不同杀菌剂对玉竹根腐病菌的室内抑制效果

李晓丽,温 健,沈宝宇,杨正书,孙文松

(辽宁省经济作物研究所,辽宁 辽阳 111000)

玉竹Polygonatumordoratum(Mill.)Druce 为百合科Liliaceae 黄精属Polygonatum多年生草本植物,以根茎入药,具有养阴润燥、生津止渴等功效[1]。随着玉竹食用、药用产品不断开发,销量与日俱增,种植规模逐渐扩大,辽宁抚顺清原、新宾,丹东宽甸等地大面积种植。近年来,高温多雨季节,排水不好,连作地块根腐病发生严重,为害根及根茎,使根茎腐烂,防治困难。据报道,在湖南、湖北等地玉竹根腐病发生严重[2～3]。毕武等系统研究了湖南地区玉竹根腐病的病原菌及其生物学特性[4]。曹亮等对湖南生产区玉竹根腐病防治进行了药剂筛选[5]。本课题组己分离鉴定了辽宁地区玉竹根腐病的病原菌,但针对该地区玉竹根腐病的防治还缺乏高效低毒的药剂,因此,本试验通过室内病原菌抑菌试验,筛选防治玉竹根腐病的适宜药剂,为玉竹根腐病田间防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1供试菌株来源 2019 年从抚顺市清原县采集具有玉竹根腐病典型症状的病株,经形态学和分子生物学鉴定为尖孢镰孢菌(FusariumOxysporumSchl)菌株,在辽宁省经济作物研究所实验室内低温保存、备用。

1.1.2供试药剂11 种 10 亿芽孢/克枯草芽孢杆菌WP(保定市科绿丰生化科技有限公司)、3 亿CFU/克哈茨木霉菌WP(美国拜沃股份有限公司,山东禾宜生物科技有限公司分装)、30%戊唑.嘧菌酯SC(天津市汉邦植物保护剂有限责任公司)、10%多抗霉素WP、30%苯醚甲环唑SC(青岛东生药业有限公司)、50%腐霉利WP(江西禾益化工股份有限公司)、72%霜脲.锰锌WP(浙江禾本科技有限公司)、50%多菌灵WP(江阴市农药二厂有限公司)、40%丙环唑EW(江苏剑牌农化股份有限公司)、60%唑醚.代森联WG、250g/l 吡唑醚菌酯EC (杭州宇龙化工有限公司) 。

1.2 方法

1.2.1杀菌剂对病原菌抑菌活性初筛 采用菌丝生长速率法,测定不同杀菌剂对玉竹根腐病菌丝生长的影响。参考药剂使用说明,各杀菌剂仅设1 个使用浓度(表1)。将各浓度待测杀菌剂按1 :9 将药液加入灭菌后冷却至约45 ℃的培养基中混匀制成含药平板。待培养基凝固后,取预先培养好的病原菌,在菌落边缘打取直径5 mm 的菌饼,菌丝面朝下置于各含药培养基平板中央,每皿一块,以加入等体积无菌水的PDA 平板为空白对照,每个处理3 次重复,置于25 ℃恒温培养箱内培养6 d,采用十字交叉法测量菌落直径。根据抑菌率公式计算抑菌率。抑菌率(%)=[(对照菌落直径-菌饼直径)-(处理菌落直径-菌饼直径)]/(对照菌落直径-菌饼直径)× 100

表1 不同杀菌剂使用浓度

1.2.2杀菌剂对病原菌的EC50测定 选择初筛中对病原菌有强抑制力的4 种杀菌剂进行EC50的测定。每种杀菌剂设5 个浓度处理,无菌水为对照。采用菌丝生长速率法,每个处理3 次重复。打取直径6 mm 菌饼置于各含药平板中央,于25 ℃恒温培养箱内培养6 d,采用十字交叉法测量菌落直径,根据抑菌率公式计算抑菌率,使用回归曲线方程求出每种杀菌剂对玉竹病原菌菌丝生长的抑制中浓度(EC50值) 。

