一起养老机构人员感染诺如病毒情况调查分析

夏佳慧，张 静，姚 红

（上海市虹口区疾病预防控制中心 上海 200082）

诺如病毒为脊椎动物病毒嵌环样病毒科的一个属——诺如病毒属。诺如病毒的基因组为单股正链RNA,致病力极强，感染剂量低，10～100个病毒颗粒即可导致发病[1]。诺如病毒属病毒引起急性胃肠道感染，具有发病急、传播速度快、涉及范围广的特点。人群普遍易感，学龄前儿童、中青年、老年人等各年龄组均可发病[2-3]。2020年12月虹口区某养老机构发生多名老年人员发生呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状。疾控人员赶赴养老机构进行流行病学调查和处置工作，并采集人员肛拭样本及可疑环境污染样本送往疾控中心实验室进行实时荧光逆转录聚合酶链反应法检测病毒核酸。

1.资料与方法

1.1. 一般资料

选取2020年12月虹口区某养老机构人员肛拭样本92份；可疑环境污染样本14份。

1.2 方法

1.2.1试剂与仪器 试剂：诺如病毒Ⅰ型/Ⅱ型核酸检测试剂盒购自上海伯杰医疗科技有限公司；RNA核酸提取试剂盒为Roche MagNA Pure LC 2.0核酸提取仪配套商品化试剂盒；核酸提取仪器：Roche MagNA Pure LC 2.0；PCR扩展仪：宏石SLAN-96P。

1.2.2检测依据 诺如病毒《感染性腹泻诊断标准》WS271-2007。

1.2.3样本预处理 颠倒混匀并取500μL样本于1.5 mL离心管中，8 000 rpm/min 10 min离心，取上清液备用。

1.2.4样本总RNA提取 将准备好的上清液置于RNA抽提仪器中进行总RNA提取。

1.2.5 RT-PCR检测 取qRT—PCR反应液12μL、qRT—PCR酶混合液4μL、引物探针NVGI/NVGII 4μL,配制成20μL反应体系。加入已抽提的RNA 5μL，终体积为25μL。扩增程序为：逆转录50℃、10 min；预变性95℃ 5 min；95℃ 10 sec，55℃ 40 sec，循环末端采集荧光信号，40个循环。

1.3 评价指标

阴性Ct值＞38或未检出；阳性扩增曲线呈S型且Ct值≤35。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理，计数资料用频数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

2.1 环境样本结果

检测环境样本共14份，诺如病毒核酸均为阴性。

2.2 人员肛拭样本结果

检测人员肛拭样本共92份，阳性样本数59份，阳性率64.13%，均为诺如病毒GⅡ型。

2.3 养老机构工作人员样本情况

共计34份，年龄覆盖37～67岁，阳性样本数15份，阳性率44.12%。老年人群样本共计58份样本，年龄71～99岁，阳性样本数44份，阳性率75.86%。两种人群诺如病毒检测阳性率比较差异显著（χ2=9.38，P＜0.01），见表1。

表1 养老机构工作人员与老年人群诺如病毒检测阳性率比较

2.4 不同年龄分组进行检测阳性率比较

不同年龄分组进行检测阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同年龄组诺如病毒检测阳性率比较（例）

2.5 不同性别诺如病毒检测阳性率比较

肛拭92份样本中男性阳性8例、阳性率40.00%；女性样本阳性51例，阳性率70.83%，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 不同性别诺如病毒检测阳性率比较

2.6 对养老机构工作人员阳性患者进行跟踪检测，病程7 d时，检测阳性人数由原来的15人下降到5人，7 d持续阳性率33.33%；病程18 d时，阳性人数降至为0，18 d持续阳性率0%。对工作人员就不同年龄组在各病程时期检测阳性率进行统计，见图1。

图1 工作人员各年龄组跟踪检测统计

2.7 对老年人群阳性患者进行跟踪检测，病程14 d时，检测阳性人数由原来的44人下降至22人，14 d持续阳性率50.00%；病程28 d时，阳性人数降至为9人，28 d持续阳性率20.45%；病程＞40 d时，阳性人数1人，＞40 d持续阳性率2.27%。对老年人群就不同年龄组在各病程时期检测阳性率进行统计，见图2。

图2 老年人群各年龄组跟踪检测统计

3.讨论

此次事件中环境样本诺如病毒RT-PCR检测均为阴性，但是人员之间传播范围较广，推断这是一起由生活密切接触传播而引起的一起诺如病毒聚集性疫情。

根据样本检测结果反馈，男女不同性别对病毒感染存在统计学差异，考虑到养老机构中男、女老年人群数量相差较大，机构中工作人员尤其是护理人员绝大多数是女性，因此可能会引起在统计数据上的一定偏差。

通过统计发现养老机构中工作人员与老年人群在病毒检测阳性率上存在显著差异。因为都是在一定活动范围内的密切接触人群所以推导导致这一差异的原因可能是年龄差异问题。随即划分不同年龄组进行统计，确定具有统计学意义。70岁以上老年人群感染病毒人数明显增加。

对工作人员和老年人群划分不同年龄组对其病程长短进行跟踪检测观察其病毒消除时间。年龄在37～67岁的工作人员从发病到病程7 d，病毒检测阳性率由原来的44.12%下降到病程7 d持续阳性率33.33%，病程18 d时检测阳性率为0。其中30～40岁、41～50岁组在病程7 d时病毒检测阳性率已为0。51～60岁组和61～67岁组对应病程7 d持续阳性率14.29%和33.33%。病程18 d时，4组不同年龄组均为检测阳性率0。

71～99岁的老年人群在从发病到病程14 d，病毒检测阳性率由原来的75.86%下降到病程14 d持续阳性率50.00%，病程28持续阳性率为20.45%，病程＞40 d持续阳性率为2.27%。分别观察老年人群不同年龄组在病毒消除时间上的差异，发现70岁以上年龄组较其他年龄组病程时间长，病毒消除时间长。超过14 d病程的患者占相当大的比例。还有1例患者病程时间逾40 d仍可检出病毒阳性。

综上所述，老年人群因为机体自身免疫力下降，抵抗能力衰退更易被病毒感染而且病程时间较长，病毒消除时间较长。诺如病毒一旦感染在机体免疫力低下的情况下产生一系列呕吐、腹泻症状，有一定基础疾病的老年人群中感染率高，并偶尔发展为重症，甚至危及生命，极大损害身体健康[4]。随着老龄化社会的到来，养老机构队伍日益庞大，随之而来的就是应加大对机构环境卫生、护理人员健康意识、消毒知识的宣教和监督[5]。针对不同年龄层次人群感染前及感染后的防控可采用不同措施，除通用性措施如饭前便后用肥皂和清水洗手、生吃的水果蔬菜食用前洗净、食物煮熟等以外，以老年人群为主的养老机构当出现群体感染时应尽可能隔离治疗、患病期至康复后3 d内不要为他人准备食物或照料他人、尽量减少去人员密集场所活动；患病人员的衣物需进行必要的消毒处理。本文以期通过本次诺如病毒感染情况分析能够对养老机构在疾病防控意识上提高警惕并为防控提供有益探索。