茶树品种峨眉问春和川茶2号新梢主要生化成分分析

谢文钢，陈 玮，谭礼强，杨 洋，唐 茜，*

(1.四川农业大学 园艺学院，四川 成都 611130； 2.贵阳学院 生物与环境工程学院，贵州 贵阳 550005； 3.四川一枝春茶业有限公司，四川 乐山 614501)

四川现有茶园面积约32万hm2，茶树良种化率为79.1%，但茶树主栽品种较单一，茶叶产品同质化现象较严重，缺乏品质特色和核心竞争力，部分茶产品存在苦涩味较重、鲜爽味不足、香气不高等问题。同时，群体品种茶园(20.9%)还存在低产低质低效等问题。宜宾市、乐山市和雅安市是四川省的三大产茶市，是“川茶工程”主要项目区和“三山一早”区域大品牌实施地。为实现茶叶产品的优质特色、功能化和多元化，助推四川茶产业的转型升级，上述三地的生产者对早生、优质品种的需求更加迫切。

针对四川省品种结构不合理、优质特色良种稀缺等问题，近年来，四川农业大学育种团队选育出特早生茶树品种峨眉问春(比福鼎大白茶发芽提早20～30 d)和优质茶树品种川茶2号，被四川省农业农村厅推荐为四川茶区的主推茶树品种，已在四川雅安、乐山、宜宾、泸州、广元、达州等茶区有一定面积的种植。但对这2个新品种品种特性的研究仅局限于进行品种选育的初步研究[1-2]，尚缺乏对这两个品种在省内不同主产区的主要生化成分的深入研究。为了解这2个品种在省内不同主产区的鲜叶产量及新梢生化特性，本文在宜宾翠屏区、雅安名山区及乐山沐川县的品比试验园进行试验，测试春夏梢芽叶性状及主要生化成分，旨在了解2个品种的产量和生化特性，为了进一步促进这两个品种在四川茶区的推广应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

材料：供试茶树品种峨眉问春(简称EM)和川茶2号(简称CC)，对照品种国家级良种福鼎大白茶(简称FD)。供试茶树和对照品种均为4年生的，分别种植于四川省宜宾市翠屏区川茶集团品比园(简称翠屏，CP)、乐山市沐川县一枝春茶业有限公司品比园(简称沐川，MC)、雅安市名山区国家茶树良种繁育场品比园(简称名山，MS)。供试茶园的地理与生态条件见表1。

表1 供试茶园的地理与生态条件比较

试剂：咖啡碱、没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、儿茶素没食子酸酯(CG)、天冬氨酸(Asp)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、茶氨酸(The)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、半胱氨酸(Cys)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、γ-氨基丁酸(g-ABA)、赖氨酸(Lys)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、脯氨酸(Pro)等购自美国Sigma公司；乙酸、乙腈、甲醇等(色谱纯)购自美国Thermo Fisher公司；氯化亚锡、茚三酮等(国产分析纯)购自国药集团。

仪器：UV-2300型紫外可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)；UV-1100型可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)；Agilent1200高效液相色谱-二极管阵列检测器(美国安捷伦公司)等。

1.2 试验方法

1.2.1 试验布置及芽叶性状观测

在翠屏、名山、沐川品比园布置试验小区面积为20 m2，采用随机排列的方式，设3次重复。种植方式为：大行距150 cm，小行距40 cm，株距20 cm，采取双行单株移栽，按常规栽培技术进行管理。观测供试和对照品种春梢的芽叶色泽、芽叶茸毛、一芽二叶、一芽三叶长度和百芽重及发芽密度。

1.2.2 样品制备及主要生化成分的测定

采摘供试和对照品种的春、夏梢的标准一芽二叶，通过微波固样制成生化样，待测。茶多酚含量及儿茶素组分测定参照国标GB/T 8313—2018《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测》进行[3]，游离氨基酸总量测定参照GB/T8314—2013《茶 游离氨基酸总量的测定》进行[4]，咖啡碱含量测定参照GB/T 8312—2013《茶 咖啡碱测定》进行[5]，水浸出物含量测定参照GB/T 8305—2013《茶 水浸出物测定》进行[6]，20种氨基酸组分参照Ning等[7]的液相色谱(HPLC)法进行测定。

