蟠桃胚培苗的移栽技术及影响因子研究

杜纪红 吴丹丹 苏明申 周慧娟 李雄伟 张夏南 叶正文

摘要 为探索影响胚培苗移栽成活率的因子，对蟠桃胚培苗的移栽苗龄、移栽基质、肥料、叶面喷施的药剂种类等进行研究。结果表明，苗龄10 d的幼苗移栽后成活率最高为86.7%，随着移栽时间的推迟，移栽苗的长势和成活率降低。阳光3号混合泥炭∶珍珠岩=2∶1、椰糠∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1、草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1这3种基质配比对胚培苗移栽后的株高、株粗和成活率影响不显著，均可作为胚培苗的移栽基质。移栽后浇灌花多多水溶肥能够显著提高株高、株粗及叶片叶绿素含量，壮苗效果明显。叶面喷施200 mg/L GA3（赤霉素）处理的幼苗株高是对照的2倍，但会降低叶片叶绿素含量; 200 mg/L IAA、 200 mg/L 6-BA、多效唑、尿素处理对幼苗生长的影响较小，因此叶面喷施GA3是促進幼苗生长的有效药剂。初步探索出一套高效实用的蟠桃挽救苗配套移栽技术。

关键词 胚培苗;苗龄;基质;肥料;药剂处理

中图分类号 S662.1  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2021）13-0048-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.13.013

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Study on Transplanting Techniques and Influencing Factors of Cuvette Plantlets of Flat Peach

DU Ji hong，WU Dan dan，SU Ming shen et al

（Forest and Fruit Tree Research Institute， Shanghai Academy of Agricultural Sciences， Shanghai 201403）

Abstract In order to explore the factors affecting the survival rate of in vitro seedlings， the seedling age， matrix， fertilizer and the kinds of medicines sprayed on the leaves of embryo rescued test tube seedlings of flat peach were discussed. The results showed that the highest survival rate was 86.7% after transplantation of seedlings aged 10 days. With the delay of transplanting time， the growth and survival rate of transplanted seedlings decreased.  Peat （containing vermiculite）： perlite = 2：1， coconut chaff： vermiculite： perlite = 1：1：1; peat： vermiculite： perlite=1∶1∶1，plant height， plant diameter and survival rate after transplantation of test tube seedlings had no significant difference， which could be used as the transplantation matrix of test tube seedlings. After transplanting， watering more water soluble fertilizer could significantly improve plant height， plant diameter and chlorophyll content of leaves， and the effect of strong seedlings was obvious.After spraying different reagents on the leaves， it was found that the plant height of the seedlings treated with GA3 （gibberellin） was twice as high as that of the control， but the chlorophyll content of the leaves decreased; IAA （auxin） inhibited the growth of the seedlings and even caused death; 6-BA （6 benzylaminopurine， cytokinin） treatment had no effect on the plant height， but could promote the germination of lateral branches of the seedlings;paclobutrazol treatment inhibited the growth of the seedlings;the content of chlorophyll in leaves was increased， but the effect on the growth of seedlings was slight. Therefore， spraying GA3 on the leaves was an effective drug to promote the growth of seedlings. Through the study， a set of efficient and practical transplanting techniques for rescuing flat peach seedlings were preliminarily explored.

Key words Plantlet;Seedling age;Stroma;Fertilizer;Medicament treatment

胚培苗的移栽和管理是胚挽救技术的关键环节之一，能否为育种工作提供种质资源和育种材料关键在于胚培苗能否在田间成活[1]。胚培苗由于长期在营养丰富、水分充足、弱光、恒温的环境下生长，其生理特性和组织结构与大气环境下生长的植株有很大区别，胚培苗叶片偏薄，栅栏组织稀薄，气孔发育不完善，根系活力低。在炼苗移栽过程中极易出现失水萎蔫的现象，导致移栽成活率低，只有提供适宜的外界条件，使其逐步适应环境变化，才能提高移栽成活率[2-5]。

胚培苗的移栽成活率除与幼苗的生长情况有关，还受到移栽时间、移栽基质、炼苗处理、壮苗处理等因素的影响。胚挽救苗出苗时正是秋冬季节，因此不能直接移栽到露地，应该先在基质中进行过渡，然后春天再在大田中定植。张满让等[6]研究表明，胚培苗在经过炼苗后移栽，且用多菌灵灌根，可使幼苗的成活率达到最高。胚培苗长势弱，通过喷施营养液，能够促进幼苗生长，增强抗病性。此外，要注意光、温度、湿度的管理，在移栽后及时采用遮光措施，及时浇水等。

