健神利水方对急性脑出血患者C 反应蛋白、降钙素原的影响研究

高玉广，黄德庆，刘 泰，张元侃，何乾超，刘永辉，莫穷泽

（广西中医药大学第一附属医院，广西 南宁 530023）

自发性脑出血指非创伤性脑内血管破裂，引起脑组织里的血液异常聚集，具有病死率高、致残率高等特点。脑出血发病极为凶险，病程30 d 内死亡率高达35%～52%，即使经过诊治，也仅约有20%的患者在康复期能恢复生活自理能力，给患者带来严重影响［1］。近年来，世界老龄化速度加快，脑出血的发病率也随之升高，在病死率、病残率仍居高不下的背景下，研究其发病机制和治疗靶点进而研发新药和安全有效的治疗措施仍具有非常重要且长远的意义。脑出血相当于中医的“出血性中风”、“中风”范畴，Front Pharmacol 以及Chin J Integr Med 杂志刊登的两项研究表明［2，3］，中药可以治疗脑出血。中药以多环节、多靶点的药理学作用见长而成为脑出血研究的热点之一。在中西医知名专家的共同努力下，中西医结合治疗脑出血的相关研究已经开始获得国内外的认可，并认为中西医结合治疗将开创中国脑出血治疗的新局面，而要达到这个目的首要重点就是推进确有疗效的中药的现代化研究，目前中医治疗脑出血的机制尚不明确，因此，探究中医治疗脑出血的机制对防治脑出血新药开发以及临床运用具有十分重要的意义。C 反应蛋白（C‐reactive protein，CRP）、降钙素原是机体在炎症、感染等反应中产生的一种急性反应蛋白，能敏感反映机体炎症状态。Nature 杂志刊登的一项研究表明，靶向CRP 治疗可以为治疗心脑血管疾病提供新的治疗策略［4］。Deng 等［5］也指出降钙素原可用于评估脑出血的预后。前期研究表明，健神利水方可以治疗脑出血，在改善脑出血急性期患者血液流变性和提高超氧化物歧化酶含量方面有明显作用［6‐8］。本研究选取急性脑出血患者作为观察对象，观察健神利水方对急性脑出血患者CRP、降钙素原的影响，为急性脑出血的治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究纳入病例为2020 年5～10 月在广西中医药大学第一附属医院治疗的患者，根据流行病学数据、临床资料、患者依从性后估算研究样本所需例数为120 例。将患者随机分为两组，每组各60 例。研究过程中，观察组中有1 例患者因为不耐受治疗的药物，对照组中有1 例患者因在治疗期间使用了其他药物均退出本次试验，因此，本次统计分析实际病例数为118 例，脱落病例不再纳入本次统计分析，其中观察组实为59 例，对照组实为59 例。观察组的年龄范围为30～70 岁，平均年龄为（50.6±4.3）岁，病程1～7 h，平均病程（3.3±1.0）h；对照组的年龄范围为33～70 岁，平均年龄为（50.5±3.9）岁，病程1～6 h，平均病程（3.0±1.2）h。两组的一般资料相比，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 诊断标准

中医诊断：中风病诊断符合《中风病诊断疗效评定标准》［9］。主症：言语不清、肢体偏瘫、伸舌歪斜。次症：头晕、头痛、饮水呛咳、共济失调。患者突然起病，多有诱因致病，常有先兆症状。具有1 个主症2 个次症，或者2 个主症以上者纳入，不具备上述条件，结合影像学可确诊。

西医诊断：脑出血诊断标准均符合中华医学会第四次全国脑血管病学术会议制定的诊断标准［9］，经过CT 确诊为脑出血的患者。

1.3 纳入标准

（1）符合以上诊断，不限男女；（2）年龄30 岁以上，70 岁以下；（3）签知情同意书；（4）所有患者经头颅CT 检查证实，且为急性期自发性脑出血。

1.4 排除标准

（1）非急性期或非自发性脑出血者；（2）心脏、肝脏、肾脏器官危重者；（3）患者精神病史者。

1.5 脱落及剔除标准

（1）严重不良事件；（2）疗程未结束中途停止治疗者；（3）依从性差；（4）出现疾病或实验室检查结果恶化；（5）其他原因不依从研究方案。

1.6 治疗方法

对照组：采取常规的西医治疗（生命体征监测、神经系统评估、吸氧、控制血压及血糖、控制体温、止血药物治疗、有外科手术适应证者则采取手术治疗），治疗观察期为4 w。

治疗组：患者在对照组的基础上给予健神利水方（猪苓15 g、茯苓15 g、白术10 g、泽泻10 g、桂枝6 g、三七3 g、丹参15 g），每日1 剂，水煎服，早、晚各1次，治疗观察期为4 w。对于昏迷患者留置胃管，给予鼻饲用药。