1.2.3数据处理 利用 Excel 2003、DPS 9.50 软件进行处理和统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同杀菌剂对病原菌的抑菌效果

由表2 可见,11 种杀菌剂对菌丝生长均有不同程度的抑制作用。供试的11 种杀菌剂对病菌的抑菌率较对照差异显著,其中50%多菌灵WP、30%戊唑.嘧菌酯SC、10 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌WP 表现出较强的抑菌活性,抑菌率在90%以上,与40%丙环唑EW 处理无显著差异,显著高于其它7 个处理;其次,40%丙环唑EW 与30%苯醚甲环唑SC 抑菌率在80% 以上,它们之间无显著差异,显著高于其它6 个处理;再次为60%唑醚.代森联WG、250 g/L 吡唑醚菌脂EC、72%霜脲.锰锌WP 抑菌率在60% 以上;其它抑菌率在50%以下,抑菌率较低。

表2 不同杀菌剂对病原菌活性抑制率

2.2 不同杀菌剂对病原菌的EC50 测定

对抑菌效果较好的4 种杀菌剂进行 EC50测定。由表3 可见,不同杀菌剂的不同浓度对病菌的菌丝生长均有抑制作用,随着杀菌剂浓度的逐渐升高,抑菌率也逐渐升高。各供试药剂对玉竹根腐病病原菌的EC50存在一定差异,其中,30% 戊唑·嘧菌酯 SC EC50值最小,为1.3919 mg/L,毒力最强,抑菌效果最好;其次为40%丙环唑EW 和 50% 多菌灵WP,EC50分别为6.5140 和7.4077 mg/L,毒力较强;再次为10 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌WP,EC50为26.9483 mg/L,毒力相对较弱。

表3 不同杀菌剂对病原菌的毒力测定

3 讨论与结论

供试的11 种杀菌剂对玉竹根腐病病原菌都有一定的抑制作用,其中,30%戊唑·嘧菌酯SC、40%丙环唑EW、50%多菌灵WP、10 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌WP4 种药剂抑菌效果较好,抑菌率达88%以上。EC50测定结果表明,30% 戊唑·嘧菌酯SC EC50值最小,为1.3919 mg/L,毒力最强,抑菌效果最好;40%丙环唑EW和50%多菌灵WP 次之,EC50值分别为6.51、7.41 mg/L;10 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌WP 毒力相对较弱,EC50值为26.95 mg/L。

试验中30%戊唑·嘧菌酯SC 抑菌效果最好,在对根腐病防治中未见报道,可作为防治玉竹根腐病的新药试用。40%丙环唑EW 与50%多菌灵WP 对根腐病菌表现出较强的抑菌作用,与前人的研究结果一致[6～10]。枯草芽孢杆菌不但能产生多种抗菌物质抑制病原物的生长,而且能产生生长激素类物质促进植物生长[11],因此常用于生物防治。辛中尧等研究表明,枯草芽孢杆菌菌株对黄芪、当归根腐病不但有较好的防治效果,而且能提高其产量和品质[12]。钟嘉丽等研究了6 种生物制剂对人参根腐病菌的抑制效果,枯草芽孢杆菌的抑制作用最强[13]。高琳娜等报道,枯草芽孢杆菌防治板蓝根根腐病田间防效达72.97%,且增产[14]。Lee 等研究表明,枯草芽孢杆菌 B-4228 对人参根腐病菌有较好抑制作用[15],本试验中10 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌WP 也表现出较强的抑菌效果对玉竹产量和品质的影响有待于进一步田间试验进行研究。试验中30%苯醚甲环唑SC 也表现出较好的抑菌效果,可在生产中进一步验证。

本试验筛选出的4 种杀菌剂对玉竹根腐病尖孢镰孢菌均有较好的抑制效果,但不能完全代表田间药效的高低。此结果为田间药效试验提供了基础,这4 种药剂可作为玉竹根腐病田间防治药剂的参考用药。