酚氨比为茶多酚含量与游离氨基酸总量的比值[8]。氨基酸与滋味密切相关，是主要呈鲜味物质，主要包括3类：鲜味类(Asp、Glu和Gln)[9-11]、鲜爽类(Glu、Gln、Gly、Ala、Pro和The，可协同增强茶叶的鲜爽味)[9，12]和滋味相关类(Asp、Glu、Gln、Arg和The)[9]。儿茶素品质指数和儿茶素苦涩味指数参照文献[13-14]的方法测算。

1.3 数据统计分析

运用Excel 2010对试验数据进行整理，采用DPS 7.05软件进行统计分析，采用 Duncan多重比较法进行差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 芽叶性状分析

芽叶的大小、色泽、茸毛多少等茶树芽叶性状，直接决定芽叶物理特性和适制性[15-16]。由表2可知，翠屏、沐川和名山三地的峨眉问春春梢均表现为芽叶黄绿，茸毛中等；而川茶2号春梢为芽叶绿，茸毛中等。峨眉问春和川茶2号的一芽二叶长度及百芽重分别为5.15～6.43 cm、5.37～5.65 cm和37.40～38.84 g、34.28～36.53 g；其一芽三叶长度及其百芽重分别为7.35～7.75 cm、6.32～7.32 cm和54.10～64.62 g、48.84～59.78 g。从发芽密度来看，峨眉问春和川茶2号分别为822.83～1 114.33个·m-2、1 202.25～1 620.50 个·m-2。名山产区的峨眉问春一芽二叶长度和百芽重均显著(P<0.05)高于对照；峨眉问春一芽三叶和百芽重显著(P<0.05)高于对照；川茶2号一芽二、三叶长度和百芽重与对照在三地有些差异，但总体差异不显著。总体上看，一芽二、三叶长度和百芽重方面，峨眉问春新梢较长较重；川茶2号新梢的长度和质量与对照相当。发芽密度方面，川茶2号显著(P<0.05)高于峨眉问春和对照，峨眉问春与对照相当。

表2 不同地区各茶树品种春梢芽叶性状特征

2.2 主要生化成分分析

茶鲜叶生化成分含量是茶叶品种适制性的重要参考依据，决定了茶的先天质量[17-18]。水浸出物含量决定了茶叶内含成分的多寡[19]；茶多酚及儿茶素是茶叶呈苦涩味的主要物质，直接影响茶汤的浓醇度[20]；咖啡碱是茶叶中苦味物质的主要成分[21]。氨基酸是茶叶鲜爽味的主体呈味物质，可以降低茶的苦涩味[22]。酚氨比是茶树品种的适制性指标，反映茶叶滋味的浓度与鲜度的对比关系[8]。对翠屏、名山、沐川三地的2个品种春、夏梢主要生化成分进行分析。由表3可知，峨眉问春春、夏梢水浸出物含量为40.78%～46.82%，川茶2号为40.15%～48.12%。峨眉问春春梢高于对照0.28～1.27百分点，夏梢低于对照0.53～1.81百分点。川茶2号除了在沐川的夏梢低于对照外，其余均显著(P<0.05)高于对照1.94～7.25百分点。茶多酚含量，峨眉问春为19.48%～24.23%，均显著(P<0.05)高于对照0.80～1.32百分点；川茶2号为17.47%～21.88%，除翠屏的夏梢与对照差异不显著外，其余均显著(P<0.05)低于对照1.03～1.21百分点。游离氨基酸总量，峨眉问春为3.19%～5.42%，除翠屏的春梢与对照差异不显著外，均显著(P<0.05)低于对照0.24～0.52百分点。川茶2号为3.76%～7.09%，均显著(P<0.05)高于对照0.33～1.13百分点。产地间，名山>沐川>翠屏。咖啡碱含量，峨眉问春为3.38%～4.34%，除沐川的春夏梢显著低于对照外，均显著(P<0.05)高于对照；川茶2号为3.15%～4.11%，因不同地区而表现不同差异。沐川新梢均显著(P<0.05)低于对照，翠屏新梢与对照无显著差异，名山春、夏梢无显著差异。儿茶素含量，峨眉问春为14.89%～20.38%，除翠屏的春梢与对照差异不显著外，均显著(P<0.05)高于对照；川茶2号为12.17%～19.43%，均显著(P<0.05)低于对照。酚氨比，峨眉问春为3.60～7.50，显著(P<0.05)高于对照；川茶2号为2.46～5.55，显著(P<0.05)低于对照。三品种的春夏梢酚氨比均小于8。

