酶联免疫吸附试验与化学发光法在抗磷脂综合征患者检测中的应用价值

李宾堂，徐国超

(1.延津县人民医院 医学检验科，河南 新乡 453200；2.新乡市中心医院 检验科，河南 新乡 453000)

抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome，APS)属于异质性自身免疫性疾病，主要表现为反复发生静脉血栓、动脉血栓及妊娠期并发症等，其血清中抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies，aPLs)表现为持续阳性[1-2]。aPLs为磷脂、磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体，根据APS分类标准，APS患者至少需要存在狼疮抗凝物、抗心磷脂抗体(anti-cardiolipin antibody，aCL)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2-glycoprotein Ⅰ antibody，aβ2GPⅠ)中的一种呈阳性，其中aCL、aβ2GPⅠ属于疑似APS患者非标准抗体指标[3]。当前临床多通过采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测aCL、aβ2GPⅠ，但其耗时较长、操作繁琐、标准化程度差等，导致临床应用受限。近年来随着自动化技术的成熟，多种自动化检查方式逐渐被应用于临床检测中，如化学发光法(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，其通过磁性颗粒获取样本中的抗体，经处理后加入抗体示踪剂，经全自动生化分析仪处理获取抗体浓度[4]。本研究旨在探讨CLIA在APS患者检测中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年1月至2020年12月延津县人民医院收治的68例APS患者为观察组，再选取同期延津县人民医院73名健康体检者为对照组。本研究经医院医学伦理委员会审核通过。研究对象均签署知情同意书。对照组：女42例，男31例；年龄27～59岁，平均(43.08±5.54)岁；体质量指数18.7～26.8 kg·m-2，平均(22.53±1.48)kg·m-2。观察组：女39例，男29例；年龄28～57岁，平均(42.63±5.36)岁；体质量指数18.6～26.9 kg·m-2，平均(22.63±1.51)kg·m-2。两组性别、年龄、体质量指数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 选取标准(1)纳入标准：①观察组患者符合《抗磷脂抗体检测的临床应用专家共识》[5]诊断标准；②对照组体健。(2)排除标准：①合并重要器官功能障碍；②伴恶性肿瘤；③精神异常、认知障碍等无法配合研究；④伴其他免疫系统疾病。

1.3 检测方法采集所有入选者晨起空腹静脉血约3 mL，离心(转速3 000 r·min-1，时间10 min，半径8 cm)，分离血清，取上清液，置于-20 ℃冰箱内保存待测。分别采用ELISA、CLIA检测aCL和aβ2GPⅠ的免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G，IgG)。试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。所有操作均由高年资检验科医生严格按照试剂盒及仪器说明书进行。

1.4 阳性评估标准ELISA检查：aCL IgA≥12 U·mL-1或aCL IgG≥12 U·mL-1或aCL IgM≥12 U·mL-1即为阳性，aβ2GPⅠ IgA≥20 RU·mL-1或aβ2GPⅠ IgG≥20 RU·mL-1或aβ2GPⅠ IgM≥20 RU·mL-1即为阳性，任意一项为阳性即为阳性。CLIA检查：aCL IgA≥10 U·mL-1或aCL IgG≥10 U·mL-1或aCL IgM≥10 U·mL-1即为阳性，aβ2GPⅠ IgA≥20 RU·mL-1或aβ2GPⅠ IgG≥20 RU·mL-1或aβ2GPⅠ IgM≥20 RU·mL-1即为阳性，任意一项为阳性即为阳性。

2 结果

2.1 ELISA检测血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平观察组血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平均高于对照组(P<0.05)。见表1。

2.2 CLIA检测血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平观察组血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平均高于对照组(P<0.05)。见表2。

表1 ELISA检测两组血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平比较

表2 CLIA检测两组血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平比较

2.3 ELISA、CLIA的检测结果经ELISA检出64例阳性、77例阴性，经CLIA检出70例阳性、71例阴性。见表3。

2.4 ELISA、CLIA对APS的诊断效能CLIA诊断APS的灵敏度、准确度高于ELISA，漏诊率低于ELISA(P<0.05)；CLIA诊断APS的特异度、误诊率与ELISA比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表3 ELISA、CLIA的检测结果(n)

表4 ELISA、CLIA对APS的诊断效能比较(%)

3 讨论

APS缺乏特异性症状，早期诊断较困难，而明确诊断APS又是治疗的前提，故采用准确的方式对aCL、aβ2GPⅠ等实验室指标进行检测十分重要[6]。

aCL属于aPLs的一种，其与APS的关系比较密切，为诊断APS和评估病情程度的重要指标，可分为IgA、IgG、IgM共3个亚型，其中IgG与APS的关系更密切[7]。aβ2GPⅠ由肝细胞合成，为单链血浆糖蛋白，高滴度aβ2GPⅠ与APS患者的血栓形成、习惯性流产密切相关。aβ2GPⅠ不仅为诊断APS的辅助性指标，还是该病的自身靶抗原。研究证实aβ2GPⅠ相较于aCL具有较高的特异性，故通过检测aβ2GPⅠ水平有助于提高APS的准确度[8]。ELISA、CLIA均为检测aCL、aβ2GPⅠ水平的方式，但临床对于何种检查方式的效率更高仍存在一定争议。本研究结果显示，ELISA、CLIA检测观察组的血清aCL和aβ2GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平均高于对照组。进一步研究发现，CLIA诊断APS的灵敏度、准确度高于ELISA，漏诊率低于ELISA，特异度、误诊率与ELISA比较无明显差异。这表明采用CLIA诊断APS可提高灵敏度、准确度，降低漏诊率。CLIA操作简单，自动化程度高，可为诊断提供可靠的依据，有助于指导临床治疗。CLIA为全自动化技术，检查时间约为30 min，检查时间短，可减少操作者手工处理，避免了操作人员技术问题造成的检测偏差，同时自动化操作还能减少实验室内和室间的变异性，增加结果重复性，故具有较高的诊断价值[9]。

综上所述，CLIA和ELISA均可对APS患者进行诊断，但采用CLIA可提高诊断灵敏度、准确度，降低漏诊率，为临床治疗提供可靠依据。