血清CCL18与TM4SF1水平检测在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断中的价值研究

丁 洁，李阿利，李 静

（中国人民解放军联勤保障部队第九八七医院妇产科, 陕西宝鸡 721000）

卵巢癌(ovarian cancer)是妇科常见恶性肿瘤，其发病早期隐匿性强，与良性肿瘤临床表现相近，这给卵巢癌早期诊断带来困难，也使部分卵巢癌患者失去最佳治疗时机，影响患者预后[1-2]。血清标记物检测一直是卵巢癌早期筛查和诊断的重要依据，糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）和人附睾蛋白（human epididymal secretory protein 4，HE4）是目前诊断卵巢癌最为广泛的肿瘤标记物[3-4]，但近年来报道显示CA125 特异度低，HE4 存在假阳性率，且CA125，HE4 表达受年龄、月经状态等因素影响[5-6]，使诊断效能降低。趋化因子配体18（chemokine ligand 18，CCL18）是具有调节肿瘤浸润、转移等作用的小分子分泌蛋白[7]，四次跨膜蛋白1（transmembrane-4-L-six-family-member-1，TM4SF1） 则为TM4SF 家族成员，报道显示TM4SF1 参与乳腺癌、肺癌等多种恶性肿瘤癌变过程[8]。本研究收集84 例良恶性卵巢肿瘤患者临床资料，探讨血清CCL18 与TM4SF1 在卵巢癌鉴别诊断中的价值。报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2018年7月～2020年7月84例卵巢肿瘤患者作为研究对象，年龄18～65 岁，平均年龄46.27±16.51 岁；体重指数20.14±1.95kg/cm2。

纳入标准：①卵巢肿瘤均参照中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会推荐指南标准，经病理检查确诊[9]；②临床病例资料完整；③患者均对本研究内容知情同意，并签署知情同意书。

排除标准：①并发有子宫颈癌、乳腺癌等其他恶性肿瘤者；②既往已接受手术治疗、生物治疗者；③并发有泌尿系炎性疾病者。

1.2 仪器与试剂 CCL18 和TM4SF1 试剂盒均由上海百蕊生物科技有限公司提供，西门子ADVIA 2400 型全自动血液生化分析仪。

1.3 方法 在确诊后3 天内采集患者清晨空腹静脉血5ml，3 000r/min 离心10min，取上清液作为检测标本。采用酶联免疫吸附法检测血清CCL18 与血清TM4SF1 水平。操作方法按试剂盒说明进行。

1.3 统计学分析 选用SPSS 20.0 软件包对数据进行统计学分析，符合正态分布时，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较行t检验，计数资料以频数（频率）表示，组间比较行卡方检验，鉴别诊断价值采用受试者工作曲线（receiver operating characteristic，ROC）分析，结果以曲线下面积（area under curve，AUC）表示，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清CCL18 和TM4SF1 比较 见表1。84 例卵巢肿瘤患者中48 例为良性，36 例为恶性。良性肿瘤与恶性肿瘤患者血清CCL18，TM4SF1 水平比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。

表1 两组血清CCL18 和TM4SF1 比较（±s，ng/ml）

表1 两组血清CCL18 和TM4SF1 比较（±s，ng/ml）

指标良性肿瘤组（n=48）恶性肿瘤组（n=36）t 值P 值血清CCL1898.16±29.45162.07±35.239.050.00血清TM4SF1102.28±40.46 172.39±59.576.420.00

2.2 血清CCL18 和TM4SF1 鉴别诊断价值分析 见表2，图1。ROC 分析显示血清CCL18 和TM4SF1 联合预测概率判断卵巢恶性肿瘤的AUC 为0.85，显著高于血清CCL18 和TM4SF1 单项检测，差异有统计学意义（Z=-1.98，-2.19，P=0.03，0.01）。

表2 血清CCL18 和TM4SF1 鉴别诊断价值分析

图1 血清CCL18 和TM4SF1 鉴别诊断卵巢肿瘤的ROC 分析

3 讨论

目前，临床对卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断主要依靠细胞学病理活检，但该法为有创操作，重复性差，且活检具有一定假阴性结果，影响诊断效能。而血清肿瘤标记物检测重复性好，方法简便，在临床具有广阔应用前景[10]。对于卵巢癌患者，CA125 是最为常用的肿瘤标记物，但其特异度和敏感度均有限，HE4 是近年来新发现的卵巢肿瘤标记物，动物实验证实敲除HE4 基因后卵巢标准细胞株SKOV3 细胞的表皮生长因子受体磷酸化过程被阻断[11]，邢瑞青等[12]还发现HE4 较CA125 诊断卵巢癌的准确性显著提高。但也有报道显示CA125与HE4 诊断效能并无显著差异[13]。因而，单项检测在诊断价值方面难以获得显著优势。

TM4SF1 是四次跨膜蛋白家族的重要成员，报道显示TM4SF1 可通过抑制caspase-3 表达，促进肝癌发生发展[14]。PARK 等[15]的研究则发现TM4SF1 水平与血管内皮细胞生长因子和E-钙黏蛋白水平呈相关性，TM4SF1 可通过调控上述因子促进结肠癌肿瘤细胞增殖侵袭，加快肿瘤生长。YE等[16]还证实TM4SF1 可通过Akt/mTOR，DDRI 信号通路直接调控乳腺癌肿瘤侵袭。上述结果说明TM4SF1 可能是肿瘤进展重要的血清标记物。本研究也发现良恶性卵巢肿瘤患者血清TM4SF1 水平差异显著，提示TM4SF1 可能也参与卵巢肿瘤癌变。但目前有关其具体作用机制尚不明确，本研究进一步用ROC 分析发现TM4SF1 鉴别良恶性卵巢肿瘤的敏感度为0.72，提示TM4SF1 有助于卵巢恶性肿瘤的筛查。

CCL18 属炎性趋化性小分子分泌蛋白，CCL18可促进肿瘤细胞染色体改变，增强细胞增殖能力，加快肿瘤癌变。朱军义等[17]研究也说明CCL18 高表达可增强卵巢癌SKOV3 细胞侵袭能力。赵冰冰等[18]病理检测也发现卵巢癌组织CCL18 表达水平显著高于癌旁正常组织，这与本研究结果一致。高娜娜[19]报道证实CCL18 是卵巢癌三年生存率的独立高危因素。本研究显示卵巢良恶性肿瘤血清CCL18 水平存在显著差异，进一步分析发现血清CCL18 在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断中的敏感度达0.83，而特异度仅0.54，提示血清CCL18 单项检测有助于卵巢癌的早期诊断，但特异度有限。为此，本研究根据串联诊断原则，即同时满足阳性结果才判断为阳性，利用ROC 计算血清TM4SF1 与CCL18 联合预测概率判断卵巢恶性肿瘤的价值，结果显示血清TM4SF1 与血清CCL18 联合检测的预测概率判断卵巢癌的AUC 达0.85，特异度达0.81，提示血清TM4SF1 可弥补CCL18 不足，这可能是因血清TM4SF1 与CCL18 可从不同途径解释卵巢恶性肿瘤的形成机制，因而联合检测可达到互补效果，上述结果说明联合检测对鉴别良恶性肿瘤具有重要价值。

综上，血清TM4SF1 与CCL18 联合检测有助于卵巢良恶性肿瘤的临床鉴别，具有较高应用价值。