早熟桃胚挽救苗在移栽后与中晚熟桃种子萌发后的幼苗相比往往表现出生长缓慢，植株细弱，立枯病发病严重的问题。立枯病往往造成15%～50%的死亡率，是影响移栽成活率的主要因素，降低立枯病最有效方法是促使幼苗快速生长，提高幼苗的健壮程度，促进根茎部提早木质化。笔者以胚培苗为材料，从移苗时间、基质配比、叶面喷施不同药剂、根部使用不同肥料等影响培育健壮胚培苗的主要因素进行研究，旨在确定胚挽救的关键技术，提高早熟蟠桃的育种效率，为加快选育综合品质优良的蟠桃新品种、满足市场需求、丰富我国蟠桃品种资源作出积极贡献。

1 材料与方法

1.1 试验材料

胚培苗为早熟蟠桃“沪蟠1号”和“沪油018” 杂交后代种子经过胚挽救技术获得的。春季进行常规性杂交授粉工作，果实七成熟采集果实在超净工作台上进行消毒接种，接种后的试管放置在-4 ℃条件下70 d（约10月），打破休眠后移至培养室中（温度20 ℃，白天/黑夜各12 h）进行培养，7 d后子叶变绿，14 d后基本上成苗。将正常幼苗从培养基中取出，洗净根部附着的培养基，栽入基质中，浇透水，进行保湿，移栽后将幼苗放在玻璃温室中培养。

1.2 试验设计 按照单因素试验设计，共设4个影响因子。

（1）不同移栽苗龄。从冷库取出的接种胚，在25  ℃条件下光照培养10 d（处理①）、15 d（处理②）、20 d（处理③）后分别进行移苗。移栽标准是幼苗上部发育正常，茎部正常伸长，根系多于5条，根系发育正常。调查移栽当天幼苗的根量、根长及叶片数量及株高。90 d后调查株高、株粗、移栽成活率及叶片叶绿素含量。

（2）不同基质配比。将幼苗移栽到3种基质中：A阳光3号混合泥炭（含20% 蛭石）∶珍珠岩=2∶1（换算后的实际比为草炭∶蛭石∶珍珠岩=4∶1∶2.5）; B椰糠∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1;C草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1。草炭为维特0-10型号，珍珠岩为大粒类型。移栽90 d后调查株高、叶片数、根长及根量。

（3）不同肥料。处理①：使用花多多系列水溶肥（高氮），800倍稀释后浇透基质，直至渗出;处理②：使用荷格伦特营养液（常规配方），浇透基质，直至渗出;处理③：使用爱贝施（APEXR）控释肥，按5%的体积施入基质表面;缓苗移栽成活后30 d使用上述肥料，处理①和处理②每隔7 d左右施一次。

（4）不同叶面药剂处理。幼苗移栽成活30 d后分别喷施水（对照）、IAA（200 mg/L）、 6-BA（200 mg/L）、GA3（200 mg/L）、尿素（0.2%）、多效唑（200 mg/L）。多效唑喷施1次，其余处理各喷施2次，中间间隔10 d。每次喷施直至有溶液沿叶片滴落。移栽90 d后调查株高、株粗、移栽成活率及叶片叶绿素含量。

以上每个处理均为15棵，5棵作为一组，3次重复。移栽90 d后调查株高、株粗、移栽成活率及叶片叶绿素含量。

1.3 调查方法及分析 移栽的成活率=（成活苗数/移栽数）×100% （成活苗数是指移栽30 d后调查，正常生长的苗数）;采用直尺测定根茎到植株顶部的距离即为株高，游标卡尺测定根茎部的直径粗度即为株粗。叶绿素的测定使用SPAD- 502 Plus-叶绿素测定仪，每棵树测定顶部向下第3～6片葉子的叶绿素值，9次重复。数据整理和作图使用Excel软件，显著性分析使用SPSS软件。

