肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值及有效发挥

顾秋花

【摘 要】目的：分析肺结核患者痰中结核分枝杆菌检验的临床价值以及临床应用。方法：将本所于2017年1月至2020年12月接收治疗的肺结核患者100例作为本次研究对象，分为观察组（活动性肺结核）和对照组（非活动性肺结核），对比分析两组患者结核分枝杆菌阳性率，并分析在改良罗氏培养方法、痰中分枝杆菌培养以及抗酸染色涂片培养三种检测方式下结核分枝杆菌阳性率。结果：相较于对照组，观察组结核分枝杆菌阳性率明显更低，对比统计学差异明显（P<0.05）；三组不同检验方式对比，改良罗氏培养方法以及抗酸染色涂片培养法检验出的结核分枝杆菌阳性率明显更低于痰中分枝杆菌培养法，对比统计学差异明显（P<0.05），改良罗氏培养方法以及抗酸染色涂片培养法之间结核分枝杆菌阳性率对比无明显差异（P>0.05）。结论：在肺结核患者的临床治疗中，利用痰中结核分枝杆菌检验将更有利于提高患者结核分枝杆菌阳性率，同时，活动性肺结核患者的结核分枝杆菌阳性率更高于非活动性肺结核患者，可见，痰中结核分枝杆菌培养对肺结核患者的早期检出和治疗有重要意义。

【关键词】肺结核；结核分枝杆菌；临床价值

肺结核主要发生于肺组织、器官等部位，属于乙类法定报告传染病，具有较高的发病率和死亡率。结核分枝杆菌主要经由空气传播，其能够在不同的环境下发生变异，而变异后其能够适应不同的外界环境，因此，加强对肺结核患者的检出率，提高对疾病传染的控制和治疗十分关键。痰中结核分枝杆菌检验是目前最有效的监测方式，监测时间较短，能够提高结核分枝杆菌的发现率，为临床医师对肺结核患者的诊治提供依据。改良罗氏培养方法以及抗酸染色涂片培养法也可用于结核分枝杆菌的检验，目前，三种检测方式在患者疾病检验中的有效性仍存在争议。对此，本次研究将本院收治的肺结核患者作为研究对象，分析结核分枝杆菌监测结果，旨在为临床医师提供可靠的诊治依据，详见下文所示。

1 资料和方法

1.1一般资料

将本所于2017年1月至2020年12月接收治疗的肺结核患者100例作为本次研究对象，分为观察组（活动性肺结核）和对照组（非活动性肺结核），其中观察组50例，男性27例，女性23例，年龄34岁～67岁，平均年龄（51.4±1.4）岁；对照组50例，男性30例，女性20例，年龄39岁～63岁，平均年龄（51.3±1.1）岁。所有患者均经由临床影像学、手术病理学检查确诊为肺结核者；取样前患者均知情研究；排除患有其他严重传染疾病者；排除精神异常、临床资料不完整者。两组患者年龄等资料对比无明显差异（P>0.05）。

1.2 方法

所有患者均于晨间取痰液，进行改良罗氏培养方法、痰中分枝杆菌培养以及抗酸染色涂片培养检测，检测方式如下。抗酸染色涂片制作：将取样痰液取适量放置在消毒完成后的玻璃片上涂片后进行抗酸染色，涂片时需注意将痰膜涂成厚薄均匀，使用荧光显微镜对检查结果进行观察。改良罗氏培养方法：将取样痰液取适量放置在罗氏培养基上接种，涂片时需注意将痰膜涂成厚薄均匀，可帮助提高阳性检出率，将其放置在37℃的恒温下培养4周～8周时间，利用显微镜对其检测结果进行判定。痰中分枝杆菌培养：将取样痰液先经由离心沉淀处理，将涂片内剩余的致病菌进行培养后，将酚红指示剂和氢氧化钠加入配置2mL菌液的无菌试管中，摇匀，37℃条件下进行水浴加热，时间控制为15min，随后加入硫酸，调和溶液至中性，随后进行离心沉淀，接种培养，进行涂片染色镜检。

1.3 观察指标

对比分析两组患者结核分枝杆菌阳性率，并分析在改良罗氏培养方法、痰中分枝杆菌培养以及抗酸染色涂片培养三种检测方式下结核分枝杆菌阳性率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 分析两组患者结核分枝杆菌阳性率

相较于对照组，观察组结核分枝杆菌阳性率明显更低，对比统计学差异明显（P<0.05），见表1。

2.2 三种检测方式下结核分枝杆菌阳性率

三组不同检验方式对比，改良罗氏培养方法以及抗酸染色涂片培养法检验出的结核分枝杆菌阳性率明显更低于痰中分枝杆菌培养法，对比统计学差异明显（P<0.05），改良罗氏培养方法以及抗酸染色涂片培养法之间结核分枝杆菌阳性率对比无明显差异（P>0.05），见表2。

