我国非洲猪瘟疫情现状及防控措施

康亚男 刘 涛张小波柳 珊吴雅清 赵玉龙

（1瑞普 （保定）生物药业有限公司，河北保定 071000；2天津瑞普生物技术股份有限公司，天津 300308；3河北农业大学动物医学院，河北保定 071000；4廊坊市加一农业发展有限公司，河北廊坊 065000）

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性传染病，临床以高热、皮肤和内脏广泛性出血、神经症状、腹泻、死亡为主要特征，自2018年8月以来，我国境内非洲猪瘟疫情持续扩散蔓延，给养猪企业带来很大影响[1]。非洲猪瘟病毒目前共有24个基因型，除基因Ⅰ型和基因Ⅱ型外，其余基因型只出现在非洲大陆，我国流行的是非洲猪瘟病毒基因Ⅱ型、血清8群，与俄罗斯和东欧国家的流行毒株属于同一分支[2,3]。我国是生猪养殖和猪肉产品消费大国，生猪的养殖量和存栏量均占全球总量一半以上，猪肉消费占总肉类消费的60%以上[4]，非洲猪瘟疫情的发生，给我国的养猪业带来巨大的损失，在缺乏有效的ASF疫苗或治疗手段的情况下，如何控制和净化非洲猪瘟病毒，成为我国养猪业的重中之重。

1 非洲猪瘟病毒概述

非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种大型的、复杂的DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属的唯一成员，也是唯一由节肢动物（软蜱）传播的双链DNA病毒。该病毒是一个复杂的二十面体对称结构，包括许多同轴心结构，外部有六角形膜，病毒粒子平均直径约200 nm。ASFV的基因组与痘病毒相似，不同毒株基因组长度在170～190 kb之间，包含151～167个开放阅读框，病毒基因组包含约125 kb的保守中心区域和2个可变末端，即左侧可变区（38～47 kb）和右侧可变区（13～16 kb），编码5个多基因家族（MGFs），MGF片段的缺失和插入是病毒基因组大小变化的原因所在[5]。2018年Alejo等[6]通过ASFV蛋白质组学分析，鉴定出68种病毒蛋白；随后专家学者相继研究推测出3种核心多聚蛋白（pp220、pp62和p10）、7种内囊膜蛋白的功能和作用机制，构成ASFV粒子的主要外衣壳蛋白（或外囊膜蛋白）有p72、p54、p30、P12、CD2v等。其中p72、p54、p30、p12等蛋白具有良好的抗原性，病毒衣壳的p72蛋白具有高度的保守性主要作为血清学诊断靶标，但目前这些蛋白中尚未发现存在足够保护作用的蛋白[7]。ASFV耐低温，但对高温敏感，不同温度条件下存活时间不同，56℃可存活70 min，60℃可存活20 min，25～37℃可存活数周，在4℃条件下可以存活1年以上，在冷冻猪肉中可存活数年。对含氯消毒剂、含碘消毒剂、强碱类消毒剂和醛类消毒剂等敏感[8]。

2 我国非洲猪瘟疫情发生的现状

2.1 非洲猪瘟在我国的流行现状

随着生物安全防控水平的提升，进入2020年，非洲猪瘟疫情在我国猪场的发生率明显降低，但高发群体、高发区域、高发时间较2019年有了明显变化。据农业农村部数据显示，2020年中国动物疫病预防控制中心共计报告非洲猪瘟疫情19起，其中：家猪疫情18起，且16起与违规调运有关；野猪疫情1起，系2020年3月3日于湖北省神农架林区阳日镇、松柏镇发生，共发现死亡野猪7头（见表1）。

表1 2020年我国非洲猪瘟疫情汇总表

2.2 非洲猪瘟疫苗研发

2.2.1 非洲猪瘟疫苗研发进展

在以往的40多年里，科研人员对非洲猪瘟病毒的灭活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗、病毒活载体疫苗、减毒活疫苗以及基因缺失疫苗等进行了相关的研究。在非洲猪瘟疫苗研究中，发现体液免疫只能对生猪产生部分保护，起主要作用的是细胞免疫。Blome等[9]最近研究证实非洲猪瘟病毒的灭活疫苗辅以新型的佐剂在非洲猪瘟病毒攻毒的动物上不能产生免疫保护作用。弱毒疫苗可以诱导动物机体产生强烈且持久的免疫反应，使用无毒力自然弱毒的Ⅰ型非洲猪瘟病毒OUR T88/3分离株免疫猪只，结果猪只能够对该基因型下不同毒株的攻毒产生免疫作用，并且对非洲猪瘟病毒其他基因型的毒株感染产生交叉免疫作用。非洲猪瘟病毒的SP148R基因缺失型突变株是非洲猪瘟病毒疫苗的弱毒株疫苗，在猪只免疫攻毒后能够诱导动物机体产生高水平的保护力。也有研究报道通过敲除涉及ASFV复制、细胞转运或先天免疫应答的基因可以构建低毒力的基因缺失毒株疫苗，但疫苗候选株的有效性、安全性和不良反应尚待评估[10-12]。

2.2.2 我国对非洲猪瘟病毒基因缺失活疫苗的研究进展

2020年3月中国农业科学院哈尔滨兽医研究所自主研发的非洲猪瘟病毒基因缺失活疫苗（HLJ/18-7GD）获得农业农村部兽用生物制品临床试验批件，批准其在黑龙江、河南和新疆等地的3个养殖基地开展试验，截止2020年6月，非洲猪瘟疫苗环境释放试验顺利开展，免疫仔猪、免疫母猪及免疫母猪产仔情况正常，无疫苗毒排放，免疫仔猪生长状态良好，无不良症状、无明显病理变化，且安全性良好[13]。2020年9月非洲猪瘟病毒弱毒活疫苗（HLJ/18-7GD株）进入临床试验阶段。

