302例经腹绒毛活检后染色体联合基因芯片检查的产前诊断价值分析

黎洛冰 梁西岚 潘锦梅 唐玉芬 陈小乐

(1.茂名市妇幼保健院 产前诊断中心，广东 茂名 525000；2. 茂名市妇幼保健院 遗传优生优育中心，广东 茂名 525000)

目前，脐静脉穿刺和羊膜腔穿刺是孕中期或孕晚期孕妇产前诊断的主要手段，一旦发现异常，只能终止妊娠，容易引起多种并发症，对孕妇的心理创伤也比较大[1]。因此，应重视孕早期的产前筛查及产前诊断，研究发现，孕早期进行绒毛活检可以提前部分出生缺陷胎儿的产前诊断时间，提高产前诊断质量[2]。因此，本文将进行大样本的经腹绒毛活检的产前诊断价值分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 茂名市妇幼保健院2018年1月至2020年12月具备经腹绒毛活检的早孕期孕妇302例。其中，初产妇185例，经产妇117例；年龄22～38岁，平均(30.22±6.32)岁；孕周11～13+6周。纳入标准：①所有孕妇均为单胎妊娠；②具有绒毛活检的指征；③自愿接受绒毛活检术。 排除标准：①有双胎妊娠者；②不能完成绒毛活检者；③不能配合行相关检测者。

1.2 检查方法

1.2.1 经腹绒毛活检术 穿刺前，孕妇排空膀胱，取仰卧位，消毒铺巾，超声监测，测量头臀径，以及胎心、羊水量、胎盘厚度等，核实孕周，明确胎盘位置和穿刺路径。使用局麻药进行局部麻醉，在超声的引导下进行穿刺，使用引导套针，经腹部和子宫进行绒毛活检，拔出针芯，将活检针通过引导套管针送到胎盘组织，与20ml注射器连接，使用负压吸取绒毛组织，抽吸1～2次，最终获取10mg左右的绒毛组织，穿刺总次数小于2次，将获得的绒毛组织放入离心管。冲洗挑选绒毛后剪碎，移进无菌管中，经胰酶消化后接种到培养瓶中，培养，收获制片，使用G显带，常规分析计数。另取部分绒毛组织外送广东省妇幼保健院，进行染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)。

1.3 观察指标 ①观察经腹绒毛活检术的穿刺时间、穿刺孕周以及手术成功率和胎儿丢失率；②记录绒毛染色体联合基因芯片检查的结果。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件，对定性资料采用率表述，并使用χ2检验进行比较，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 302例经腹绒毛活检结果和安全性分析 302例经腹绒毛活检组均穿刺成功，手术成功率 100%。术后对302例绒毛活检术孕妇进行追踪，其中1 例术后 1 周流产，产前诊断结果为18-三体综合征，考虑为先天缺陷导致的流产。胎儿丢失率为 0.33%(1/302)。 其余301例孕妇均未出现不适，未发生胎儿丢失等。

2.2 302例经腹绒毛活检产前诊断的指征及染色体阳性结果分析 57例为超声检查异常，其中绒毛染色体异常有16例，产前诊断指征为超声异常的染色体异常阳性率最高28.07%(16/57)。其他的因高龄妊娠、夫妻双方地中海贫血、早孕期血清学筛查高风险、夫妻染色体异常等而进行了绒毛活检，均出现了不同类型的染色体异常。而所有绒毛活检病例中，产前诊断指征为夫妻双方地中海贫血占比最高61.92%(187/302)，共检出重型地中海贫血51例，重型地中海贫血胎儿均行引产，见表1。

表1 早孕期绒毛活检指征情况、染色体异常情况(n=302)

2.3 302例经腹绒毛活检染色体检查和基因芯片检查结果 302例孕妇均行绒毛染色体，全部培养成功。共检出染色体异常21例，异常率为6.95%(21/302)，其中18-三体6例、21-三体4例；微缺失微重复4例，其他异常1例，均引产。嵌合体5例，其中2例因超声异常，引产。其余3例嵌合体复查羊水染色体核型未见异常，继续妊娠。平衡易位1例，母系来源，选择继续妊娠。

2.4 超声异常者行基因芯片检测结果分析 对超声异常者，同时行绒毛染色体核型分析及基因芯片，结果发现，对于10例非整倍体(21、18-三体)染色体核型分析与染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)检出情况具有一致性。1例颈项透明层厚度(nuchal translucency，NT)增厚病例，染色体核型提示嵌合体，而基因芯片未见异常。另外4例超声异常者，染色体核型结果未见异常，而基因芯片结果检测出致病性拷贝数变异(copy number variations，CNVs)。见表2。

