福建省种鸡J亚群禽白血病的流行病学调查

陈秀琴，张世忠，郑 敏，林 甦，朱志明，黄梅清*，林锋强* (.福建省农业科学院 畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福建 福州35003；2.吉林大学 人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室，吉林 长春 30062)

禽白血病(avian leukosis,AL)是由反转录病毒科α反转录病毒属的禽白血病病毒(avian leucosis virus,ALV)引起禽类的一类肿瘤性疾病[1]。根据病毒血清中和试验、囊膜糖蛋白、宿主范围和病毒干扰模式的不同，可将ALV划分为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K共11个亚群[2-4]。只有 A、B、C、D、E、J、K 7个亚群可以自然感染鸡群[2]，其中E亚群是内源性病毒，通常致病性弱甚至无致病性，其余亚群均为外源性病毒，具有较强的致病性[5]。1988年，英国科学家首先从白羽肉鸡中分离到对鸡致病性更强的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)[3]，随后在世界各地广泛传播，给全球养禽业带来巨大的经济损失[6]。1999年至今，我国已先后报道从鸡群中分离到ALV-J毒株[1,7-9]，特别是自2007年以来，我国多地的蛋鸡场暴发以血管瘤为特征的J亚群AL[10]。外源性ALV的传播方式包括水平传播和垂直传播两种。水平传播是通过接触ALV感染鸡或被ALV污染的物品，通常造成短暂的病毒血症[3]。绝大多数水平传播都发生在出壳后的雏鸡阶段。被接触感染的鸡都是由于与先天感染的鸡的直接接触而被感染[11]。垂直传播是ALV最重要的传播方式，感染鸡可产生持久的病毒血症[3]。母鸡和公鸡都可以将ALV-J传播给下一代[11]。

ALV感染对鸡群的危害体现在两方面：首先，ALV诱发肿瘤导致死亡，但死亡率通常较低(1%～2%)；其次，ALV感染鸡可发生亚临床感染，导致产蛋下降、免疫抑制或生长缓慢。而由ALV感染导致的继发感染所带来的损失可能远远大于由于肿瘤致死造成的经济损失[2]。目前，尚无预防AL的有效疫苗，主要依靠种源净化[12]。

为了解福建省种鸡感染ALV的情况和进一步开展福建地区垂直性传播病毒病净化工作，本研究采集了福建省不同地区、不同品系种鸡的血清和初产蛋，对采集样品分别进行了ALV-J抗体检测和ALV p27抗原检测。

1 材料与方法

1.1 样品来源及养殖场概况分别从福州、莆田、龙岩3个地区6个种鸡场采集2 470份血样和2 848 枚初产蛋。各种鸡场的生产性能、种源管理情况和疫病净化情况分别见表1，2，3。

表1 各种鸡场的生产性能

每个鸡场随机抽取一定数量的健康鸡进行翅下静脉采血，5 000 r/min离心10 min分离血清，-20℃ 保存备用。

表2 各种鸡场的种源管理情况

表3 各种鸡场的疫病净化情况

1.2 ALV-J抗体检测用ALV-J抗体检测试剂盒(Avian Leukosis Virus Antibody Test Kit subgroup J，美国IDEXX)检测ALV-J抗体，具体方法参照试剂盒说明书进行。ELx800光吸收酶标仪和洗板机均为美国伯腾仪器有限公司(BioTek)。

为了保证检测结果的准确性，每份血清样品设定1个重复，只有2次均为阳性可判定为阳性。如有可疑则将该样品重复3次。

1.3 初产蛋中ALV p27抗原的检测分别于种鸡开产后1周内收集种蛋，每枚种蛋吸取1 mL稀蛋清反复冻融3次后，用ALV p27抗原检测试剂盒(Avian Leukosis Virus Antigen Test Kit，美国IDEXX公司)检测ALV特异性抗原p27，具体方法参照试剂盒说明书进行。

为了保证检测结果的准确性，每份样品设定1个重复，只有2次均为阳性可判定为阳性。如有可疑则将该样品重复3次。

2 结果

2.1 各地区种鸡ALV-J抗体检测情况如表4所示，3个地区检测的2 470份血清样品中，共有114份为ALV-J抗体阳性，阳性率为4.62%；其中福州地区检测1 185份血清，ALV-J抗体阳性率为5.23%(62/1 185)，莆田地区检测1 116份血清，ALV-J抗体阳性率为2.87%(32/1 116)，龙岩地区检测137份血清，ALV-J抗体阳性率为14.6%(20/137)。结果表明，龙岩地区的ALV-J抗体阳性率最高。公鸡的ALV-J抗体总阳性率为3.02%(25/828)，母鸡的ALV-J抗体总阳性率为5.42%(89/1 642)，表明福建省种公鸡的ALV-J抗体总阳性率低于种母鸡。对不同地区的公母种鸡的ALV-J抗体阳性率进行比较发现相同的规律。

表4 福建省种鸡场ALV-J抗体阳性率检测结果

2.2 各地区种鸡ALV p27抗原检测情况如表5所示，本研究共收集2 848枚初产蛋用于检测ALV p27抗原，有224份为阳性，总阳性率为7.87%；其中福州地区检测2 177份蛋清，阳性率为0.83%(18/2 177)，莆田地区检测298份蛋清，阳性率为62.4%(186/298)，龙岩地区检测120份蛋清，阳性率为16.67%(20/120)。结果表明，莆田地区的ALV p27抗原阳性率最高，福州地区最低。对不同品系的种鸡进行比较，发现不同品系的种鸡都有不同程度的ALV p27抗原阳性检出，福建省本地鸡的ALV p27抗原阳性率明显高于海兰、罗曼和京红。

