对艾滋病治愈之路“举步维艰”的元凶

HIV是导致艾滋病的元凶，尽管高效抗逆转录病毒治疗（HAART）能有效地抑制病毒复制，延长患者的寿命，但因为HIV潜伏储存库的存在使得艾滋病无法治愈。HIV潜伏储存库隐藏在被感染细胞的基因组中，如果中断抗逆转录病毒治疗，HIV能够恢复快速复制从而导致艾滋病进展。有复制能力的HIV悄悄潜伏在细胞内，逃脱免疫系统监视，从而形成HIV潜伏储存库。如何准确检测HIV潜伏储存库，可为今后艾滋病治愈提供思路。以下是HIV潜伏储存库的检测方法特点的总结。

病毒生长试验（viral OUtqrowth assav，VOA）

20世纪90年代首次采用VOA检测HIV潜伏储存库，将静息CD4+T细胞稀释到每孔只有一个细胞后，激活细胞内病毒基因表达并诱导HIV-1从潜伏感染细胞中释放，得出有复制能力的潜伏感染细胞数。该方法价格昂贵、需要大量血液培养、需要在生物安全三级实验室进行2～3周的培养，且刺激一次不能激活所有的潜伏病毒，低估HIV潜伏储存库大小。

活化T细胞后检测HIVRNA试验

在T细胞激活情况下，通过qPCR检测整个HIV-1生命周期不同形式的RNA，以RNA为基础的检测缩短了细胞培养时间。但一轮刺激并不能激活所有T细胞产生HIV RNA，会在一定程度上低估HIV潜伏储存库大小。

PCR测定法检测HlVDNA潜伏储存库

基于PCR方法檢测HIV DNA成为更简便检测潜伏储存库的方法，并为VOA试验提供补充。这种方法简单快速。从qPCR检测HIV-l DNA确定携带HIVDNA数量，到数字PCR检测HIV-1 DNA进行HIV绝对定量，还有Alu-PCR检测整合HIV-1 DNA数量去评价HIV潜伏储存库大小。

由于PCR方法检测出的病毒97%存在缺陷，缺陷病毒不能产生具有传染性的HIV，且受到细胞毒性T细胞的积极监控。所以这种方法因为缺陷性病毒的扩增而被严重夸大。

治疗中断后反弹时间作为测量潜伏储存库的大小

中断治疗后病毒反弹时间反映了HIV潜伏储存库的大小，尽管观察治疗中断后病毒反弹时间是确定患者是否治愈的唯一方法，但是该方法作为检测潜伏储存库大小时，存在道德问题，如抗逆转录病毒治疗的中断或重新治疗会产生一定的耐药性。

完整前病毒DNA检测（nlact proviral DNA assay，IPDA）

PCR检测HIV潜伏储存库时被缺陷病毒严重夸大后，随后实验研究发现90%缺陷病毒的缺陷发生在包装信号（）和env区，通过数字PCR检测和env区识别出完整病毒与缺陷病毒。