1.7 观察指标

1.7.1 神经功能评估 根据脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准［10］，观察两组治疗前和治疗后3、7、14 d 及4 w 治疗的后神经功能的变化。

1.7.2 CRP、降钙素原 患者静脉血抽检，检测入院后（治疗前）和治疗3、7、14 d 及4 w 后两组脑出血患者的CRP、降钙素原值，并比较分析。

1.8 安全性评估

干预前后行血、尿、便检查，肝肾功能、凝血、心电图检查。

1.9 统计学处理

使用统计软件SPSS 22.0 进行统计分析，正态分布的计量资料，两组组间比较，采用t检验；非正态分布计量资料组间比较采用非参数法，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者神经功能缺损评分比较

治疗前，两组患者的神经功能缺损评分差异无统计学意义（P>0.05）。经过治疗后，两组患者的神经功能缺损评分较治疗前下降，且评分随着治疗时间（3 d～4 w）的延长而逐步下降；治疗3 d 后，两组的神经功能缺损评分差异无统计学意义（P>0.05）；治疗7 d、治疗14 d、治疗4 w 后，观察组的神经功能缺损评分均低于对照组，差异具有统计学意义（P均<0.05），见表1。

表1 两组患者神经功能评分比较（分，n=59，±s）Tab 1 Comparison of neurological function scores between the two groups（Score，n=59，±s）

表1 两组患者神经功能评分比较（分，n=59，±s）Tab 1 Comparison of neurological function scores between the two groups（Score，n=59，±s）

注：与对照组比较，△P<0.05。

治疗4 w 后13.11±2.86 11.08±2.97△3.87 0.001组别对照组观察组tP治疗前18.33±3.12 18.45±3.05 0.21 0.83治疗3 d 后16.91±3.24 17.01±3.11 0.71 0.86治疗7 d 后15.42±2.94 14.00±3.04△2.58 0.01治疗14 d 后14.00±3.06 12.50±2.84△2.76 0.007

2.2 两组患者CRP 水平比较

治疗前，两组患者的CRP 水平相比，差异无统计学意义（P>0.05）。经过治疗后，两组患者的CRP 水平较治疗前有所下降，且CRP 随着治疗时间（3 d～4 w）的延长而逐步下降；治疗3 d 后，两组的CRP 水平相比，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗7 d、14 d、4 w 后，观察组的CRP 水平均低于对照组，差异具有统计学意义（P均<0.05），见表2。

表2 两组患者CRP 水平比较（mg/L，n=59，±s）Tab 2 Comparison of CRP between the two groups（mg/L，n=59，±s）

表2 两组患者CRP 水平比较（mg/L，n=59，±s）Tab 2 Comparison of CRP between the two groups（mg/L，n=59，±s）

注：与对照组比较，△P<0.05。

治疗4 w 后9.50±2.85 8.00±2.45△3.06 0.003组别对照组观察组tP治疗前30.5±6.23 29.2±7.41 1.03 0.30治疗3 d 后28.49±5.10 27.95±4.85 0.59 0.56治疗7 d 后22.98±4.32 20.67±5.17△2.63 0.01治疗14 d 后15.50±3.51 14.01±3.83△2.20 0.03

2.3 两组患者降钙素原水平比较

治疗前，两组患者的降钙素原水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）。经过治疗后，两组患者的降钙素原水平较治疗前有所下降，且降钙素原随着治疗时间（3 d～4 w）的延长而逐步下降；治疗3 d后，两组的降钙素原相比，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗7 d、14 d、4 w 后，观察组的降钙素原水平均低于对照组，差异具有统计学意义（P均<0.05），见表3。

表3 两组患者降钙素原水平比较（ng/mL，n=59，±s）Tab 3 Comparison of procalcitonin between the two groups（ng/mL，n=59，±s）

表3 两组患者降钙素原水平比较（ng/mL，n=59，±s）Tab 3 Comparison of procalcitonin between the two groups（ng/mL，n=59，±s）

注：与对照组比较，△P<0.05。

治疗4 w 后53.50±8.67 48.00±8.46△3.49 0.001组别对照组观察组tP治疗前70.1±10.32 69.6±10.40 0.26 0.79治疗3 d 后68.29±9.22 67.95±8.56 0.21 0.84治疗7 d 后65.90±9.36 60.66±9.10△3.08 0.003治疗14 d 后58.51±8.60 54.00±8.72△2.83 0.006