表3 不同地区新梢主要生化成分分析

2.3 氨基酸组分

氨基酸有着协调茶汤滋味中的鲜、甜味和影响茶叶香气的作用[23]。从表4中可知，峨眉问春和川茶2号春梢20种氨基酸组分总量分别为26.68～45.19 mg·g-1和38.54～59.10 mg·g-1，其中茶氨酸(茶叶特征氨基酸)含量分别为16.04～28.26 mg·g-1和26.57～39.93 mg·g-1。20种氨基酸总量及茶氨酸含量大小顺序均为川茶2号>对照>峨眉问春，且三地品种间均差异显著(P<0.05)。产地间，名山>沐川>翠屏。由图1可知，春梢中特征氨基酸(茶氨酸)、滋味相关、鲜爽味氨基酸在20种氨基酸总量所占比例较高，鲜味类氨基酸较低。峨眉问春和川茶2号的鲜味类氨基酸含量分别为5.45～13.30 mg·g-1和6.65～13.64 mg·g-1，总体上川茶2号与对照接近，峨眉问春略低于对照，不同地区表现有差异；其滋味相关氨基酸含量分别为21.59～41.70 mg·g-1、20.00～38.65 mg·g-1；鲜爽味类氨基酸含量分别为34.98～55.89 mg·g-1、32.46～50.48 mg·g-1。滋味相关、鲜爽味类氨基酸含量大小顺序均为川茶2号>对照>峨眉问春，且三地品种间均差异显著(P<0.05)。

各处理间没有相同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。

表4 不同地区春梢20种主要氨基酸组分分析

2.4 儿茶素组分

儿茶素是茶叶中多酚类物质的主体成分，构成苦涩味的主体，包括酯型儿茶素和非酯型儿茶素，其中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是酯型儿茶素的核心组分[24]。由表5可知，三地的春梢儿茶素总量大小顺序均为峨眉问春>对照>川茶2号，且三地品种间均差异显著(P<0.05)。

表5 不同地区春梢儿茶素组分分析

峨眉问春和川茶2号的非酯型儿茶素含量分别为29.07～34.93 mg·g-1和20.64～30.02 mg·g-1，其酯型儿茶素含量为119.74～132.61 mg·g-1和101.16～118.68 mg·g-1，其EGCG含量分别为66.72～72.59 mg·g-1和75.58～83.72 mg·g-1。由图2可知，峨眉问春的非酯型儿茶素含量显著(P<0.05)高于对照，川茶2号除翠屏显著(P<0.05)高于对照外，其余均显著(P<0.05)低于对照；峨眉问春的酯型儿茶素含量除翠屏显著(P<0.05)低于对照外，其余均显著(P<0.05)高于对照，而川茶2号均显著(P<0.05)低于对照。峨眉问春和川茶2号儿茶素品质指数分别为620.47～745.49和912.20～1092.77，其儿茶素苦涩味指数分别为6.90～7.35和8.18～9.94。儿茶素品质指数大小顺序为川茶2号>对照>峨眉问春；儿茶素苦涩味指数大小顺序为对照>川茶2号>峨眉问春，且两个指数在三地品种间均存在显著差异(P<0.05)。

图2 各品种春梢的儿茶素构成、品质指数及苦味指数分析

3 结论与讨论

3.1 芽叶性状分析

茶叶生产季节性强，春梢所制名优茶产量仅占全年总产量的20%～30%，而产值可达全年总产值的60%～70%。芽叶性状与名优茶品质和适制性密切相关，可初步判断茶树的生产潜力和适应性[25]。峨眉问春春梢芽叶黄绿，茸毛中等，新梢较长较重，且发芽密度与对照相当。川茶2号春梢芽叶绿，茸毛中等，新梢大小适中，较重实，与对照相当，而发芽密度显著(P<0.05)高于对照，与黄亮等[1]研究结果一致。陈红旭等[2]研究发现，川茶2号在11个供试品种中发芽密度最高，且在发芽整齐度、机采产量及机鲜叶质量等方面明显优于其他品种，最适宜机采，川茶2号具有优质、高产、适宜机采等品种特性。

