74例献血者ABO血型正反定型不符回顾性分析

【摘要】目的 回顾性分析本血液中心献血者ABO血型检测中正反定型不符的原因，为血型检测提供指导。方法 对2021年1月到2021年7月间全自动血型分析仪检测74例ABO血型不确定样本进一步采用手工试管法等血型血清学方法进行检测，对鉴定结果进行分类归纳、统计分析。结果 共有74例正反定型不符，其中由确认抗M影响6例，占8.11%; ABO亚型8例，占10.81%;抗原误检、漏检11例，占14.86%;抗体误检、漏检48例，占64.86%。结论  全自动血型分析仪在反定型抗体检测中的错误是造成ABO正反定型不符的主要原因，应该摸索出最佳的检测参数以降低错误率，提高准确度。并且应该与手工检测相结合，才能准确鉴定ABO血型。

【关键词】ABO正反定型不符;全自动血型分析仪;抗体漏检

目前，由于采供血事业的蓬勃发展，各个血站的采血量逐年增加，靠手工检测已不能满足工作需要，血液的自动化检测已经全面应用。但由于各个厂家所生产的设备的准确率不同，从而会影响血液质量及输血安全。

1 材料与方法

1.1研究对象  本研究选取了2021年1月至2021年7月在献血者，经全自动血型分析仪ABO血型检测发现正反定型不符样本74例。

1.2试剂与仪器单克隆抗A、抗B、抗A1、单克隆抗AB、单克隆抗H、ABO细胞（上海血液生物医药有限责任公司）;抗人球蛋白卡（珠海贝索生物技术有限公司）;离心机（久保田KA-2200）;全自动血型分析仪（贝克曼，PK7300）。

1.3 方法

1.3.1血型血清学检测献血者初次ABO 血型鉴定由血液检测实验室采用全自动血型分析仪，参照仪器说明书进行。血型参比实验室进一步进行ABO 正反定型，采用手工试管法，参照文献进行操作。对每个ABO正反定型不符结果进行分析，判断其原因，进行统计。

1.3.2统计学分析分析判断抗原、抗体漏检和抗原、抗体多检出情况，采用直接计数法;分析各月份正反定型不符的例数是否与检测人数有关，采用χ2检验;分析 ABO亚型、不规则抗体等情况是否与性别、年龄、血型有相关性，将74例样本分为3个年龄组，分别是30岁以下组、30-39岁组和40岁以上组，进行Fisher分析。

2 结果

2.1正反定型不符的情况分布结果见表1。

从表1可以看出，有42例抗体漏检，其中38例是因为抗体弱凝集而导致反定型假阴性，但也有4例是強凝集而被判为阴性;反定型假阳性有6例，其中4例是因为缗钱导致机器判读困难。

正定型假阳性10例，即检出并不存在的ABO抗原;正定型假阴性2例，其中1例为强凝集。

ABO亚型常常既干扰正定型也干扰反定型，所以在表中单列出来。本研究共发现8例ABO亚型。

2.2 各月份检测人数与正反定型不符的例数

经卡方分析，不符合例数与检测人数之间没有显著差异性，没有相关性。

2.3正反定型不符情况与性别、血型、年龄的相关性

从表3可以看出，正反定型不符情况与性别、年龄无相关性，而与血型有强相关性（p<0.01）。

3 讨论

ABO正反定型不符可以从两方面分析，正定型有问题或反定型有问题。ABO亚型可能导致正定型、反定型都有问题。有时血清学难以判断结果，就需要进行ABO基因分型。

遇到ABO正反定型不符的样本，先进行盐水法试验，看一下正定型和反定型的凝集情况， 4摄氏度可以加强ABO抗原抗体的凝集。

机器判读ABO正反定型结果会有一定的错误率，这就要求实验人员严格遵守操作规程，正确处理血样，避免缗钱凝集干扰判读结果。对全血自动分析仪的准确率进行评价，定期校准设备，降低错误率。对机器初步判断为正反定型不符的血样，及时送交相关科室进行人工复核。

全自动血型分析仪主要由液体分配系统、离心机、孵育器、读数仪、清洗系统及控制系统等部分组成。使用前应对血型分析仪的主要参数进行评价并优化，关键参数分为固定参数与可优化参数，共有9个。固定参数是根据厂家推荐和其他实验室的使用情况而设置，包括孵育温度、标本红细胞浓度、试剂红细胞浓度、试剂加注量、稀释标本加注量以及仪器的判定参数。可优化参数包括孵育时间、标准抗A、抗B血清稀释倍数、标本血浆稀释倍数。在每种检测条件下的判读准确率应该在95%以上。影响结果准确率的原因可能有：反应时间过短，凝集不完全;忘记加样;微孔板内有异物;标准血清效价低，凝集不完全;血浆粘滞性较高，红细胞沉降不完全等。针对这些原因应该有相应的措施，来避免假阴性假阳性反应，提高血型检测准确率。

准确的血型检测结果是保证临床输血安全的基本前提。随着技术的发展与更新，全自动血型分析仪具有自动化、标准化、稳定化等优点，在部分大型血站实验室已经开展应用，但其多为开放式系统，设备厂商推荐的参数主要为设备自身的试验参数及判定参数，还需要每个科室自行摸索最佳的检测试剂参数。

参考文献

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作者简介：于江虹，1973年8月，女，汉，吉林省长春市，本科，副主任医师，输血研究。