孟琦 姜坤 李玉清 夏宝东 周成祥
摘 要:方正银鲫(Carassius auratus gibelio)是黑龙江省重要的养殖对象,具有多种优良的养殖特性。2020年 5月 10 日至6月7日,在黑龙江省巴彦县呈祥良种繁育基地开展了方正银鲫人工繁殖试验,通过注射不同剂量的催产剂对比试验,发现每kg雌亲鱼注射的剂量为马来酸地欧酮(DOM)2mg、促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)4μg,雄亲鱼剂量减半,为最优注射剂量。
关键词:方正银鲫;人工繁育;试验
中图分类号:S961.2文献标志码:A
方正银鲫(Carassius auratus gibelio)具备着典型的雌核发育[1]的特性,具体体现为卵子与母本的染色体组型完全相同,雌核发育的发育方式需要精子的激活,但是精子只起到激活的作用,并没有发生雌、雄原核的融合或配子结合。方正银鲫是典型的底栖鱼类,属杂食性。方正银鲫标准长度为体高的1.9~2.4倍,肋骨较长,体型较小,体态匀称,体型为侧扁形。头部较小,为端位口。眼位于头侧上方,较小,鱼体体侧为深银灰色,背部、背鳍和臀鳍颜色较深,为黑灰色。
方正银鲫是黑龙江省重要的淡水养殖品种,具有多种优良的养殖品质。其生长速率快,繁殖速率高,易于饲养,养殖难度低,具有较强的抗病力,对溶氧要求低等。方正银鲫的养殖具有良好的经济效益,具有良好的发展前景。为了熟化方正银鲫的人工繁育技术,掌握方正银鲫的人工孵化过程中所需要的知识与技能,将理论与实际结合,2020年 5月 10 日至6月7日,在巴彦县呈祥良种繁育基地开展了方正银鲫人工繁殖试验,通过注射不同剂量的催产剂,讨论不同剂量的催产剂对方正银鲫产卵量、卵粒质量和鱼苗孵化率的影响。
方正银鲫具备着典型的雌核发育的特性,具体体现为卵子与母本的染色体组型完全相同,雌核发育的发育方式需要精子的激活,但是精子只起到激活的作用,并没有发生雌、雄原核的融合或配子结合。方正银鲫是典型的底栖鱼类,属杂食性。方正银鲫标准长度为体高的1.9~2.4倍,肋骨较长,体型较小,体态匀称,体型为侧扁形。头部较小,为端位口。眼位于头侧上方,较小,鱼体体侧为深银灰色,背部、背鳍和臀鳍颜色较深,为黑灰色。
1 材料与方法
1.1 前期准备工作
1.1.1 亲鱼选择
研究用鱼体长20cm~25cm,鱼体体重400g左右。亲鱼选择体质强健,鳞片完整,个体大,体型标准,年龄适宜的无病个体。
完全成熟的雌鱼,腹部膨大、柔软,而且有弹性,生殖孔红肿[2]、外凸,将鱼尾朝上提起时,下垂的卵巢轮廓明显,轻轻挤压腹部即有卵粒外流;成熟的雄鱼生殖孔周围较软,轻压腹部精液即可流出。
1.1.2 用具及药品
试验用具:台秤、干毛巾、盆、注射器、生理盐水、孵化网片、增氧泵、光学显微镜、温度计、秤、托盘天平、筛绢网。
药品:马来酸地欧酮(DOM)、促黄体素释放激素A2(LRH-A2)。
1.1.3 产前培育
亲鱼放在室外养殖池中并泼洒菌霉净10d之后,将亲鱼转移到室内养殖池中,雌雄亲鱼分开养殖。每天换水量为总水量的1/3,同时,进行流水养殖,刺激亲鱼性成熟。通过注射激素诱导银鲫产卵,激素为马来酸地欧酮(DOM)和促黄体素释放激素 A2(LRH-A2)的混合物,注射部位为背鳍基部,根据亲鱼鱼体的实际大小,分两次注射,第一次注总剂量的1/4,第二次注射余量,两次注射间隔约10hrs。
第一组:在21℃~24 ℃的水温下,每kg体重雌亲鱼注射的剂量为马来酸地欧酮(DOM)1mg、促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)5μg,雄亲鱼剂量减半。
第二组:在21℃~24 ℃的水温下,每kg体重雌亲鱼注射的剂量为马来酸地欧酮(DOM)2mg、促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)4μg,雄亲鱼剂量减半。
第三组:在21℃~24 ℃的水温下,每kg体重雌亲鱼注射的剂量为马来酸地欧酮(DOM)3mg、促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)3μg,雄亲鱼剂量减半。
1.2 人工采卵受精
1.2.1 精液、卵子采集
采集精液前先将亲鱼体表擦干,保持双手及鱼体都无水分,将鱼腹部向下,生殖孔对准干烧杯,一手握住尾柄,一手托住头部,两手同时用力,轻轻挤压腹部,即有精液流出[3]。在精液中加入约等量的生理盐水,放在泡沫盒中冷存。挤卵要沿着一定的弧度,手用力一定要均匀,特别是最后1~2次,挤卵要特别留心,避免伤害鱼体挤伤内脏,避免将死卵和血等一起挤入采卵盆中。
1.2.2 卵子的激活和等滲液洗卵
在采集完卵子过后,立即向采卵盆中滴加3~5滴精液,激活卵子。在滴加精液后,立刻用生理盐水洗卵。
1.2.3 受精卵的孵化
在清理好的孵化池中摆放好孵化网片,网片摆放呈三角状立在孵化池中。将受精卵均匀的泼洒在孵化槽上,泼洒过程要轻柔,泼洒密度均匀。保证水温、供氧情况、换水次数、换水量、换水时间、光照等条件。每天测量水温4次,保证水温恒定。定时观察胚胎发育[4]状况,按时计算卵子的受精卵、孵化率和出苗率。
2 结果与分析
