黔南州规模猪场猪源性肠道菌群耐药性测定

李沛丽 龚才伟 犹银俊 董保豫 蒙炳超 朱仕炯 龙 潭

贵州省黔南州农业农村局，贵州都匀558000

国内非洲猪瘟疫情发生后，贵州省黔南州为恢复生猪产能、打造产业高质量发展路线、保障生猪供给，自2018年以来在全州范围内对猪源性细菌耐药性进行研究分析，以期指导地区生猪行业科学使用抗菌药[1-3]。

1 材料与方法

1.1 材 料

1）样品。贵州省黔南州服务区域内随机选取11个规模猪场，采集猪肛门拭子共232份。

2）药品。奥格门丁、头孢他啶、头孢噻呋、庆大霉素等24 种，大肠杆菌测定其中16 种，肠球菌测定其中17种（详见表2～3）。

3）培养基。麦康凯琼脂培养基、显色琼脂培养基、营养琼脂平板。

1.2 方 法

1）肠道大肠杆菌分离纯化。取典型菌落在显色琼脂培养基继续培养，取纯化后的菌落接种营养琼脂平板，37 ℃培养24 h。

2）肠道球菌分离纯化。取典型菌落在显色营养琼脂继续培养，取纯化后的菌落接种营养琼脂平板，37 ℃培养24 h。

3）鉴定。显微镜涂片镜检、商业成品生化鉴定试剂。

4）药敏试验。选择美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推荐的方法微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），庆大霉素采用高水平耐氨基糖苷类耐药判定标准[5-6]。

2 结果与分析

6 个县（市）11 个规模猪场232 份猪肛门拭子样品，分离到277 株菌落，其中大肠杆菌145 株，肠球菌132株详见表1。

表1 猪源性肠道菌菌落分离情况统计 个

1）大肠杆菌药敏试验。11 个场共分离到145株菌落，每场以分离到的大肠杆菌菌落MIC 值平均数为该场耐药性测定结果，结果为：大肠杆菌对庆大霉素、大观霉素、四环素敏感；对氨苄西林、氟苯尼考、磺胺异恶唑、复方新诺明、恩诺沙星、氧氟沙星、多西环素、金霉素中度敏感；对奥格门丁、头孢他啶、头孢噻呋、亚胺培南、粘菌素耐药。如表2所示。

表2 黔南州猪源性大肠杆菌药敏试验结果

2）肠球菌药敏试验。11 个场共分离到132 株菌落，每场以分离到的肠球菌菌落MIC 值平均数为该场耐药性测定结果。结果为：肠道球菌对青霉素、阿莫西林、头孢噻呋、头孢西丁、苯唑西林、复方新诺明、红霉素、克林霉素、替米考星、利奈唑胺敏感；对多西环素、氧氟沙星、磺胺异恶唑、氟苯尼考、金霉素中度敏感；对庆大霉素、万古霉素耐药。如表3所示。

表3 黔南州猪源性肠球菌药敏试验结果

3 讨 论

肠道菌属于共生菌，也有致病株，肠道菌的耐药性不仅阻遏肠道疾病的预防与治疗，还可以通过食物链将耐药性传递到人源肠道菌甚至是人身上，危害公共卫生安全[7]。近年养殖业结构升级，抗生素滥用情况普遍发生，耐药性情况复杂[8-9]，也有研究认为细菌的致病性与耐药性有一定的相关性[10]。

本研究结果显示，规模猪场中肠道菌群对挑选出来的常用药物耐药情况较为普遍。可以合理地猜测，服务区域内这些药物的使用史，而所挑选的药物中多数为广谱药，会对其他菌群、病毒乃至其他种类微生物也发生不同程度的耐药情况[11-13]。