均表现为较高水平的表达，进一步证实了Tim-3与类风湿性关节炎的疾病进展显著相关。病理学的研究证实[17]，Tim-3表达水平的显著上升，可进一步对患者的T细胞进行活化，同时在炎性微环境的共同刺激下，将进一步导致Tim-3的抑制性作用被显著削弱。而在类风湿性关节病的疾病进展中，局部病灶部位的炎性反应过程中，随着细胞的不断凋亡和炎性反应的增强，患者的Tim-3/Galectin9信号通路进一步激活，进一步抑制机体的免疫功能[8]。而在本研究中，通过对患者免疫功能的分析，随着疾病进展，患者的免疫指标呈现显著下降趋势，提示随着患者病灶部位炎性反应的不断激活，患者的Tim-3水平显著升高，而免疫功能则呈现显著下降的趋势。Tim-3还可通过对患者的Th1以及Th17的显著下调作用，进一步促进调节性T细胞的免疫耐受作用。丁思思等[18]通过对类风湿性关节炎患者的Tim-3水平分析表明，随着疾病进展，患者的Tim-3水平呈现显著上升趋势，与本研究一致。而在相关性的研究中，患者的免疫功能与Tim-3水平均呈现显著的相关性，提示通过对患者Tim-3水平的检测，可以对患者的疾病进展以及免疫功能进行预测。

本研究还存在一定的局限性，由于纳入本研究的样本量较小，所以在临床的推广意义还有待在日后的大样本研究中进行验证。

综上所述，CD4+T细胞以及CD8+T细胞的Tim-3 水平的异常上调，进一步导致疾病活动度显著升高，Tim-3水平可通过对体液免疫以及细胞免疫水平的调控作用，参与类风湿性疾病的疾病进展。