桂东南地区三种常见鸡病毒性免疫抑制病的血清抗体检测与分析

吕其壮，李佩伦，张成成，覃 婷，陈旭健 *

（1. 玉林师范学院生物与制药学院，广西 玉林 537000；2. 广西农产资源化学与生物技术重点实验室，广西 玉林 537000；3. 玉林市动物疫病预防控制中心，广西 玉林 537000；4. 扬州大学兽医学院，江苏 扬州 225009）

0 引言

【研究意义】近年来，我国养禽业发展势头良好，特别自2018年我国发生非洲猪瘟疫情以来，不少地区的养禽生产形势发生了很大变化，总体呈现稳中向好。尽管如此，我国大部分地区仍有疫苗免疫失败、多种疾病并发或继发感染，以及禽类生长受阻等现象的发生，给我国养禽业造成了严重的经济损失，更打击了许多养殖户的积极性。究其原因，主要是由于鸡群中免疫抑制性疾病的普遍存在。【前人研究进展】常见的禽类免疫抑制性疾病包括禽白血病病毒（ALV）、禽网状内皮组织增生症病毒（REV）、禽呼肠孤病毒（ARV）、鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）、马立克氏病病毒（MDV）、腺病毒和隐孢子虫等，这些免疫抑制性疾病能够损害禽的免疫系统，导致其机体对抗原的应答能力下降，对疾病的敏感性增强，经常合并、继发和加重病毒、细菌和真菌性感染，危害很大，已引起国内外的高度关注[1−6]。【本研究切入点】国内外关于免疫抑制性疾病在鸡群中的感染有很多报道，但在广西壮族自治区尚有待深入探讨。【拟解决的关键问题】为此，本研究对广西东南部的玉林、北流、兴业、博白、容县、陆川、贵港、桂平和平南等地区散养家禽开展了CIAV、REV和ARV病毒抗体的血清学检测，以期为当地鸡群的净化和养殖者在鸡病毒性免疫抑制病的防控提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 样品的采集

2018年3月至2019年4月，分别用一次性真空采血管从玉林、北流、兴业、博白、容县、陆川、贵港、桂平、平南等9个县市送检的疑似免疫抑制性疾病的病鸡（临床表现为生长不良、消瘦、肿瘤、贫血、疫苗免疫应答不佳、脸和冠苍白等，发病前均未免疫接种过以上相关病毒的疫苗）中自鸡翅静脉采血1～3 mL·只−1，分离血清，编号并置于−20 ℃冰箱中保存待测。采样病鸡日龄为10～289日龄 ，品种包括三黄鸡、凉亭鸡和霞烟鸡。

1.2 主要试剂及仪器

CIAV、REV和ARV ELISA抗体检测试剂盒均购 自美国爱德士（IDEXX）公司。

1.3 抗体检测

采用酶联免疫吸附试验方法（ELISA），按照检测试剂盒说明书对所采集的血清样本进行CIAV、R EV和ARV抗体检测，每次检测用样1 μL。

1.4 数据分析

根据Varioskan LUX酶标仪上读取的OD值和各种试剂盒中的检测说明书判断试验有效性，用Excel软件对上述各种病毒性免疫抑制病的感染率和混合感染率，以及各疾病在各季节、各区域和各个生 长阶段的感染率进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 桂东南地区3种常见鸡病毒性免疫抑制病血清抗体的检测结果

采用ELISA方法对所采集的637份血清样品进行了CIAV、REV和ARV病毒抗体的检测，结果有215份抗体阳性，抗体阳性率为33.75%，其中单一感染阳性血清数为162份，单一感染率为25.43%，混合感染阳性血清数为53份，混合感染率为8.32%，表明该地区鸡群中存在CIAV、REV和ARV感染，且以CIAV 感染率最高（23.86%），以ARV 感染率最低（7.06%）（表1）。

表1 3种常见鸡病毒性免疫抑制病的血清抗体检测结果Table 1 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases

2.2 不同日龄鸡的3种常见病毒性免疫抑制病的检测结果

由表2可知，各个生长阶段的鸡群均存在不同程度的感染，40日龄以下的雏鸡感染率2.01%～23.49%，40～140日龄的鸡群的感染率9.26%～24.07%，141～240日龄的鸡群的感染率4.55%～25.00%，240日龄以上鸡群的感染率0～25.00%。

表2 不同日龄鸡群三种常见病毒性免疫抑制病的血清抗体检测结果Table 2 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases at different day ages

2.3 不同季节鸡的3种常见病毒性免疫抑制病的检测结果

由表3可知，3种常见鸡病毒性免疫抑制病在一年四季均可发生，春季的感染率5.15%～28.35%，夏季的感染率8.05%～14.77%，秋季的感染率8.70%～28.99%，冬季的感染率7.05%～22.44%。

表3 不同季节鸡群3种常见病毒性免疫抑制病的血清抗体检测结果Table 3 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases in different seasons

2.4 不同地区鸡的3种常见病毒性免疫抑制病的检测结果

由表4可知，桂东南地区农户散养鸡群中三种常见病毒性免疫抑制病的感染已成普遍趋势，感染率0～40.17%，其中以玉林和北流为代表的养鸡主产区呈现广泛分布，表明这些地区的防控形势依然严峻。

