某院120例感染性患者微生物病原菌分布及耐药性分析

邢 飞， 杨春生， 金 跃， 万长标， 周 瑾， 钱玮和

淮安市第二人民医院(徐州医科大学附属淮安医院)1.检验科；2.皮肤科；3.彩超室，江苏 淮安 223002

微生物检验在合理、准确诊断感染性疾病方面发挥着重要作用，可为感染性疾病的诊治提供有利条件[1]。近年来，由于抗生素滥用，细菌耐药性增强，患者在治疗过程中极易出现多药耐药性，影响治疗效果[2-3]。因此临床应加强对检验科微生物病原菌及耐药性的分析，根据药敏试验结果合理选用药物，尽可能降低多药耐药性的发生率。本研究旨在分析淮安市第二人民医院2018年10月至2021年6月感染性患者微生物病原菌分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供依据。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究为前瞻性研究。随机选定我院检验科自2018年10月至2021年6月收集的120例感染性患者的微生物检验标本为研究对象。纳入标准：年龄≥18周岁；意识清醒、对答切题；病历资料齐全、完整。排除标准：合并严重营养不良、凝血功能障碍、贫血；处于哺乳及妊娠期女性；合并恶性肿瘤；合并帕金森、人格分裂症；近期存在重大创伤史、手术史；合并肺结核等疾病；中途从此项研究退出。其中，男性76例，女性44例；年龄20～74岁，平均年龄(47.62±5.44)岁；体质量52～96 kg，平均体质量(74.62±10.46)kg；疾病类型：急性支气管炎12例、慢性支气管炎30例、重症肺炎32例、肺脓肿4例、病毒性肝炎9例、急性扁桃体炎11例、新生儿衣原体感染22例；病程2 d至12年，平均病程(6.92±5.89)年。本研究经医学伦理委员会审批。患者均签署知情同意书。

1.2 研究方法 (1)细菌培养：所有标本均在肉汤琼脂平板上接种，在35℃的恒温培养箱中进行24 h细菌培养，阳性标本转接到血琼脂平板继续培养，培养、分离细菌应严格遵循《全国临床检验操作规程》标准完成，以细菌鉴定分析仪(型号：VITEK2 Compact；生产商：法国梅里埃公司)及配套试剂进行菌株鉴定。(2)药敏试验：采用K-B(纸片扩散法)进行药敏试验，质控菌株包括金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.3 统计学方法 采用SPSS 26.0统计学软件对数据进行处理。计数资料用例(百分率)表示，组间比较采用χ2检验或秩和检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 检验科微生物常见病原菌 120例感染性疾病患者分离出28株病原菌。其中，革兰阳性菌16株(57.14%)，包括金黄色葡萄球菌7株、溶血性葡萄球菌2株、肺炎链球菌2株、表皮葡萄球菌4株、粪肠球菌1株；革兰阴性菌10株(35.71%)，包括肺炎克雷伯菌3株、大肠埃希菌4株、鲍曼不动杆菌1株、铜绿假单胞菌1株、奇异变形杆菌1株；真菌2株(7.14%)，包括曲霉菌1株、白色假丝酵母菌1株。

2.2 主要革兰阳性菌耐药性 金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药性最高，为85.71%(6/7)。表皮葡萄球菌对红霉素、青霉素的耐药性较高，均为75.00%(3/4)。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌对万古霉素的耐药性为0。见表1。

表1 主要革兰阳性菌耐药性

2.3 主要革兰阴性菌耐药性 大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢噻吩的耐药性均较高，为75.00%(3/4)。肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、阿莫西林、头孢噻吩的耐药性均较高，为66.67%(2/3)。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对万古霉素的耐药性为0。见表2。