3.2 主要生化成分分析

峨眉问春春、夏梢的茶多酚、儿茶素和咖啡碱含量均显著高于对照，游离氨基酸总量均显著低于对照。水浸出物含量则春梢高于对照，夏梢低于对照，表现出季节间差异。川茶2号春、夏梢的水浸出物含量和游离氨基酸总量均显著高于对照，茶多酚和儿茶素含量均显著低于对照。咖啡碱含量因不同地区而表现不同差异。峨眉问春和川茶2号的春夏梢酚氨比均小于8，适制绿茶。三个产地间表现出一定的趋势。总体上，茶多酚及儿茶素含量：翠屏>沐川>名山；游离氨基酸总量及茶氨酸含量：名山>沐川>翠屏。综上可得，川茶2号游离氨基酸总量为5.45%～7.09%，为高氨基酸品种，且酚氨比低(2.46～5.55)，具有“高氨低酚”特性。

3.3 氨基酸组分与儿茶素组分分析

氨基酸是绿茶“鲜爽”滋味的主要呈味物质，可以降低茶的苦涩味，与茶叶香气密切相关。其中茶氨酸、滋味相关、鲜爽味氨基酸含量及比例较高，鲜味氨基酸较低。20种氨基酸总量、茶氨酸、滋味相关、鲜爽味氨基酸含量大小顺序均为川茶2号>对照>峨眉问春，且三地品种间均差异显著。川茶2号鲜味类氨基酸含量与对照相当，峨眉问春略低于对照，因不同地区而表现不同差异。综上，川茶2号鲜叶的茶氨酸、滋味相关、鲜爽味氨基酸含量较高，具有“鲜爽”的物质基础。

儿茶素是构成茶叶呈苦涩味的主体物质，其中EGCG与涩味呈对数关系[26]，同时儿茶素及其氧化产物是茶叶涩味的主要物质[27]。酯型儿茶素具有较强的苦涩味，收敛性强；非酯型儿茶素稍有涩味，收敛性弱，回味爽口[28-29]。儿茶素品质指数越大，绿茶品质相对越高[13]，而苦涩味产生的实质是复杂儿茶素增加和简单儿茶素降低[14]。总体上，川茶2号的非酯型、酯型及儿茶素总量均显著低于对照和峨眉问春，而儿茶素品质指数显著高于对照和峨眉问春，儿茶素苦涩味指数显著低于对照。峨眉问春的非酯型、酯型及儿茶素总量均显著高于对照，但儿茶素品质指数和儿茶素苦涩味指数均显著低于对照。表明川茶2号具有苦涩味物质含量较低，绿茶品质相对较高的特点。峨眉问春的苦涩味物质含量较低，绿茶品质相对较低。结合酚氨比、氨基酸组分及儿茶素组分可推论，川茶2号具有鲜爽、苦涩味轻的生化物质基础，所制绿茶品质优异，具有开发高档绿茶潜力。峨眉问春所制绿茶滋味鲜爽及浓醇不及对照。

综上所述，峨眉问春和川茶2号在翠屏、沐川、名山三地的新梢较重实且发芽密度较高，新梢的生化成分较丰富，均表现出高产潜力及较好的适应性。同时川茶2号作为高氨基酸品种(5.45%～7.09%)，具有“高氨低酚”特性和鲜爽、苦涩味轻的生化物质基础，具有开发高档名优绿茶潜力。川茶2号作为高氨基酸品种，具有高产、优质及适宜机采的特性，可在四川全省茶区推广。峨眉问春所制绿茶滋味鲜爽及浓醇不及对照。但其发芽特早，可通过加强其配套栽培技术研究，在宜宾、泸州等川南早茶产区进行适度推广。本试验仅分析了上述两个品种在三地的芽叶性状和主要生化成分，还需进一步研究产地生态气候条件、农艺措施、加工工艺等对茶叶产量及品质的影响。