表4 不同生长区域鸡群3种病毒性免疫抑制病的血清抗体检测阳性率Table 4 Positive rates of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases from different areas

2.5 不同品种鸡的3种常见病毒性免疫抑制病的检测结果

本次血清学检测的样品采自桂东南地区的3种常见品种鸡，分别是玉林三黄鸡[7]、容县霞烟鸡[8]和北流凉亭鸡[9]，3种品种鸡的病毒性免疫抑制病的检测结果见表5。结果表明被检测的3种常见病毒性免疫抑制病在不同品种鸡群中均有发生，三黄鸡的感染率8.20%～26.50%，霞烟鸡的感染率5.31～18.58%，凉亭鸡的感染率6.28%～22.71%，可见3种不同品种鸡对鸡的3种常见病毒性免疫抑制病的易感性并无明显差异。

表5 不同品种鸡群3种病毒性免疫抑制病的血清抗体检测结果Table 5 Investigation results of serum antibodies against three common chicken viral immunosuppressive diseases in different chicken breeds

2.6 桂东南地区鸡的3种常见病毒性免疫抑制病混合感染结果

检测结果显示桂东南地区农户散养鸡群中病毒性免疫抑制病呈现混合感染的血清数为53份，占阳性样品的比例为24.65%，其中以二重感染类型为主，二重感染占混合感染样品的比率为66.04%。在混合感染的样品中，以CIAV混合感染其他病原最为常见，占混合感染样品的比例为98.11%（表6），表明CIAV是桂东南地区农户散养鸡群中病毒性免疫抑制病混合感染的主要病原。

表6 三种常见鸡病毒性免疫抑制病混合感染的检测结果Table 6 Investigation results of mixed infection of three common chicken viral immunosuppressive diseases

3 讨论

广西属于亚热带湿润季风气候，拥有发展畜牧业的良好自然条件，其中家禽养殖是广西畜牧业中的传统经营项目，俨然成为广西农业经济中的支柱产业，占整个广西畜牧业产值的三分之一[10]。然而，近年来存在的一些历史和现实的原因严重制约了广西家禽养殖业的正常提速。其中禽免疫抑制性疾病，尤其是病毒性免疫抑制病，就是困扰当前广西养禽业发展的重要原因之一。该类疾病的大面积暴发给广西养殖业造成了巨大的经济损失[11−13]。为了解目前广西地区鸡群中免疫抑制性疾病存在的情况，本试验采用ELISA方法对桂东南地区家禽养殖优势产业区鸡的3种常见病毒性免疫抑制病进行了一次血清学调查，评估了这3种疫病对鸡群的影响。

检测结果显示，桂东南地区的农户散养鸡群中存在病毒性免疫抑制病的感染，其中以CIAV感染率为最高，提示今后该地区应将CIAV作为防控的重点。从感染的类型来看，虽然单一感染率占比25.43%，但混合感染也不容忽视，占比8.32%，且以CIAV+其他病原混合感染类型最为常见。在混合感染的样品中，二重感染占比最高达66.04%，且以“CIAV+REV”双重感染最为常见。从不同日龄、不同季节鸡群的病毒性免疫抑制病检测结果来看，被检测的3种常见鸡病毒性免疫抑制病的发病特点与之前报道的各自的流行病学基本一致[6,13]，总体呈现普遍感染的趋势。值得注意的是，CIAV的混合感染多出现在雏鸡鸡群，ARV的感染多发于40～140日龄，REV的感染多发于春季。其中REV的感染率为13.97%，明显高于石梦雅等[14]针对广西及周边地区地方品种鸡群中REV（2.43%）的调查结果，提示近两年REV呈现暴发趋势，应予以重视，但由于采用的检测方法不同，所以二者之间的具体差异还有待进一步商榷。与此同时，与李桂喜等[15]针对苏、鲁、豫、皖4省的23个县市区的蛋鸡鸡群中肿瘤相关疾病的调查结果（占比4.01%）相比，桂东南地区REV等疫病感染的形势还很严峻，有关这类疫病的防疫仍需持续加强。

从地域分布上看，玉林、北流、容县、贵港和兴业5个市县均检测到了CIAV、REV和ARV的抗体，表明这3种病毒性免疫抑制病在以上5个区域呈现广泛分布，但在博白和桂平两地却未检测到以上3种病毒的抗体，这可能与当地的防疫措施较好有关，也可能与该地区鸡群的养殖密度和采集病料较少有关。从鸡的品种来看，3种常见病毒性免疫抑制病在3种地方品种鸡中基本都存在，不存在明显的种间感染差异。

4 结论

总体来看，3种常见病毒性免疫抑制病在桂东南地区的农户散养鸡群中呈现广泛分布，其中CIAV是主要病原体，且以CIAV与其他病毒组成的混合感染类型为主。因此，无论生产上是否有有效的疫苗，都要重视并加强鸡病毒性免疫抑制病，尤其是CIAV的防治工作。