3 讨论

一般情况下，健康群众在接触到带有结核分枝杆菌的飞沫、物体等物品时可导致自身发生感染，从而进一步发展成为肺结核病，但结核分枝杆菌是否感染和发病还取决于人体自身的免疫力以及吸入结核分枝杆菌的数量以及毒力大小等因素相关。部分患者由于感染结核分枝杆菌后免疫系统并不能有效对其进行清除和抑制细菌功效，导致细菌在人体内大量繁殖，引起肺部炎症，出现咳嗽、咳痰等症状，并逐渐发展成为活动性肺结核，具有一定的传染性[1]。肺活动性肺结核患者并无相关的临床症状和体征，多数情况下细菌检测均为阴性，通常经由影像学检查确诊。结核分枝杆菌是1882年由德国细菌学家发现并提出证明的人类结核病的病原菌，可侵犯人体的全身器官，但多引起肺结核疾病，是全球细菌感染性疾病致死的主要原因之一。结核分枝杆菌属于寄生菌，需要在人体的活细胞内寄生才能够生存下去，该种细菌可经由呼吸道进入肺泡，在肺泡中不断繁殖，在人体免疫力低下时发生病变。结核分枝杆菌属于放线菌目，分枝杆菌可分为分枝杆菌均属，包括人型、牛型、非洲型和鼠型四种。肺结核病致病菌约有90%以上的分枝杆菌均为人型结核分枝杆菌，较少部分患者为牛型以及非洲型分枝杆菌[2]。结核分枝杆菌多行性典型为细长稍弯曲、两端圆形的杆菌，痰液标本中结核分枝杆菌多呈现多形性。研究发现，结核分枝杆菌具有一定的抗酸性，其抗酸颜色呈红色，能够抵抗盐酸酒精的脱色作用。此外，结核分枝杆菌在细菌培养检测方法中普遍生长较为缓慢，在人体中具有较高的抵抗能力，干燥的结核杆菌1年～2年仍有毒性，但易被太阳直射或紫外线直接杀死。因此，目前如何提高结核分枝杆菌检测准确率，快速分型，并解决抗酸结核分枝杆菌的快速分离已经成为临床上关注的重點。

痰中分枝杆菌培养依据分枝杆菌对营养和代谢所需要的条件，能够营造出一个有利于分枝杆菌生长，而抑制其他细菌生长的环境，达到分离的目的。根据分枝杆菌培养基的不同，主要分为固体和液体培养，固体培养方法用固体培养基，酸性培养基，利用分枝杆菌有较厚的细胞壁，具有耐受酸或者碱等特征[3]。目前在国内目前主要用碱性消化液处理，因此检测所用培养基主要以酸性培养基为主，在将碱性消化液采取处理措施后可直接将消化液接种在酸性培养基上，利用酸性培养基帮助中和碱性标本处理液，分枝杆菌即可在酸性培养基内生长。液体培养基也需先进行处理，但主要用于自动化分枝杆菌的培养系统，通过仪器检测的是分枝杆菌生产过程中产生的化学信号等的变化，自动监测结果。但痰中分枝杆菌培养检测时间较长，接种后一般固体培养基要2周～4周出阳性报告，8周出阴性报告，而液体培养基1周～2周出阳性报告，6周出阴性报告，因此等待的时间较长[4]。此外，晨痰标本检验方式是目前临床上最主要的结核分枝杆菌检测方式，这主要是由于晨痰更容易获得，且不容易受到污染，在睡眠中人体的咳痰反射减弱，痰液在呼吸道内积累，清晨时更容易取出[5]。在以往的临床检验中多采用抗酸染色涂片培养法，该种方式操作简便，费用较低，在一定程度上减轻了患者的经济负担，但是由于抗酸染色涂片培养法在检测时，如同时出现多种菌落，该种检测方式只能显示数量最多的菌种，因此，该種检测方式具有一定的局限性，敏感性较低[6]。改良罗氏培养法是分离培养肺结核分枝杆菌常用的培养基，在培养完成后将其放置在显微镜下观察，能够给予细菌足够的营养成分，为其提供良好的氮源，以此提高结核分枝杆菌检出率[7]。在临床检验中，由于结核分枝杆菌属于抗酸性杆菌，因此其所需要营养要求更高，在有利的生长条件下生长也较为缓慢，使用改良罗氏培养法进行培养时不仅较为麻烦，同时所需的时间更长。改良罗氏培养法是将结核菌接种在改良的罗氏培养基上，结核菌能够对培养基中的天门冬酰胺进行选择性的消耗，利用高效液相色谱仪对培养基中的天门冬酰胺消耗量进行观察，如出现一定量消耗时则证明结核菌存在。

综上所述，在肺结核患者的临床治疗中，利用痰中结核分枝杆菌检验将更有利于提高患者结核分枝杆菌阳性率，同时，活动性肺结核患者的结核分枝杆菌阳性率更高于非活动性肺结核患者，可见，痰中结核分枝杆菌培养对肺结核患者的早期检出和治疗有重要意义。

参考文献

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[4] 赖惠英，齐志强，李燕明，等.两种分子生物学方法在结核分枝杆菌及其耐药基因检测中的比较分析[J].标记免疫分析与临床，2019，26（9）：1565-1569.

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