2.4 安全性评价

两组共118 病例均未出现呼吸困难、再次卒中等不良事件，三大常规和肝肾功能检测、凝血检查、心电图均未见明显异常，表明健神利水方的安全性良好。

3 讨论

CRP 与脑出血疾病发生、发展密切相关［11］。脑出血的常见病因是高血压和动脉粥样硬化。高血压会引起血管内皮细胞损伤，血管的弹力降低，当血压急剧升高时可引起血管破裂进而脑出血。近年研究发现，血管功能与内皮的状态紧密相关［12］。CRP 是一种炎症蛋白，能引起内皮功能紊乱［13］，Lib‐by 等［14］在Nature 杂志上发表的一项研究表明，CRP激活内皮细胞、巨噬细胞和中性粒细胞释放内皮素1后，内皮细胞会受损，继而产生CRP，从而形成恶性循环。脑出血发生后，受损的红细胞、白细胞、巨噬细胞和各种血浆蛋白聚集在病灶周围，小胶质细胞、巨噬细胞也随之被激活，大量的炎性因子被释放出来，CRP 在机体内大量合成。本研究结果显示，脑出血发生后，CRP 升高，提示急性脑出血后发生炎症反应，炎症因子增多，但随着治疗时间的延长（3 d～4 w），患者的神经功能缺损评分逐步下降，病情逐渐稳定和好转，CRP 也随着治疗时间的延长而逐步下降，这提示CRP 在脑出血治疗中有助于病情以及预后的评估，可用于脑出血的病情监测。

正常生理状态下，人的血清中降钙素原含量极低，但是在感染发生的6～12 h 内速度升高。血清降钙素原水平可反映细菌感染导致的全身炎症反应的程度，在临床中用于指导抗菌治疗和效果的评估。近年来，血清降钙素原水平用来评估患者非传染性疾病的诊断和预后［15，16］，如脑出血、慢性阻塞性肺疾病。研究表明，即使是非感染的脑出血患者，降钙素原也会升高［17］。本研究结果显示，脑出血发生后，降钙素原急剧升高，但随着治疗时间的延长，降钙素原逐步下降，这提示降钙素原可用于脑出血病情以及预后的评估。

本研究结果显示，治疗7 d、14 d、4 w 后，观察组的神经功能评分、CRP、降钙素原均低于对照组（P<0.05），这提示健神利水方可以改善急性脑出血患者神经功能缺损，减少急性脑出血患者CRP、降钙素原的表达。窑蛋白（caveolin）是caveolae 的主要结构成分，caveolin‐1 是胞膜窖的标志性蛋白，在调节血脑屏障功能中具有重要作用，脑出血后caveo‐lin‐1 主要在血肿周边组织内皮细胞中的表达发生了上调，而caveolin‐1 敲除大鼠在脑出血后脑水肿、神经功能缺损情况、神经元凋亡等均轻于野生型大鼠［18］，在本课题组的前期实验研究［19‐21］中，采用胶原酶建立脑出血大鼠模型，用健神利水颗粒灌胃，测定神经功能，苏木精伊红染色法观察血肿周围脑组织病理学改变以及炎症反应程度，最终发现，健神利水方可以减少实验性脑出血大鼠caveolin‐1 表达，可减轻血肿对神经功能损害并在一定程度上保护神经元细胞，HE 染色的病理切片提示健神利水方还可以减少炎症细胞浸润，减少细胞间隙。上述实验研究从分子生物学角度验证了健神利水方能减少急性脑出血后的炎症反应，与此同时，CRP、降钙素原也随炎症的减轻而减少。

脑出血后病灶发生周围炎症反应，进一步加重脑损伤，健神利水方改善了急性脑出血患者神经功能损害，减少了CRP、降钙素原水平，彰显了中医疗法特色。本研究从临床水平验证了健神利水方对急性脑出血患者神经功能、CRP、降钙素原的影响，但仍需相关动物、细胞水平的实验支持，本项目组组员目前也在积极开展着相关的实验研究（广西教育厅高校中青年教师科研基础能力提升项目），力争为健神利水方治疗脑出血提供更多的实验依据，推进健神利水方在脑出血治疗上的运用与发展，为脑出血的治疗靶点以及开发新药提供新思路和临床依据。

作者贡献度说明：

高玉广：课题的研究思路设计者，相关课题的负责人，制定整体的研究目标；黄德庆：文章的书写和把关，在投稿、同行评审和整个发表流程中负责和期刊沟通；刘泰：广西首届名中医，提供试验场所、实验室、仪器设备等与研究相关的病例来源；张元侃：应用统计学、数学、计算机或其他形式的技术来分析或整合研究数据；何乾超：实施研究和调查过程，专门进行研究或数据/证据收集；刘永辉：脑病科科室副主任，提供研究材料、计算资源或其他分析工具、承担研究活动计划和执行方面的管理和协调责任；莫穷泽：研究生，药品管理，病例随机分组，落实盲法研究，协助完成各组研究方法的进行，并收集数据。