2 结果与分析

2.1 移栽苗龄对移栽苗成活率与幼苗生长的影响

从表1可以看出，幼苗移栽时，随着苗龄的延长，幼苗的各个指标均呈上升趋势，其中3个处理的株高、根量2个指标差异均达显著水平，处理②和处理③的株高是处理①的1.37倍和178倍，根量是1.40倍和1.88倍。叶片数处理①和③之间差异显著，处理②与处理①和处理③之间差异均不显著。处理③的根长显著长于②与①，处理①和②的根长差异不显著。

由表2可知，移栽后90 d的株高、株粗、叶绿素和成活率随着苗龄的上升呈下降趋势，处理①、②、③的株高分别是33.67、31.53、31.44 cm，差异未达显著水平。处理①、②、③的株粗分别是0.34、0.32、0.26 cm，处理③与处理①、②差异显著。处理①、②、③的成活率分别是86.7%、73.3%、600%，处理③与处理①差异显著，处理②与两者差异均不显著。叶绿素含量以处理①最高为47.60，与其余2个处理差异显著。说明移栽越早越好，10～15 d是比较合适的移栽时间。移栽越早，植株生长越快，茎粗越粗。早期幼苗根虽然短，但活力较晚移栽幼苗强，适应性强，成活率高，生长速度快。

2.2 不同基质对移栽苗成活率与幼苗生长的影响 从表3可以看出，3种基质对幼苗的株高、株粗和移栽成活率的影响差异均不显著，但C处理的幼苗叶绿素含量显著低于A、B处理。从省力的方面考虑，A处理使用2种基质混合更方便，从省钱角度考虑，椰糠价格是草炭的1/2左右。

2.3 不同肥料对幼苗生长的影响 从表4可以得出，花多多水溶肥对幼苗生长的促进效果最为明显，株高和株粗均显著高于缓释肥和营养液处理。3个处理对幼苗移栽成活率影响差异较小。叶绿素含量表现为缓释肥>花多多水溶肥>常规营养液>对照。说明幼苗浇灌花多多水溶肥后幼苗根系吸收快，生长快，有壮苗效果，是最佳的选择。

2.4 不同药剂喷施处理对幼苗生长的影响 从表5可以看出，叶面喷施不同药剂后发现， 200 mg/L GA3（赤霉素）处理的幼苗株高是对照的2倍，但叶片叶绿素含量降低; 200 mg/L IAA（生长素）抑制幼苗的生长甚至造成死亡; 200 mg/L 6-BA处理对株高无影响，但能促进幼苗侧枝的萌发;多效唑处理抑制幼苗的生长;尿素可提高叶片的叶绿素含量，但对幼苗的生长影响较小，因此叶面喷施GA3是促进幼苗生长的有效药剂。

3 讨论

3.1 移栽苗龄对幼苗生长的影响

在移栽过程中发现，移栽苗龄对移栽成活率、移栽苗的生长有重要影响。在对梨胚培苗移栽时发现，移栽苗龄对胚培苗的移栽成活有显著影响[7]。7月移栽的成活率显著高于4月和11月。树莓组培苗苗龄在 14 d 左右，若再延长苗龄，移栽成活率下降，该研究也发现移栽越晚，成活率下降[8]。胚培苗根系早期短，活力高，移栽后很快生出毛细根，苗龄过大的胚培苗根系长，数量多，全部盘曲在试管底部，移栽过程中清洗根系周围的琼脂时容易受到伤害，且移栽到基质中根系不够舒展，与基质的接触不够充分，造成缓苗期延长，成活率降低。因此，只要种胚已经萌发成苗，应尽早将苗移栽，减少移栽过程对根系的伤害，使得幼苗尽早适应外界环境，不仅能够提高移栽成活率，还能够增强移栽后幼苗长势。

3.2 不同基质对移栽苗成活与生长的影响

移栽是保证胚培苗成活的关键，适宜的基质对幼苗至关重要。路凤珍等[9]对葡萄挽救苗进行移栽和驯化时，珍珠岩∶蛭石∶河沙=1∶1∶1 作为基质的移栽成活率最高。关海春等[10]在对早熟黄桃胚培苗移栽时，园土+珍珠岩+蛭石的成活率最高，达95.7%，植株的长势也最好。桃树怕涝，基质必须通透性好，珍珠岩透水性好，但容易上浮，蛭石保湿效果好，利于幼苗根系生长。该试验中，不同的移栽基质对移栽苗成活率与幼苗生长情况的影响不明显，3种基质均可以作为移苗基质来使用。移栽初期应选择透水性好的基质组合，幼苗较大移栽换盆时，由于气温升高，需水量高，可以换成保湿性更好的基质组合，减少珍珠岩比例，增加蛭石和草炭比例。

