甲磺草胺液相色谱通用分析方法研究

孙钰洁，陈 阳

(1.江苏省农产品质量检验测试中心，江苏南京 210013；2.江苏省农产品品牌发展中心，江苏南京 210036)

甲磺草胺又名磺酰唑草酮，为原卟啉原氧化酶抑制剂，主要通过抑制杂草叶绿素生物合成，致使叶片迅速干枯死亡来灭杀杂草[1]。甲磺草胺除草谱广，适用于防治多种农作物田中一年生阔叶杂草﹑禾本科杂草和莎草等[2]。在美国﹑巴西等国家，甲磺草胺已经取得登记并广泛使用，国内市场也逐步打开[3]。国内已登记的甲磺草胺制剂有悬浮剂和水分散粒剂。甲磺草胺的检测方法有高效液相色谱法[4]、液质联用法[5]，其制剂的分析国内文献没有报道。液质联用仪价格昂贵，不适于实际生产中推广，因此开发一种分析方法检测不同制剂中甲磺草胺含量，对于甲磺草胺的生产和质量控制具有重要意义。 本试验选取40%甲磺草胺悬浮剂和75%甲磺草胺水分散粒剂作为试样，开发了一种液相色谱通用方法分析已登记的甲磺草胺悬浮剂和水分散粒剂。

1 试验部分

1.1 试剂和溶液

乙腈：色谱纯(德国Merck公司)；水：超纯水；磷酸，分析纯(国药集团化学试剂有限公司)；磷酸溶液：Ψ(水∶磷酸)＝1 000∶1；甲磺草胺标样：含量98.5%，白色粉末(上海市农药研究所)；40%甲磺草胺悬浮剂(江苏省苏州富美实植物保护剂有限公司)；75%甲磺草胺水分散粒(泸州东方农化有限公司)。

1.2 仪器

Agilent1200高效液相色谱仪、二极管阵列检测器、Agilent色谱工作站、色谱柱：Zorbax SB-C18(150 mm ×4.6 mm，5μm)(安捷伦公司)；Millipore超纯水制备系统；超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；过滤器：滤膜孔径0.45 μm (Millipore)。

1.3 色谱操作条件

流动相：Ψ(乙腈∶磷酸水溶液)＝60∶40，经滤膜过滤，并进行脱气；流速：0.8 mL/min；柱温：室温；检测波长：230 nm；进样体积：5 μL；保留时间：甲磺草胺约3.1 min (图1)。

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

称取0.05 g(精确至0.000 1 g)甲磺草胺标样于 50 mL容量瓶中，加入40 mL乙腈，超声波振荡5 min，冷却至室温，用乙腈稀释至刻度，摇匀。准确移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀。

1.4.2 试样溶液的配制

称取含0.05 g (精确至0.000 1 g)甲磺草胺的试样于50 mL容量瓶中，加入40 mL乙腈，超声波振荡 5 min，冷却至室温，用乙腈稀释至刻度，摇匀。准确移取上述溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，过滤。

1.4.3 计算

在操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针甲磺草胺峰面积相对变化小于1.2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中甲磺草胺峰面积分别进行平均。试样中甲磺草胺质量分数按公式(1)计算：

式中：ω1为试样中甲磺草胺质量分数，以%表示；A2为试样溶液中甲磺草胺峰面积的平均值；m1为甲磺草胺标样的质量，单位克(g)；ω为标样中甲磺草胺质量分数，以%表示；A1为标样溶液中甲磺草胺峰面积的平均值；m2为试样的质量，单位克(g)。

2 结果分析

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 检测波长的选择

当前，新一代信息技术不断演进，持续与实体经济加速融合，制造业是产业迈向中高端水平、经济转向高质量发展的中坚力量。为进一步推动制造业转型升级和创新发展，我国提出了信息化和工业化融合(简称“两化融合”)发展战略，相继出台了“互联网+”行动、中国制造2025、制造业与互联网融合发展战略等一系列相关政策规划。如何借助两化融合增强企业创新驱动力、推动产业结构高端化、以及经济高质量发展成为理论研究和实践运用亟待解决的重要问题，受到政府、学术界以及产业界的普遍关注，两化融合绩效的测算与分析是解决该问题的关键。

