一例黑叶猴眼鼻部恶性肿瘤及大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌混合感染的诊断

陈巧利，王 琦，李 达，张玲莉，卢志远，肖图雄，谢景超

(贵阳市黔灵山公园管理处，贵州 贵阳 550004)

黑叶猴(Trachypithecusfrancoisi)隶属灵长目(Primate)，猴科(Cercopitheciade)，疣猴亚科(Colobinae)，乌叶猴属(Trachypithecus)，是我国Ⅰ级保护动物，国内仅分布于广西、贵州的部分地区[1～3]。2018年9月，黔灵山动物园饲养的1只黑叶猴眼部出现不适，持续治疗1月后死亡。现将该猴的诊疗过程及诊断检查结果进行总结分析，以期为类似病例的诊断和防治提供参考。

1 临床症状

2018年9月18日，饲养员巡视发现1只黑叶猴(14岁)眼睛泪流不止，咳嗽，精神状态、饮食、粪便未见异常。使用阿莫西林、穿心莲、氯霉素眼药水、盐酸左氧氟沙星滴眼液等药物进行治疗后咳嗽减轻，但眼部微肿且反复流泪，鼻孔间歇性出血，对症治疗后1个月死亡。

2 病理剖检

将该猴进行剖检，结果显示眼部及鼻腔组织增生，脱水严重，肺部有炎症(见图1)。

图1 病理剖检

3 病理组织学检查

3.1 病理组织切片观察将眼眶组织、鼻腔组织用10%福尔马林浸泡脱水后送至贵州医科大学附属医院病理科制作切片，苏木素-伊红染色镜检。结果：(1)眼眶组织切面呈灰白、灰褐色，呈囊实性；另见多量灰白、灰褐色不整形组织，切面灰白、实性质软(见图2)。(2)鼻腔组织皮肤表面未见明显异常，切面灰白、实性质软，见豆渣样物；另见灰白、灰褐色不整形组织1块，切面灰白、灰红实性质中(见图3)。经贵州医科大学附属医院病理科诊断为眼眶组织恶性肿瘤伴坏死，肿瘤破坏眼球内组织；鼻腔组织恶性肿瘤伴坏死。

图2 眼眶组织病理切片

图3 鼻腔组织病理切片

3.2 免疫组化标记检查为进一步协助诊断并定性眼鼻部恶性肿瘤，对组织切片染色进行Eber原位杂交实验(设阳性对照)。利用抗原抗体特异性结合原理，选择CK、CK7、Vim、CD20、CD79α、CD56、MUM1、CgA、Syn、S100、Melan-A、Ki-67 auto、CD3ε、HMB45、EMA、CD10、P63、CEA、CD117、CD138、CD30、LCA、ALK1、CD4、TDT、CD123、CD163、溶菌酶、Kappa、Lambda抗体试剂进行免疫组化实验。原位杂交结果为Eber(-)。免疫组化结果显示(见图4)：CK(+，灶性)、CK7(+，灶性)、Vim(+)、CD20(少数+)、CD79α(少数+)、CD56(部分+)、MUM1(少数+)、Syn(+，灶性)、S100(+，散在少数)、Melan-A(少数+)、CD10(+/-)、CD117(+，少数散在)、ALK1(+/-)、CD163(少数+)、Kappa(少数+)、Ki-67 auto(约80%+)；其余标记为阴性(-)。诊断为眼眶组织恶性肿瘤，考虑为：(1)神经内分泌癌或未分化癌；(2)非霍奇金淋巴瘤(弥漫大B细胞淋巴瘤或浆细胞肿瘤)。由于组织来源种系原因，免疫组化标记结果不太理想，尚不能对肿瘤进行最终定性。

图4 免疫组化标记

4 细菌学检查

4.1 细菌分离培养采集该猴血液制作血液涂片，革兰氏染色镜检，可见革兰氏阴性杆菌。采用琼脂培养法对血液、肝脏组织进行细菌培养及鉴定，结果在血液中检测出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，在肝脏组织中检测出大肠埃希菌。

4.2 药敏试验为了对以后此类细菌感染的治疗用药提供参考，利用琼脂稀释法进行细菌最低抑菌浓度(MIC)测定，结果见表1：2种病菌均对阿米卡星、氨曲南、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢唑林、厄他培南、头孢吡肟、头孢西丁、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、美洛培南、复方新诺明、替加环素、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦敏感，可作为治疗用药。

表1 药敏试验

5 结论

通过临床症状、病理剖检、病理组织学检查、免疫组化标记、细菌学检查，诊断该猴为眼部及鼻腔组织恶性肿瘤，并伴有大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌混合感染。

6 讨论

6.1该猴自左眼出现症状后，精神、食欲变化不大，除咳嗽外无其他显著症状，按常规进行对症治疗，但后期眼、鼻部肿物迅速增长，严重影响正常的呼吸和生活。考虑到该猴年龄较大，应激反应强烈，麻醉进行眼部手术风险太大，最终采取保守治疗。将眼、鼻部组织送检贵州医科大学附属医院，经病理科诊断为恶性肿瘤，免疫组化结果显示肿瘤细胞增殖指数高达80%。

6.2肿瘤的发生与动物年龄、体质、饲养环境相关，饲料霉变、药物使用不当等都可能诱发肿瘤[4，5]。造成该猴眼、鼻部恶性肿瘤的因素尚不能确定，有待进一步探讨。在今后的饲养管理工作中，为消除各种可能诱发动物患肿瘤的不安全因素，要注意做好饲养卫生清洁工作，保证饲料、饮水清洁，增强动物抵抗力；加强与动物互动交流，不断积累经验，争取做到早发现早治疗。

6.3该病例出现的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌混合感染可能与恶性肿瘤破坏机体组织，机体抵抗力下降有关。此次检测出的2种细菌耐药性与乔宁等[6]的报道基本符合，但均对氨苄西林产生耐药性。为避免产生新的耐药菌株，在治疗动物疾病时需注意抗生素的交叉使用。