韩欢胜,张金友,王金涛,王 雪
(黑龙江八一农垦大学 动物科技学院,黑龙江 大庆 163319)
狐狸是珍贵毛皮动物,其皮是制裘的高级原料,目前狐皮已成为世界裘皮三大支柱之一。蓝狐是狐狸的一个优良品种,我国从20世纪80年代开始引进养殖,经过近40年的发展,蓝狐已成为国内养殖规模最大的品种。
在经济动物养殖行业中蓝狐养殖具有重要的地位,在我国已形成健全的产业链,为国民经济创造了巨大的经济效益,已成为特种养殖行业的重要组成部分。但繁殖成活率低一直制约着该行业经济效益的增长,亟需解决。繁殖成活率低与母狐年龄、营养、疫病、母性、内分泌、光照、社会地位等因素有关[1-3]。狐是季节性长日照发情动物,繁殖期激素水平变化较大。在繁殖季节末期往往因生殖激素水平低下导致泌乳量少,进而引起产仔率低、死亡率高等相关繁殖问题。因此,激素水平成为影响蓝狐繁殖成活率的重要因素之一[4]。目前,对蓝狐正常妊娠生殖激素水平的相关研究甚少。因此,本研究对繁殖季节发情盛期输精正常妊娠母狐的生殖激素水平进行了测定和分析,为判定正常妊娠生殖激素水平范围和应用外源激素进行生殖调控提供参考依据。
选用发情盛期在3月中旬—4月初,输精且已妊娠的蓝狐。2018年哈尔滨华隆饲料有限公司提供11只,2020年黑龙江肇源农场狐貉养殖小区提供15只,分2次采集血样,测定血液中生殖激素浓度。
蓝狐保定后,在后腿内侧血管进行采血。分别在妊娠第1(即第2次输精时),20,35,50天采集血液3~5 mL,用离心机离心,分离血清,用移液枪将上清液放在EP管中,-20℃保存。送北京北方生物科技研究所对促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和催乳素(PRL)进行检测。
采用SPSS22.0和Excel软件对试验数据进行分析。组间采用单因素方差分析,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著。
见表1。
表1 蓝狐血液中生殖激素浓度测定结果
见图1。
图1 蓝狐血液中FSH、LH动态变化
图1结合表1可知:FSH浓度在蓝狐妊娠期总体呈现先下降后趋于平稳的态势;妊娠第1天达到最高值(2.67±0.38)mIU/mL,第20天下降到最低值(1.87±0.46)mIU/mL;20~50 d尽管有小幅度上升,但妊娠20,35,50天两两比较均差异不显著(P>0.05)。LH水平在妊娠期总体呈阶梯式下降的趋势,前期下降快,后期下降缓慢;妊娠1~20 d下降速度较快,从(10.15±2.93)mIU/mL至(8.25±1.57)mIU/mL;20~35 d LH变化趋于平缓(P>0.05);35~50 d也较为平缓(P<0.05)。这表明FSH和LH在妊娠期1~20 d下降较快,之后基本保持在恒定水平。
见图2。
图2 蓝狐血液中E2动态变化
图2结合表1可知:E2浓度在蓝狐妊娠1~20 d下降了29.53%,20~35 d期间下降了14.12%,35~50 d下降了58.69%,4个日期E2浓度两两比较均差异极显著(P<0.01)。这表明蓝狐发情盛期输精正常妊娠E2浓度在妊娠期呈明显的下降趋势。
见图3。图3结合表1可知:P浓度在蓝狐妊娠1~20 d下降了21.62%,差异显著(P<0.05);妊娠20~50 d期间下降速度较快,其中20~35 d下降了77.01%,35~50 d下降了85%,两两比较均差异极显著(P<0.01)。这表明蓝狐发情盛期输精正常妊娠P浓度在妊娠期呈明显的下降趋势。
图4结合表1可知:PRL浓度在蓝狐妊娠1~20 d、35~50 d上升速度较快,两阶段分别上升18.01%和19.77%,第20,35天与第1,50天均差异极显著(P<0.01);20~35 d保持恒定水平,差异不显著(P>0.05)。这表明蓝狐发情盛期输精正常妊娠PRL妊娠期呈阶梯式增长。
图4 蓝狐血液中PRL动态变化
雌性动物繁殖是一个复杂的过程,卵子发生、卵泡发育、排卵,以及发情、受精、妊娠、分娩等周期性生理变化都受各种生殖激素协同作用。大多数野生动物发情排卵呈现出明显的季节性,排卵的启动主要与环境因素、光照种类和照射的时间有关,光照时间改变时刺激下丘脑释放促性腺激素释放因子,后者促进垂体释放FSH和LH,导致滤泡增殖并释放雌激素,雌激素又通过神经元支配动物出现发情排卵和交配行为[2]。
狐狸属于长日照单次发情动物,繁殖也呈现出明显的季节性。蓝狐发情排卵启动是在春分前后,光照由短日照向长日照过渡时发生。狐狸又是多胎动物,卵泡发育、排卵是连续性的,此时卵泡发育和排卵主要由FSH、LH和E2协同作用。本试验中,妊娠第1天(即第2次输精时)FSH、LH和E2水平最高,证实此时蓝狐正处于卵泡发育和排卵的高峰期,本试验结果与理论相符。
PRL主要功能是促进乳腺的增生、乳汁的生成和排乳[5]。在非哺乳期PRL水平较低,分娩前PRL快速升高。另外,过多的PRL可抑制FSH及LH的分泌,这与本试验研究相符。
大多数哺乳动物,如牛胚胎着床后一般妊娠第23天羊膜囊扩展,与母体建立起紧密联系[5],此时起主要作用的激素应是P。理论上妊娠期P水平是一个先升高后降低的过程,但本试验结果显示妊娠第1天的P水平却高于第20天,没有逐渐升高的趋势,出现了一种有违常理的现象。其原因可能有:(1)激素检测有误,但本试验同时测定5种生殖激素浓度,其他激素水平正常,激素检测有误可能性小;(2)狐狸属于季节性单次发情动物,可能激素调控与常年发情动物有所差别,激素协同作用,关系复杂;(3)狐狸是多胎动物,卵泡发育、排卵、成熟是一个连续的过程,蓝狐发情期内一般连续3~4次输精,实际生产中一般把第2次输精时计为妊娠第1天,此时输精后有的卵子已受精,有的卵子还处于发育成熟阶段。卵子的发育、成熟阶段雌激素起主要调控作用,而P要在雌激素作用下才能发挥其作用,且P对垂体LH的分泌有反馈作用,P达到一定水平时可以抑制动物的发情与排卵。本试验妊娠第1天实际上仍有一些卵子在发育、成熟,但此时处于排卵后期,激素的协同作用应是抑制蓝狐的发情与排卵,起主要抑制作用的应是P,可能此时期P水平高与妊娠第1天判定的时间有关。今后有待对妊娠1~20 d的激素水平进行进一步的检测研究。
本试验结果表明,在蓝狐发情盛期输精正常妊娠时生殖激素FSH和LH在1~20 d下降速度较快,之后基本保持在恒定水平;在整个妊娠期E2和P均呈明显的下降趋势,而PRL呈阶梯式增长趋势。本试验结果可为判定蓝狐妊娠期生殖激素水平的正常变动范围和应用外源激素进行生殖调控提供参考依据。