表5 福建省种鸡场ALV p27抗原检测结果

2.3 不同用途鸡群ALV检测差异分析对蛋种鸡和肉种鸡的ALV-J抗体阳性率、ALV p27抗原阳性率进行比较，由图1可知，蛋种鸡ALV-J抗体阳性率略高于肉种鸡，蛋种鸡的ALV p27抗原阳性率明显低于肉种鸡。

图1 不同用途鸡群ALV流行病学比较

2.4 不同品系鸡群ALV检测差异分析对海兰、京红、罗曼和福建本地鸡多个品系的ALV-J抗体阳性率、ALV p27抗原阳性率进行比较，由图2，3可知，海兰品系的ALV-J抗体阳性率和ALV p27抗原阳性率都很低。京红和罗曼品系的ALV-J抗体阳性率分别达到了7.17%和10.68%，但是ALV p27抗原阳性率却均低于2%。福建地方品系鸡的ALV-J抗体阳性率和ALV p27抗原阳性率普遍高于大型种鸡场培育的品系，特别注意的是，本地鸡2的ALV-J抗体阳性率较低(2.87%)，但是ALV p27抗原阳性率却达到了62.42%。

图2 不同品系鸡群ALV-J抗体阳性率比较

图3 不同品系鸡群ALV p27抗原阳性率比较

3 讨论

AL可导致禽类免疫抑制，主要通过垂直传播，无有效的疫苗，目前防制的方法主要是通过种源净化。《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》中已经将AL列为需要优先净化的禽病，并制定了“到2020 年全国所有种鸡场达到净化标准”的疫病净化考核标准。

本研究对福建省3个地区6个种鸡场进行AL感染调查，结果表明，不同品系的种鸡群普遍感染ALV-J。ALV-J抗体总阳性率和ALV p27抗原总阳性率分别为4.62%和7.87%。此外，本研究发现本地鸡2的ALV p27抗原阳性率为62.4%，远远高于ALV-J抗体阳性率2.87%，本地鸡3也是类似的结果。李鑫等[13]对蛋鸡场进行AL流行病学调查，同样发现ALV p27抗原阳性率高于ALV-J抗体阳性率。这种现象一方面可能与ALV-J的垂直传播有关。垂直传播可导致鸡产生免疫耐受感染，只有当免疫耐受的鸡不再处于免疫耐受状态时，机体才能产生相应的抗体[14]。另一方面可能是由于鸡群中除了感染ALV-J外，还感染了马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒等其他免疫抑制性病毒，抑制了ALV-J抗体的产生[15]。

将各个种鸡场的生产性能、种源管理情况、疫病净化情况与ALV的感染进行比较，结果显示，福建省本地鸡2和本地鸡3的ALV p27抗原阳性率均远高于大型种鸡场培育的品系，而这两个本地鸡品系的死亡和淘汰率均高于大型种鸡场培育的品系。提示ALV p27抗原阳性率与鸡群的死亡和淘汰率存在一定的正相关性。赵鹏等[16]报道，种蛋中p27抗原检出率越高，种鸡群发病情况越严重，下游客户鸡群发病率和投诉率越高。此外还表明福建地方品系鸡ALV感染严重。杨凤等[10]对海兰蛋鸡、罗曼蛋鸡、特佳蛋鸡、尼克珊瑚粉蛋鸡和芦花鸡进行AL流行病学调查，发现芦花鸡的ALV p27抗原阳性率高于进口蛋鸡品系。贝怀国等[17]对江苏安徽地区5个品系的父母代种鸡及其中的3个子代鸡群进行AL的检测，发现某蛋鸡品系的p27抗原阳性率高达49.77%。崔治中[18]研究表明，我国有些纯地方品种鸡群ALV-J的感染率相当高，且开始表现典型的髓细胞瘤和其他AL的病理变化。

场1和场2严格开展ALV净化，ALV-J抗体阳性率和p27抗原阳性率普遍低于没有开展ALV净化的场，说明通过种源净化是可以降低ALV感染率。本研究还发现，福建省种公鸡的ALV-J抗体总阳性率低于种母鸡。这可能是由于种母鸡的血样数量远大于种公鸡的血样数量导致的。公鸡和母鸡对ALV的易感性是否存在显著性差异，还有待进一步验证。

鉴于福建省地方品种鸡ALV感染率较高的问题，且没有净化的鸡群对其他已实现净化的规模化养殖场可能会造成威胁，种鸡场有必要开展ALV种源净化。虽然垂直传播是ALV重要的传播方式，但是水平传播却起着放大的效应。种蛋入孵前种蛋及孵化器的消毒、孵化环节的控制、出雏前的准备工作及人员的管理，坚持自繁自养，这些对ALV的净化都发挥关键作用。同时鉴于国内活疫苗普遍存在外源性ALV污染的问题[15]，还要关注用鸡胚或鸡胚来源的细胞作为原材料生产的弱毒疫苗[18]。此外，结合实验室开展ALV净化和防控也很重要。首先，引进种鸡前必须进行ALV检疫。ALV容易发生变异和基因重组，随着引种而带入的ALV将对养殖场构成威胁[19]。其次，在育成鸡转群和种鸡留种前还要定期检测和监控鸡群的感染状态。总之，AL的净化工作任重道远，养殖场需要从饲养管理和实验室检测等方面多措并举，才能尽快净化ALV。