甲磺草胺的紫外光谱图如图4所示，从图中可以看到甲磺草胺的最大吸收波长约230 nm，在该波长处灵敏度较高，干扰较少，能够满足分析的要求，故将检测波长确定为230 nm。

2.1.2 流动相的选择

色谱柱选择常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根据甲磺草胺物化性质和溶剂的紫外吸收波长，选择乙腈作为溶剂溶解样品，并以乙腈和水作为流动相，为了得到更好的分离效果和峰形，在1 000 mL水里加入1 mL磷酸。选择乙腈与磷酸水溶液比例60∶40作为流动相，流速0.8 mL/min。

2.2 方法线性关系的测定

按1.4.1节标样溶液的制备方法配制5个不同浓度的有效成分线性相关溶液。在操作条件下，待仪器稳定后，按浓度从低到高的顺序测定每个溶液中甲磺草胺的峰面积，取2次测定的平均结果。以甲磺草胺质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线(图5)。

从图5可以看出，当甲磺草胺质量浓度42.87～ 117.43 mg/L (进样体积5 µL)时，其质量浓度与相应的峰面积之间呈现良好的线性关系，计算得回归方程为y=17.315 7x+47.107 3，相关系数r=0.999 7，完全可以满足定量分析要求。

2.3 方法精密度试验

按1.4.2节试样溶液的制备方法配制5个40%甲磺草胺悬浮剂精密度溶液和5个75%甲磺草胺水分散粒剂精密度溶液。以76.83 mg/L有效成分线性相关溶液为标样溶液，在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，按照标样溶液、精密度溶液、精密度溶液、标样溶液的顺序进行测定，结果见表1、表2。

表2 75%甲磺草胺水分散粒剂中甲磺草胺精密度试验结果

表1 40%甲磺草胺悬浮剂中甲磺草胺精密度试验结果

从表2可以看出，75%甲磺草胺水分散粒剂中甲磺草胺质量分数测定结果的RSD为0.235 0%，小于修改的Horwitz公式2(1-0.51ogC)×0.67=1.399 1，有效成分分析方法精密度的测定结果符合要求。

2.4 方法准确度试验

称取含0.02 g (精确至0.000 1 g)甲磺草胺的40%甲磺草胺悬浮剂于50 mL容量瓶中，再加入甲磺草胺标样0.02 g (精确至0.000 1 g)，按1.4.2节试样溶液的制备方法配制5个有效成分准确度溶液。

称取含0.02 g (精确至0.000 1 g)甲磺草胺的75%甲磺草胺水分散粒剂于50 mL容量瓶中，再加入甲磺草胺标样0.02 g (精确至0.000 1 g)，按1.4.2节试样溶液的制备方法配制5个有效成分准确度溶液。

以76.83 mg/L线性相关溶液为标样溶液，在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，按照标样溶液、准确度溶液、准确度溶液、标样溶液的顺序进行测定，结果见表3、表4。

表3 40%甲磺草胺悬浮剂回收率试验结果

从表3可以看出，40%甲磺草胺悬浮剂中甲磺草胺平均回收率为100.30%，具有良好的准确度。

从表4可以看出，75%甲磺草胺水分散粒剂中甲磺草胺平均回收率为99.19%，具有良好的准确度。

3 结 论

本文选取国内已登记的40%甲磺草胺悬浮剂和75%甲磺草胺水分散粒剂作为试样，建立了一种高效液相色谱方法分析不同制剂中甲磺草胺的含量，并进行了方法学验证。试验结果表明，方法的精密度和准确度高，分离效果好，操作简便、快捷，为不同制剂中甲磺草胺的分析提供了参考。