液态混合型饲料添加剂 丁酸梭菌在肉鸡上的应用效果评价

刘珂飞，孟铁健，任 凯，高应瑞，王调调，刘淑惠，陈金艳

（天津生机集团股份有限公司中国 300384）

关键字：饲料添加剂；丁酸梭菌；肉鸡

丁酸梭菌( Clostridium butyricum) 又名酪酸菌，丁酸梭菌(Clostridium butyricum),属于芽孢杆菌科（Bacillaceae），梭菌属（Clostridium）[1]，有芽孢，革兰氏阳性菌，在老培养物中或可变为革兰氏阴性菌，是一种严格厌氧菌[2,3],是我国农业部于2009年7 月批准的新一代微生物饲料添加剂。研究表明，丁酸梭菌具有提供营养、促进代谢、维持动物肠道健康等作用，本试验通过在肉鸡饮水中添加丁酸梭菌来探讨其对肉鸡生长性能、消化率、免疫功能指标等的影响，以期为丁酸梭菌在动物生产中的应用提供依据。丁酸梭菌属于肠道益生菌，对于体内的致病菌有一定的抑制作用，同时可以促进益生菌的增殖[4]。该菌主要从奶酪、酸奶、动物和人的肠道以及土壤树叶等自然环境中分离提取[5]。

1 试验设计

1.1 试验目的

评价饲料添加剂制剂（肠益健）对肉鸡生产性能、免疫指标、肠道健康以及消化率的影响。

1.2 试验材料

试验品： 液态混合型饲料添加剂 丁酸梭菌 （肠益健） 500mL/瓶。天津生机集团股份有限公司生产

1.3 试验分组

实验选取20日龄鸡只，分为4组，试验分组如下：

注：1舍与2舍饲养条件相同，3舍与4舍饲养条件相同

2 试验方法

2.1 生长性能统计

在27日龄、36日龄，称鸡体重和耗料量，计算饲料转化率（FCR）。整个试验期间每天记录鸡只死亡状况。

2.2 粪便的检测

消化率的检测（表观利用率）

分别在27日龄、36日龄，每组试验鸡称取饲料以及各组粪便（50g），冷冻保存送样，检测消化率，进行以下指标检测；

钙：高锰酸钾法滴定法，参照GB/T 6436-2018 饲料中钙的测定；

磷：分光光度法，参照GB／T 6437-2018 饲料中总磷的测定；

粗蛋白：凯氏定氮法，参照GB/T 6432-2018 饲料中粗蛋白的测定

消化率（%）=100－100（b×c）/（a×d）

其中：a 为饲料中某养分的含量，c为饲料中内源指示剂法的含量，b为粪样中某养分的含量，d为粪样中酸内源指示剂法的含量。

2.3 免疫功能指标和肠道健康样品采集和制备

分别于试验的试验结束日期，从每个实验组选取3只接近平均体重鸡，翅静脉采血，分离血清，-20℃保存，用于测定免疫功能指标；

采用鸡特异性IgA、IgG、IgM ELISA试剂盒，测定肉鸡血清免疫功能。

2.4 肠道健康指标检测取样及检测方法

2.4.1 取样

分别于试验结束日期和出栏日期，从每个实验组选取3只，采用颈椎脱臼法处死肉鸡。

采集一小段十二指肠（U型弯曲处）用于十二指肠形态结构的分析；

采集盲肠食糜用于盲肠SCFA的测定。

2.4.2 十二指肠形态结构

取十二指肠组织2cm左右置于10%中性福尔马林固定液（100mL37%～40%甲醛原液，6.5g硫酸二氢钠，4g硫酸氢二钠，加蒸馏水至1000mL）中固定，测定肠黏膜形态结构。肠道样品采用酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、切成5um厚的切片，进行苏木精-伊红（HE）染色。每张切片在显微镜下随机选取5个视野，测定肠绒毛高度和隐窝深度，并计算每张切片绒毛高度和隐窝深度比值（V/C）。

2.4.3 盲肠食糜SCFA：盲肠食糜SCFA采用气相色谱法进行测定。首先将样品从冰箱取出解冻后称取0.5g左右的样品转入离心管内，加入蒸馏水按1∶10稀释，然后混合均匀，以10000rpm，4℃低温离心15min，取上清液分装于离心管中，作为SCFA测定的样品。参照Erwin等建立的SCFA测定方法进行测定。

3 结果

3.1 对肉鸡免疫功能的影响

表1 对血清中免疫指标的影响

检测结果表明：

使用7d后（27日龄）、使用16d后（36日龄）试验组数值高于对照组，尤其是IgM，基本试验组数值明显高于对照组；但是不同剂量组以及不同雏源试验组结果差异不显著。

3.2 十二指肠形态结构

表2 27日龄十二指肠绒毛和隐窝 检测结果

表3 36日龄十二指肠绒毛和隐窝 检测结果

检测结果表明：

27日龄以及36日龄检测数据表明：试验组与对照组相比，绒毛高度增加，上皮细胞也增加。肠道绒毛内含有血小板，有吸收养料的作用。肠隐窝增加由于肠表面积增加可促进小肠的吸收功能，隐窝深度降低，成熟度提高。

绒毛高度/隐窝深度比值提高：说明肠上皮细胞成熟率上升，吸收功能增强。

3.3 盲肠食糜SCFA检测结果

表4 盲肠食糜SCFA检测结果

检测结果表明：

27日龄，试验组与对照组相比，各短链脂肪酸含量均有提高，差异不显著；

36日龄，试验组与对照组相比，各短链脂肪酸含量均有提高，差异显著。

3.4 消化率的影响

表5 27日龄粪便中钙、磷、粗蛋白消化率检测

表6 36日龄粪便中钙、磷、粗蛋白消化率检测

检测结果表明：

27日龄，各试验组与对照组相比，钙、磷、粗蛋白消化率提高，差异不显著；

36日龄：各试验组与对照组相比，钙、磷、粗蛋白消化率均提高，差异显著。

3.5 生长性能

组别 数量（只） 36日龄出栏体重（Kg）成活率（%）1舍 20185 2.125 3.613 1.70 97.5 2舍 20050 2.017 3.530 1.75 96.8 3舍 20100 2.114 3.573 1.69 97.3 4舍 20168 2.107 3.645 1.73 96.5均耗料（Kg）饲料转化率（FCR）

试验结果显示：

液体丁酸梭菌（肠益健）在增重和料肉比上优于对照组，不同剂量组差异不显著，料肉比降低0.04-0.05，经济效益显著；

液体丁酸梭菌（肠益健）在成活率上优于对照组，不同剂量组差异不显著，可以明显降低发病率和死亡率。

4 小结

4.1 免疫球蛋白是机体抗感染的重要物质，主要存在于血清中，含有特异和非特异性抗体，具有抗菌、抗病毒、抗外毒素等多种功能。家禽体内含有3 种重要的免疫球蛋白( IgA、IgG 和IgM) ，本试验结果显示，与对照组相比，试验组添加丁酸梭菌改变了血清IgA、IgG 和IgM 含量，尤其是对IgG 的作用效果更为显著。

4.2 液体丁酸梭菌产品内含有丰富的有机酸，促进营养物质吸收，提高饲料中蛋白、钙、磷的消化率、降低料肉比，改善生产性能。

4.3 液体丁酸梭菌产品使用后可使肉鸡绒毛高度增加，促进饲料营养成分的吸收，可使肠隐窝增加，隐窝深度降低，成熟度提高，从而小肠表面积增加，可促进小肠的吸收功能。