表2 主要革兰阴性菌耐药性

3 讨论

近年来，随着我国抗菌药物种类的不断增多以及广泛应用，抗菌药的耐药性日益增高，给患者的治疗效果造成了严重不良影响，一定程度上削弱了抗菌药物的治疗效果[4-5]。感染性疾病的患者在治疗过程中需要使用呼吸机、气管插管或气管切开，一定程度上削弱了机体的免疫功能，导致病原菌通过支气管进入，进而引发感染[6-7]。另外，医院本身即存在大量的致病菌，感染性患者免疫力、抵抗力均较差，就诊、治疗期间极易受到病原菌的侵袭而引发感染[8]。尽早明确检验科微生物的病原菌及耐药性，对临床治疗方案的制定具有重要的指导意义。

本研究结果显示，120例感染性疾病患者分离出28株病原菌，其中，革兰阳性菌占57.14%，革兰阴性菌占35.71%，真菌占7.14%，可知感染性疾病患者检验科病原菌以革兰阳性菌为主，其次是革兰阴性菌，最后是真菌，这与Cyril等[9]研究结果接近。

本研究结果还显示，革兰阳性菌是检验科微生物的主要病原菌；耐药性检查结果显示，金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药性为85.71%；表皮葡萄球菌对头孢噻吩的耐药性为75.00%，对头孢噻肟的耐药性为75.00%。革兰阳性菌患者初期使用青霉素，可取得理想的治疗效果，但随着用药时间的延长，细菌会产生青霉素酶，由质粒介导，降低青霉素水解的活性，进而出现了耐青霉素金黄色葡萄球菌[10-11]。临床为控制青霉素的耐药性，将耐酶半合成青霉素甲氧西林应用于感染性疾病治疗中，但又出现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA)[12]。MRSA的院内感染率较高，而且其耐药性也在不断增强，临床现已将万古霉素作为MRSA感染治疗的首选抗菌药物[13]。本研究结果虽提示革兰阳性菌、革兰阴性菌对万古霉素的耐药性为0，但临床在使用万古霉素时仍应谨慎、小心。

目前，我院革兰阴性菌的耐药情况也不容乐观。本研究结果显示，大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢噻吩的耐药性均较高，为75.00%；肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、阿莫西林、头孢噻吩的耐药性也较高，为66.67%。究其原因，可能与频繁更换药物、经验性用药、不规范应用抗菌药物、药物作用靶点改变、外膜通透性降低、生物膜形成等有着极为密切的联系[14-15]。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌是引发感染性疾病的常见革兰阴性菌，随着第3、4代头孢菌素的大量、长期、广泛应用，出现了超广谱β-内酰胺酶，进而导致革兰阴性菌对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性不断增强。建议临床医师根据细菌培养、药敏试验结果、患者具体情况、既往用药史等，合理选用抗生素，坚决杜绝经验性用药，减少滥开、错开抗菌药物，避免单一、长期应用同一种抗菌药物，强化医师规范使用抗菌药物的意识，加强检测病原菌，根据细菌培养、药敏试验结果，随时调整药物治疗方案，防止耐药程度加重、范围扩大，尽可能提高抗菌药物的治疗效果，降低患者治疗成本，节省医疗资源。

笔者结合实践经验，为进一步提高我院检验科微生物检验的质量，提出以下几点应对对策：(1)提高检验科工作人员的专业素质、技术水平，严格遵循无菌原则，规范具体的操作步骤，对无菌实验室进行定期消毒。(2)加强采集样本宣教，如对于尿液标本，应告知患者取晨尿的中段尿；对于痰液标本，应取肺最深部的痰液。(3)强化对检验科工作人员培训，规范的将标本送检，严格把控标本质量。(4)定期对检验科的检验仪器进行校准，避免由于仪器的因素而导致检验结果的误差。

本研究不足之处在于未对耐药菌株的耐药机制、产酶情况等进行深入的分析，具有一定的局限性，需要临床展开大量有关耐药菌株的耐药机制、产酶情况的研究。

综上所述，检验科微生物病原菌中革兰阳性菌以金黄色葡萄球、表皮葡萄球菌为主，对青霉素、头孢噻吩、头孢噻肟的耐药性较强；革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主，对头孢噻肟、头孢呋辛、阿莫西林、头孢噻吩的耐药性较强。临床应根据药敏试验结果，合理选用抗生素，尽可能控制感染症状。