3.3 不同肥料对幼苗生长的影响

早熟桃杂交胚子叶本来就营养不良，移栽后与晚熟桃杂交苗相比会出现长势弱，生长慢，更容易受到白粉病、茎枯病等的侵染，所以移栽后需要对幼苗进行施肥，促进幼苗生长，增强苗的抗病性。李敏等[11]通过对迭迭香叶面喷施花多多、尿素、磷酸二氢钾，发现花多多对迭迭香茎粗和鲜重的促进效果均最好。蒋晓梅等[12]对桃苗施用缓释性肥，可以提高叶片中叶绿素含量和净光合速率，促进桃苗生长，为桃树的整个生长过程提供比较稳定的养分供应。在春石斛组培苗和朱顶红幼苗的研究中均发现花多多具有促进幼苗生长的作用[13-14]。

该试验中对照不用肥料后幼苗叶片发黄，生长缓慢，使用普通营养液后幼苗叶色变绿，但生长仍较慢，常规营养配方也不适合桃幼苗，缓释性肥料作用甚微，其因为幼苗移栽生长的时间为冬季，环境气温低，肥料分解慢，根系吸收见效慢，第二年3月气温升高时观察发现缓释型肥料对育苗具有明显的促进作用;花多多水溶肥对幼苗的促进效果最明显，株高显著高于其他处理。因此蟠桃胚培苗移栽后使用水溶性肥料花多多是见效快、促进幼苗生长比较好的肥料。

3.4 不同药剂喷施处理对幼苗生长的影响

蟠桃胚培苗移栽时间一般是10—11月，在温室中培养至翌年4月移栽到大田，在移栽后（11—2月）随着冬季温度降低，日照时间的减少，幼苗出现顶端生长点死亡植株生长停滞的现象，这是二次休眠的现象。设施桃研究中发现GA3、6-BA对打破休眠均有一定作用[15-16]。张桂芬等[17]对香椿喷施GA3，能够显著提高幼苗株高，对根生长有抑制作用。刘一灵等[18]对烟草幼苗生长的研究中，发现 6-BA能够促进幼苗叶绿素的积累，对胚根生长有抑制作用，对幼苗下胚轴生长有促进效应。6-BA 主要的生理功能是促进细胞分裂，诱导组织分化;而IAA 影响细胞分裂、细胞伸长和细胞分化。张福平等[19]研究 20 mg/L IAA对种子幼根伸长、紫罗勒种子及幼苗鲜重增加等早期萌发有明显影响。郭延平等[20]发现，在猕猴桃胚培苗的接种培养基中添加多效唑能达到矮化效果。不同浓度多效唑处理能够增加紫穗槐幼苗叶绿素含量[21]。

该试验对移栽30 d的幼苗进行不同激素处理，60 d后调查发现，GA3能够显著增加幼苗的株高和株粗，具有打破休眠、促进顶端继续生长的作用;IAA的促进作用不明显，导致

部分幼苗死亡，可能浓度过高导致;多效唑能够控制幼苗长势，增加叶片中叶绿素含量，有矮化效果;尿素和6-BA 对幼苗株高、株粗和叶绿素含量都有一定的促进作用;6-BA促进侧枝的形成，验证了高浓度细胞分裂素能够促进根系生长的理论[22]。抑制幼苗生长的主要原因是幼苗进入休眠期。胚培苗移栽后通过喷施GA3打破休眠，促进幼苗的生长，促进根茎部位及早木质化，提高抗性和移栽時的株高。综合考虑，GA3对幼苗生长的促进效果最佳。

经过试验研究确定移苗及壮苗技术：移苗最佳苗龄是10 d;基质选择椰糠∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1较好;苗期使用800倍稀释花多多高氮水溶肥，7～14 d使用一次，当幼苗进入二次休眠时，使用GA3（200 mg/L） 连续喷2次，间隔7～10 d，可以有效打破休眠促进生长。

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