3 讨论

孕早期经腹绒毛活检术是通过腹壁和子宫，抽取胎盘绒毛组织进行产前诊断的一种方法，是一种有创但诊断准确性较高的方法[3]。研究认为，绒毛是由滋养层和胚外中胚层组织构成，与胎儿同源，通过检测绒毛的情况，可以准确反映胎儿的实际情况，与传统的羊膜腔穿刺、脐静脉穿刺比较，具有更明显的优势，且可以在早期即进行产前诊断[4]。

本文进行了302例大样本的经腹绒毛活检，手术成功率达100%，仅1例出现术后1周流产，证实了该活检术是安全可靠的。然而，仍需要注意的是绒毛活检术的过程中可能发生取样误差和胎盘间绒毛污染。在进行经腹绒毛活检过程中，可能存在绒毛污染或取样误差的情况，因此，需联合STR基因分析鉴定，排除母体污染[5]。对于早孕期孕妇超声检查提示异常者，应尽早行绒毛活检。目前，关于胎儿出生缺陷的产前诊断一直是临床较为关注的热点。近年来，CMA技术逐渐被应用于产前胎儿超声异常的遗传学诊断。CMA能够检测出>lkb的CNVs，可将核型正常的超声异常胎儿的染色体异常检出率提高8%～16%[6]。本研究显示，57例超声异常者共检出染色体异常16例，异常率为28.07%，其中以非整倍体异常为主。对于10例非整倍体(21、18-三体)染色体核型分析与CMA检出情况具有一致性。但对于对染色体微缺失或微重复，CMA的检出率明显高于染色体核型分析。本研究中4例超声异常者，染色体核型结果未见异常，而基因芯片结果检测出致病性CNVs。

16例超声检查异者多为NT的增厚，研究认为，随着NT的增厚，胎儿染色体异常及结构畸形的概率也在逐渐上升。研究发现，当超声下胎儿的 NT在3.5～4.4mm之间时，进一步行染色体检测发生其异常的概率是 21.1%，对于该类型胎儿，即使核型正常，也有 10% 的胎儿会出现结构异常[7]。也有学者认为，当超声下胎儿NT≥6.5mm，胎儿染色体异常的概率为64.5%，此类胎儿中，即使核型正常，也有约 46.2% 的胎儿发生结构异常[8]。在本研究的病例中，NT增厚3.3～5.5mm不等，在进行绒毛活检后证实有染色体异常。因此，对于超声提示NT异常者，产科医生均应建议孕妇行绒毛活检。

地中海贫血是南方地区比较常见的一种遗传性疾病，具有一定的致残率[9]。在本研究的302例绒毛穿刺病例中，夫妻双方地中海贫血指征占比61.92%(187/302)，染色体异常检出率为2(1.07%)，因此，本研究认为，对于夫妻双方都是地中海贫血者，可以成为早孕绒毛活检的重要指征。研究表明，重型α-地中海贫血，容易发生死胎和水肿胎，出生不能存活[10]。而对于重型β-地中海贫血胎儿，在出后早期就会出现慢性重度贫血的症状，给家庭和患儿带来严重痛苦，增加经济负担。因此，对此类孕妇应早期进行准确诊断，并采取引产措施，对于减轻孕妇中晚孕引产痛苦有着极其重要的意义[11]。

研究认为，在绒毛穿刺病例中，染色体嵌合体的发生率约为2%，较羊水细胞嵌合体的概率高，这可能是因为羊水穿刺的细胞来自胎儿[12]。而绒毛组织来自胚外组织，绒毛实际属于胎盘组织，与胎儿来源相同，但若在早期出现先天性三倍体“自救”或有丝分裂错误，可能导致胎盘与胎儿染色体不相符[13]。若异常的细胞仅限于胎盘，而胎儿正常，则称为限制性胎盘嵌合体，此时假阳性的发生概率将大于假阴性[14]。 在本研究中嵌合体5例，其中2例因超声异常，直接引产。其余3例嵌合体复查羊水染色体核型未见异常，继续妊娠。目前，在产前诊断中，嵌合体及表型异常的正常结果仍是产前诊断的难点，临床医生应结合超声结果、羊水染色体结果综合分析[15]。

综上所述，对具备经腹绒毛活检的早孕期孕妇，应行经腹绒毛活检，可以早期诊断胎儿异常并指导终止妊娠，该技术是一项安全可靠的技术。