党鹏程,刘长彬, *,李守江,谷红伟,李 军,王智鹏,郭延华,,倪建宏,王 萌
(1.佛山守仁生物技术有限公司,广东 佛山 528000;2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国建重点实验室)
胚胎工程技术包含了超数排卵、胚胎冷冻、胚胎鉴定、胚胎移植等技术环节,其中,同期发情技术是胚胎移植中关键的技术环节之一[1]。绵羊同期发情常用的药品主要有PGF2a、CIDR 和海绵栓+PMSG 或海绵栓+PGF2a等。有研究表明,CIDR 对动物的发情紊乱、周期延迟、卵巢静止等具有较好的疗效[2]。CIDR 法对羊、牛进行同期发情处理,取得了较好的同期发情效率。另外,欧美等一些国家也倾向于选择CIDR 进行动物的同期发情处理[3]。该技术是绵羊重要的养殖环节,也是缩短产羔间歇的一个重要技术手段。目前,同期发情技术在规模化和集约化养羊场的应用已逐渐成熟,在批量化羔羊育肥、上市和屠宰方面取得了一定的成效,在规模效益方面具有潜在的推广应用价值。而随着技术的进步,同期发情处理的装置和药品也在发生着不断的变化。因此,本试验通过研究国产化CIDR[4]掉栓率、发情率、折断率和受胎率等,旨在建立一套绵羊同期发情控制技术方案,以期能够获得同期发情处理的准确数据,更好地为中国畜牧业生产服务。
选择无繁殖系统疾病且有产羔经历的成年母羊757只,用于国产化CIDR同期发情试验研究。
国产化孕酮控制释放器CIDR 购自盐城燕瑞生物科技有限公司;海绵栓(45 mg/个)购自北京绿欣康有限公司;孕马血清促性腺激素(PMSG)和氯前列希醇(PGF2a),由宁波三生药业生产。
1.3.1同期发情
将试验羊随机分成5 组,国产化CIDR 处理组618 只,海绵栓处理组89 只,PGF2ɑ处理组50只。埋置CIDR 或海绵栓前,需蘸取土霉素液,埋栓当天为0 天,第13 天撤栓,同时肌肉注射PMSG 330~450 IU,撤栓后24~48 h 公羊试情,记录发情羊数和撤栓后发情时间,在发情后12 h 和24 h 分别输精,共计输精2次,统计发情结果。
PGF2ɑ注射当天为0 天,注射后24 h 公羊试情,记录发情时间和数量,输精时间同上。
在人工授精后35~45 d 进行B 超妊娠检查,怀孕羊记为阳性,空胎羊记为阴性。统计受胎数量。
1.3.2发情鉴定
在国产化CIDR 撤栓或PGF2ɑ注射后24~48 h进行公羊试情,如出现被爬跨母羊静立、塌腰或母羊紧紧围绕公羊并嗅公羊,或母羊紧跟公羊排成一线,公羊停止前进母羊也随之停止前进,并且母羊外阴充血发红,或有透明拉丝粘液流出阴门等反应,即可认定为发情。
1.3.3数据统计
同期发情试验分3 次进行,数据用平均值± 标准偏差(Mean ± SD)表示,用SAS 软件进行统计分析,当P <0.05时表示差异显著。
从母羊埋栓当天计,在埋栓过程中,CIDR 栓折断率平均1.50% ± 0.46%,掉栓率平均5.30% ±1.51%,母羊发情率平均88.98% ± 6.25%。埋栓35~45 d 进行B 超妊娠检查,母羊受胎率平均57.38% ± 2.40%。结果如表1 所示,国产化CIDR埋栓组之间掉栓率、发情率、栓折断率和受胎率差异不显著(P >0.05)。
表1 国产化CIDR同期发情效果及栓折断情况
将289 只母羊随机分成CIDR+PMSG、海绵栓+PMSG 和PGF2a3 个处理组。从表2 可知:CIDR +PMSG 和海绵栓+PMSG 组掉栓率和发情率差异显著(P <0.05);CIDR+PMSG、海绵栓+PMSG 和PGF2a3 组之间发情率差异显著(P <0.05);受胎率之间差异不显著(P >0.05)。
表2 不同同期发情处理方法的效果比较
影响同期发情效果的因素较多,包括饲料、营养、季节条件和激素产品等[5]。在绵羊同期发情过程中,埋置孕酮阴道栓以提高血液中孕酮水平,一方面抑制卵泡的发育,另一方面促使优势卵泡发生黄体化。孕酮阴道栓还可以促进早期黄体的形成和发育,从而在撤除海绵栓时,血液中孕酮含量急剧下降,优势卵泡快速形成并发育排卵[6]。韩志强[7]等研究表明,CIDR+PMSG、CIDR+PGF2a等方法对同期发情后的妊娠率无显著影响,这与本试验结果相似。肖国亮[8]等研究表明,进口CIDR 与国产化CIDR 在秋季的同期发情处理效果上优于春季,可能是因为秋季逐渐进入短日照,而大部分羊是短日照季节性发情,因此受季节影响,CIDR 秋季处理效果优于春季。合麦提江[9]选用CIDR+PMSG处理方法,在秋季对多浪羊进行同期发情处理,发情率为93.1%,受胎率为96.3%,同时不同季节对发情率的影响试验表明,春秋两季进行同期发情处理,在发情率方面无显著差异(P >0.05),秋季受胎率显著高于春季(P <0.05)。马世昌[10]等研究显示,同期发情率在72 h内CIDR+氯前列烯醇(PG)组高于CIDR+PMSG组。
受胎率的高低直接影响养羊生产的经济效益,也是衡量生产效率的重要指标。刘长彬[11]等在春季采用阴道栓+PMSG 的同期发情方法处理小尾寒羊,受胎率为47.99%。试验结果表明,季节不同可能对同期发情产生了一定的影响。同时也表明寒羊和湖羊等国内多胎品种虽然能够在一年内多次发情,但秋季的发情率和受胎率明显高于春季。
本研究发现,国产化CIDR在使用过程中,羊产道在异物的刺激下,分泌物会明显增加,少部分CIDR栓在撤栓时可以看到栓的表面粘有白色或脓性分泌物,为了解决炎症反应,在试验后期埋栓时,在CIDR栓表面涂抹盐酸土霉素制剂或土霉素粉剂+植物油混合剂,可有效解决炎症反应问题,减少因炎症反应造成的阴道炎症,同时还可提高人工授精技术的成功率。