莱菔头质量标准研究

◎ 阳文武，黄艳萍，向春燕，周 浓

（1.重庆市万州食品药品检验所，重庆 404000；2.重庆三峡学院 生物与食品工程学院，三峡库区道地药材绿色种植与深加工重庆市工程实验室，重庆 404120；3.重庆市黔江食品药品检验所，重庆 409000）

莱菔头为传统食药两用药，使用历史悠久，全国各地均有栽培，被收载于各地地方标准，来源于十字花科萝卜属植物萝卜（Raphanus sativusL.）开花结实后的老根，其新鲜根是大众喜爱的萝卜，具有行气消积、宣肺化痰、利水消肿等功效，用于治疗食积气滞、腹胀痞满、痢疾、咳嗽痰多、脚气以及水肿等[1-6]。莱菔头含黄酮、有机酸、维生素C以及氨基酸等化学成分[4]。目前，各类标准中莱菔头的质量控制指标尚无显微鉴别和成分含量测定等项目[4]，为此本试验采集7批不同产地莱菔头，考察其显微特征、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物以及总黄酮等指标，旨在确立莱菔头质量标准。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

岛津UV-2501紫外分光光度计；奥林巴斯BX53型显微镜；AB204S型万分之一天平；KH-2000DB超声波清洗器；ED53干燥箱；SDLA-B-1101型超纯水机；SX2-5-12电阻炉。

水为超纯水，其余试药为分析纯；芦丁对照品（批号：100080-201811，含量92.4%，中检院）。

试验所用莱菔头样品采集自重庆、湖北、河南、山东及安徽等地，均由重庆三峡学院周浓教授鉴定为萝卜（Raphanus sativusL.）开花结实后的老根。样品清洗后，切片，35 ℃烘干，粉碎过筛后备用。

1.2 方法

1.2.1 显微特征分析

取莱菔头粉末置于奥林巴斯BX53型显微镜下观察。

1.2.2 水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定

参照2020年版《中华人民共和国药典》四部方法对莱菔头的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定[7]。

1.2.3 总黄酮含量测定

（1）对照品贮备溶液的制备。取芦丁对照品精密称定21.43 mg，置于50 mL量瓶中，以70%乙醇溶解并定容至刻度，制成0.396 mg·mL-1的芦丁对照品贮备液。

（2）对照品溶液的制备。精密量取芦丁对照品贮备液0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL及0.8 mL，置于10 mL量瓶中，分别补加70%乙醇至4 mL，加入5%亚硝酸钠溶液0.4 mL，摇匀，静置6 min；再分别加入10%硝酸铝溶液0.4 mL，摇匀，静置6 min；最后分别加入4%氢氧化钠溶液4 mL，用水定容至刻度，摇匀，静置15 min。

（3）供试品溶液制备。精密称取莱菔头粉末（过三号筛）1.0 g，置于锥形瓶中，加70%乙醇30 mL，超声提取30 min，过滤，滤渣再重复提取1次，合并滤液，减压回收至干，以70%乙醇溶解并定容至10 mL量瓶中，摇匀，精密量取4.0 mL，照1.2.3（2）项的方法，自“加入5%亚硝酸钠溶液0.4 mL”起制备，即得。

（4）测定。以相应的试剂为空白，在510 nm的波长处测定各溶液的吸光度。

2 结果与分析

2.1 显微特征

莱菔头粉末为浅黄棕色，显微特征如图1所示。由图1可知，导管多为具缘纹孔导管，较大，纹孔较密。木纤维呈长条状或不规则长梭形，多弯曲，末端较尖，有的一端分枝，单斜纹孔或相交成十字形，稀疏。网纹细胞形状不规则，具网状纹孔，纹孔大，卵圆形或不规则形。

图1 莱菔头粉末显微特征图

2.2 水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物检测结果

由表1可知，7批莱菔头水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量范围分别为8.1%～11.1%、15.1%～19.0%、1.2%～3.4%和14.5%～19.8%。

表1 莱菔头中水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量表

2.3 总黄酮含量测定

2.3.1 标准曲线

取1.2.3（2）项下的各对照品溶液依法测定，以芦丁的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=10.351X+0.0218，r为0.999 8，芦丁的线性范围为0.001 98～0.031 68 mg·mL-1。

2.3.2 方法学考察

（1）精密度与重复性试验。取S6粉末约1 g，精密称定，按照1.2.3（3）项方法制备样品溶液，依法重复测定6次，得吸光度的平均值为0.155，RSD为0.05%，表明仪器精密度符合要求。精密称取S6粉末6份，每份约1 g，按照1.2.3（3）项方法制备供试品溶液，依法测定吸光度，计算，即得。结果显示总黄酮的平均含量为0.16%，RSD为1.6%，结果表明方法重复性良好。

（2）加样回收率试验。精密称取已知含量的莱菔头粉末6份，每份约0.5 g，分别精密加入浓度为0.396 mg·mL-1的芦丁对照品贮备液2.0 mL，按照1.2.3（3）项方法制备供试品溶液，依法测定吸光度，计算，即得，结果见表2。

表2 加样回收率试验结果表（n=6）

2.3.3 样品测定

按照1.2.3（3）项方法制备各供试品溶液，依法测定吸光度，计算，即得，结果见表3。7批莱菔头中总黄酮含量为0.13%～0.47%，平均含量为0.26%。

表3 莱菔头中总黄酮的含量表

3 结论与讨论

水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物是评价药材品质的重要指标。由结果可知，7批莱菔头水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量范围分别为8.1%～11.1%、15.1%～19.0%、1.2%～3.4%、14.5%～19.8%，大部分不符合《四川省中药材标准》2010年版标准中水分不得过9.0%，总灰分不得过18.5%，酸不溶性灰分不得过1.5%，浸出物不得少于18.0%的要求[4]，建议修订其限量值。

黄酮类化合物有多种药理作用，具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性，同时具有护肝，解肝毒，抗真菌，治疗急、慢性肝炎等功效。该试验测定了7批莱菔头中总黄酮含量，结果为0.13%～0.47%，平均含量为0.26%，这是首次对莱菔头中的总黄酮含量进行测定，对其质量控制有重要的意义。

本试验通过研究不同产地莱菔头，建议暂定莱菔头质量标准为水分不得过12.0%、总灰分不得过20.0%、酸不溶性灰分不得过4.0%、浸出物不得少于13.0%以及总黄酮以芦丁计不得少于0.10%。