蝴蝶兰组织培养关键技术探析

韩颖

摘要：蝴蝶兰具有“洋兰王后”的美称，其植株从叶腋中抽出长长的花梗，开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐。蝴蝶兰是通过组织培养技术繁殖培育的。若要蝴蝶兰长久延续发展，其组培快繁技术十分重要。组培苗能够保持母本性状，减少组培苗变异和具有植株整齐等特点。文章针对蝴蝶兰组织培养关键技术中外植体选择、培养基成分以及培養条件等进行探讨，以期提高蝴蝶兰组培苗的生产效益。

关键词：褐变;蝴蝶兰;外植体;组织培养

蝴蝶兰其花的结构和形态近似蛾蝶，属于兰科蝴蝶兰属。蝴蝶兰花型优美，且色彩艳丽，花期较长，是兰科蝴蝶兰属中一种极具观赏价值的花卉。蝴蝶兰为附生兰，喜欢温暖、遮荫且湿度大的环境。蝴蝶兰的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两种。目前，花卉市场上的蝴蝶兰的繁殖培育方式大多是通过组织培养技术进行的。因此，在繁殖培育中所采用的技术措施需要合理有效，并且是低成本，为了使育苗生产标准达到工厂化和规模化，需要保证蝴蝶兰组培苗保持母本性状、减少变异等，以提高生产效益。

1  外植体选择

蝴蝶兰外植体材料的选择非常重要，蝴蝶兰组织培养一般选用花梗芽为外植体。其优势在于取材和消毒方便，同时蝴蝶兰花梗芽的诱导率较高，是一种理想的外植体材料。合适的外植体能缩短诱导时间、减少变异率。蝴蝶兰组织培养苗可通过外植体诱导原球茎获得，也可以通过诱导丛生芽获得，通过丛生芽诱导途径技术可保持遗传稳定性，且难度较低，周期短，因此，丛生芽诱导途径更适用于工厂化生产。而原球茎诱导途径变异率高，且诱导时间长。但增殖系数较高、数量大。

花梗培养整个过程对母本的生长和花芽分化并不会造成影响，而且操作简便，可以依靠此方法进行培育难以诱导原球茎的蝴蝶兰品种，使用外植体材料易获得较多的不定芽为带腋芽的花梗节段。可见，花梗是蝴蝶兰组培快繁的最佳外植体。这是因为花梗诱导原球茎的效率高于其他外植体材料。

2  培养基成分

在蝴蝶兰品种、外植体材料和组织培养阶段，一般需要添加不同浓度的植物生长调节物质，但要以低无机盐浓度的MS培养基为基础。培养基成分中，植物激素添加的种类和浓度起到了至关重要的作用。在蝴蝶兰的工厂化生产中，决定原球茎发生诱导速度的主要是植物激素6-BA、NAA浓度，而椰子汁、香蕉泥和土豆泥等會明显影响对蝴蝶兰组培苗的一致性。

壮苗生根阶段直接影响到工厂化生产的种苗质量，为试管苗的移栽和成活奠定基础。在组培苗壮苗生根阶段，为了促进植物发根，培养基的生长素浓度通常需要提高，细胞分裂素浓度药下调。此外，培养基中添加多种天然添加物，对蝴蝶兰组培苗的生根壮苗有明显的促进作用，如椰子汁、香蕉汁、苹果汁等，移栽成活率也较高。

3  培养条件

在花梗诱导丛生芽过程中适宜的温度十分重要。温度较低腋芽转化为花芽有利，而温度较高则有利于腋芽转化为营养芽。此外，光照强度对蝴蝶兰试管苗生长影响也很大，蝴蝶兰幼苗对温度的要求比较高。光照过强会灼伤叶片，使叶片老化，甚至枯死，温度过低，会导致叶片变黄、脱落，甚至死亡。

4  植物组织培养褐变

褐变是因植物组织多酚氧化酶与其酚类底物结合，如不注意往往会因褐化而导致死亡。尤其是切取茎尖进行脱除病毒的步骤需要特别重视。在氧的作用下，植物组织多酚氧化酶与其酚类底物发生化学反应形成醒类物质。酉昆类物质会对植物材料造成毒害，因其是褐色物质，对植物体内酶的活性造成影响，严重时会导致材料死亡。

目前，常用的褐化抑制剂有两大类，即抗氧化剂和吸附剂。抗氧化剂主要有维生素、谷胱甘肽等，吸附剂主要包括活性炭、柠檬酸等。谷胱甘肽和柠檬酸抑制褐化的效果一般，但二者对植物生根以及丛生芽诱导影响较小。活性炭可以有效抑制蝴蝶兰褐化，因为它的吸附性极强。但是，培养基中添加活性炭有很多不利因素，也就是对蝴蝶兰组培苗生根和丛生芽的诱导都产生不利影响。但如果添加抑制剂，也能有效地抑制褐化情况发生。但需要按时更换培养基和及时切除材料的褐化部位。

5  病毒感染

建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒是主要的侵染病毒，可以导致植株生长不良，对蝴蝶兰叶片造成严重损伤，该病毒具有侵染性强、潜伏期长的特点。从外部表现看，受到病毒侵染后的蝴蝶兰观赏性会有很大程度的降低，其经济效益也同时降低。侵染病毒的原因主要是由操作不规范引起的，一般是造成交叉感染。因此，选取健康的蝴蝶兰植株外植体时，需要进行及时消毒，这是十分重要的，同时还有接触到的操作仪器和器具等都是如此。

6  结语

蝴蝶兰组织培养对外植体的培养条件是十分严格的，要高度重视褐化问题和病毒感染问题。规范化和标准化的工厂化育苗在蝴蝶兰组培苗的生产中是十分必要的。培育出高品质的优良幼苗，需要通过高投入高产出的经营模式来完成，只有如此才能取得规模经济的效果和良好的收益。

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