2.2.3 非洲猪瘟病毒检测技术的研发

随着非洲猪瘟疫情在我国的点状散发，国内研究机构对非洲猪瘟病毒的检测方法手段进行了大量的研究，包括中国动物疫病预防控制中心进行的非洲猪瘟病毒国家核酸参考材料的建立与应用，建立了非洲猪瘟病毒B646L基因质粒标准物质；官方公布数据显示，截至2021年1月，获得新兽药证书的有2种非洲猪瘟病毒荧光PCR试剂盒和1个等温扩增试剂盒；获得兽药产品批准文号的有6种非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒，包括上述3项新兽药注册证书产品、3项直接核发兽药产品批准文号的改良型兽医诊断制品。

2020年12月14日国家标准化管理委员会正式发布新版《非洲猪瘟诊断技术》国家标准（GB/T 18648-2020）中，规定的实验室诊断技术有9种，即普通PCR法、荧光PCR法、荧光RAA法、高敏荧光免疫分析法、夹心ELISA抗原检测法、间接ELISA抗体检测法、阻断ELISA抗体检测法、夹心ELISA抗体检测法和间接免疫荧光法。

根据《高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法》农业农村部公布中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家动物疫病防控高级别生物安全实验室等8家ABSL-3实验室可以从事非洲猪瘟病毒的分离、鉴定、活病毒培养、动物接种试验等相关研究，非洲猪瘟病毒的神秘面纱随着研究的深入也将逐渐褪去，实验室研究将为我国非洲猪瘟疫情的防控提供有效的保障。

3 非洲猪瘟疫情的防控措施

3.1 生物安全防控

非洲猪瘟的防控措施主要包括以下4个方面：一是要求设立物理屏障（如养殖场隔离绿化带)，净化饲养场周围空气，预防飞禽、病虫害与场内物品接触；二是控制家猪循环中的安全隐患，包括污染的猪肉制品、泔水、污染的饲料用具、污染的饮水及设备、污染的人员工具等，做好猪场生产区的人员、物资、工具等的消毒工作；三是工作人员进出饲养场所应遵守严格的卫生管理制度，接受消毒浴、穿专业工作服；四是规定生猪运输车辆卸载后进行清洗、消毒，加强生猪调运管理，实施必要的隔离措施后才能混群饲养[14,15]。

3.2 加强疫情监测

农业农村部加快推进非洲猪瘟病毒疫苗的研制工作，同时持续强化非洲猪瘟的防控措施，进一步健全动物疫病监测预警体系，各地区的兽医、海关、出入境检疫检验及边防部门等协同工作，加强信息共享、抓好常态防控工作，及时发现及早处理。贯彻落实引种与种质资源管理，坚决不允许从高风险或风险不确定的区域引入种猪、冻精以及胚胎等生物材料。相关从业工作人员，应加强ASF相关知识及疫情应急处置培训，包括非洲猪瘟发病猪的临床症状、病猪的处置方式、防控策略、与古典猪瘟等疫病的鉴别诊断水平；提升面对ASF的处置能力和知识水平，进而更加有效地控制非洲猪瘟疫情的传播[16,17]。

3.3 药物预防策略

预防非洲猪瘟病毒的药物按来源分为天然药物、合成药物、生物技术药物3大类，其中天然药物又分为植物性药物、动物性药物、矿物性药物、抗生素4类。中国是植物性药物研究最古老、最传统的国家。2018年6月，王卓亚等[18]在解析非洲猪瘟病毒DNA聚合酶X的晶体机构基础上，开展了以DNA聚合酶X为靶点的计算机虚拟药物筛选项目，筛选出中国境内分布潜在的具有抑制非洲猪瘟病毒的海洋与陆生天然生物，其中大部分来源于海洋生物；植物性药物中对非洲猪瘟病毒直接起杀灭作用的有银蟾散、刺五加、双黄连、三黄抗菌保肝健脾方药物等。迂斌等[19]研发了抗非洲猪瘟病毒药物产品“康之源”，以刺五加、女贞子、越橘为主要成分，通过增强猪体的免疫力或双向免疫调节，解除免疫抑制，提高机体抗病毒能力。此外，江西一家兽药生产企业按照组方设计原则将银环蛇毒、蟾酥、斑蝥素、黄芪等12种中药材进行组方，该组方药物在切断ASF病毒的复制和传播能力上有着明显的效果。

4 小结

非洲猪瘟现已进入我国，常态化防疫、有效的快速诊断和构建严密的生物安全体系是目前疾病防控的有效手段。利用基因敲除技术获得的减毒活疫苗和弱毒活疫苗的研制正在进行中，其中，疫苗的安全性、毒力返强、不良反应、基因重组等问题是考核疫苗的重要因素。ASFV主要在髓系细胞中复制，如单核细胞/巨噬细胞和树状细胞等，开发适用于ASFV培养的细胞系也是亟待解决的问题，且ASFV基因组庞大，并存在免疫逃逸现象。当前，ASFV的感染与免疫机制、主要蛋白结构的功能、主要免疫原的识别与疫苗靶点是研究的热点。针对以上存在的问题我国现已启动ASFV专项研究，包含重大基础科学问题解决、各类疫苗研发、流行病学调研、高效专用消毒剂研制等。目前针对非洲猪瘟病毒的诊断，我国的国家标准化管理委员会发布了《非洲猪瘟诊断技术》（GB/T 18648-2020），为我国非洲猪瘟疫情的及时诊断及防控工作提供重要科技支撑，相信不久的将来非洲猪瘟病毒的科学有效防控乃至净化终会实现。