2.1 亲鱼产卵情况
第一组亲鱼产卵情况:亲鱼性成熟时间不统一,卵粒比较饱满。第二组亲鱼产卵情况:亲鱼性成熟完全,成熟时间统一;卵粒非常饱满,卵粒分明;产卵量大,少见死卵。第三组亲鱼产卵情况:亲鱼均性成熟,采卵过程中部分亲鱼出现过熟现象,出现死卵。
各池亲鱼产卵情况见表1。
2.2 受精卵发育情况
通过观察胚胎发育情况,对受精卵孵化过程进行严格管理。
2.3 受精卵孵化结果及分析
受精卵孵化结果见表2。
3号孵化池中卵破膜数量稍多于1号孵化池;2号孵化池中卵破膜数量最多。由此可以看出,在不同剂量的激素诱导下,每kg体重雌亲鱼注射的剂量为马来酸地欧酮(DOM)2mg、促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)4μg,雄亲鱼剂量减半为最优注射剂量。
3 讨论
从表1亲鱼平均产卵量和表2受精卵孵化结果及分析中可知,2号孵化池孵化率89%,明显高于其他两个孵化池,由此表明,催产剂剂量偏小会导致亲鱼性腺成熟不同期,从而影响产卵量,降低孵化率;催产剂剂量偏高会导致人工采卵过程中的浪费;适宜剂量的催产剂使亲鱼性腺成熟[5]时间集中,便于人工采卵,且卵粒分明,孵化率高。
在环境适宜的情况下,适宜剂量的催产剂能够使方正银鲫受精卵孵化率大大提高。因此在方正银鲫人工孵化过程中正确掌握催产剂的使用剂量是必要的。提高孵化率可采取如下措施:第一,防止外界刺激。受精卵发育初期,受精卵吸水膨胀,卵黄膜和卵膜之间充满水。卵子激活后1h之内是胚胎发育过程的敏感期,如果在此期间环境因子发生突然改变或受到外界刺激,卵黄膜会破裂,从而影响孵化率。第二,掌握孵化密度。孵化池中孵化密度影响水中溶氧和光照,从而影响孵化率。第三,网片的摆放方式。方正银鲫受精卵黏性较大,卵粒不会脱落,因此将网片支起成三角状有利于池水的交换和空间的利用。
参考文献:
[1]孟庆闻. 鱼类学[M]. 上海科学技术出版社,1989,4:21-22.
[2]汪名芳. 异育银鲫的人工繁殖[J].水产科技情报,1991,(5):35-36.
[3]刘迪,王明明. 鲤鱼的人工繁殖与鱼苗培育[J]. 养殖技术顾问,2010,(05):5-16.
[4]崔悦礼,昝瑞光. 滇池高背型鲫鱼雌核发育的研究[J]. 动物学研究,1982, (S2):237-238.
[5]Gui J F, Zhou L. Genetic basis and breeding application of clonal diversity and dual reproduction modes in polyploidy Carassius auratus gibelio[J]. Sci China Life Sci, 2010, 53:409-415.
Test of Artificial breeding from Carassius auratus gibelio
MENG Qi, JIANG Kun, LI Yuqing, XIA Baodong, ZHOU Chengxiang
(1.Bayan County Aquatic Station, Bayan 151899, Heilongjiang China; 2. Bayan County Government of Longquan Town, Bayan 151809, Heilongjiang China; 3. Base of Chengxiang Aquatic seed-breeding in Bayan County, Bayan 151899, Heilongjiang China)
Abstract:The Carassius auratus gibelio is an important breeding object. Heilongjiang Province has many excellent breeding characteristics. May 10, 2020 solstice on June 7, Bayan County in Heilongjiang Province Chengxiang seed-breeding base to carry out the Carassius auratus gibelio artificial breeding experiments, founder by injection of different doses of oxytocin contrast test, found only per kilogram female injection dosage of maleic acid to Europe (DOM)2mg, luteinizing hormone releasing hormone analogue (LRH-A2) 4μg, male mother dose by half, the optimal dose for.
Keywords:Carassius auratus gibelio; Artificial breeding; test
作者簡介:孟琦(1987.10-),女,巴彦县水产总站工程师。主要从事水产技术推广工作。