EmAb、ACA及PDW联合检测在复发性流产临床诊断中的应用价值

韦志萍 林忠

作者单位：广西中医药大学，广西，南宁530022

美国生殖医学学会对复发性流产的定义是：指连续出现2 次及2 次以上妊娠丢失［1］。目前，部分复发性流产的病因尚未明确，消除复发性流产给患者带来的困扰，确保产妇顺利生产是当前临床面临的难题。有学者研究指出，产妇自身抗体水平异常与复发性流产的发生存在密切联系，抗子宫内膜抗体（Anti⁃endometrial antibody，EmAb）、抗心磷脂抗体（Anticardiolipin antibody，ACA）均为自身抗体群，可抑制前列腺素生成，激活血小板的作用，当血液处于高凝状态时，会引发胎盘功能不足，导致对胎儿供氧不足，最终引发胎儿死亡［2⁃3］。血小板分布宽度（Platelet distribution width，PDW）是反映血小板活化程度、血栓进展程度的重要指标［4］。本研究以分析EmAb、ACA 及PDW 联合检测在复发性流产临床诊断中的应用价值。现研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年7月至2020年6月本院收治的106 例复发性流产产妇作为观察组。纳入标准：①均符合《复发性流产诊治的专家共识》［5］，经B超检查确定为流产，且自然流产次数在2 次以上；②夫妇染色体核型分析正常；③生殖内分泌激素水平正常范围内。排除标准：①合并系统性红斑狼疮、多发性肌炎等自身免疫性疾病者；②合并妊娠糖尿病、高血压等影响EmAb、ACA 及PDW水平的疾病者；③生殖器官感染或畸形。

选取同期在本院进行孕检的健康女性106 例设为对照组，入选孕妇均否认自然流产史，无自身免疫性疾病。2 组产妇一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。本研究经医院伦理委员会批准通过，研究对象均签署知情同意书。

表1 2 组患者基线资料比较（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

表1 2 组患者基线资料比较（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 106 106自然流产产次（次）2.01±0.22--平均年龄（岁）25.41±3.31 25.48±3.39 0.152 0.879体质质量指数（kg/m2）26.08±2.31 26.12±2.37 0.124 0.901停经时间（周）10.38±0.95 10.31±0.90 0.551 0.582---

1.2 方法

1.2.1 PDW 水平检测方法

对照组于体检当日清晨空腹采取肘静脉血5 mL，观察组患者于入院当日清晨空腹采取肘静脉血5 mL。乙二胺四乙酸二钾抗凝，室内质控品恢复至室温。采用日本希森美康医用电子有限公司生产的全自动血细胞分析仪（型号：SysmexXN⁃1000）检测PDW 水平，配套试剂盒购自希森美康医用电子有限公司（批号20190322）。PDW 参考范围值：9～13（%）［6］。

1.2.2 ACA 及EmAb 水平检测方法

采用化学发光法检测2 组血清ACA 水平，试剂盒购自北京源德生物医学工程有限公司，所有操作严格按照试剂盒说明书进行。应用ELISA 对2 组血清EmAb 水平检测，试剂盒购自郑州安图生物工程有限公司，所有操作严格按照试剂盒说明书进行。应用波长为450nm 的酶标仪对实验孔光密度值（Optical density value，OD）进行测定，当OD 值大于或等于l 临界值则可判断为阳性，反之则判断为阴性［7］。

1.3 观察指标

比较2 组EmAb、ACA 及PDW 表达情况，并比较不同流产次数的产妇血清mAb、ACA 及PDW水平；分析EmAb、ACA 及PDW 表达水平与流产次数的关系。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0 软件进行数据统计分析，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；计量资料采用（）表示，组间比较行t检验；多组间比较行F检验；绘制ROC 曲线，并计算ROC 曲线下面积等指标，以分析EmAb、ACA 及PDW 检测及三者联合检测对妊娠期妇女发生复发性流产的预测价值；以P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2 组EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较

观察组EmAb 及ACA 阳性表达率高于对照组，PDW 表达水平高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 2 组EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

表2 2 组EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

组别观察组对照组t/χ2值P 值n 106 106阴性57（53.77）96（90.57）阴性62（58.49）100（94.34）--EmAb阳性49（46.23）10（9.43）35.721<0.001 ACA阳性44（41.51）6（5.66）37.794<0.001 PDW（%）16.41±3.89 11.23±2.09 12.077 0.001

2.2 观察组不同流产次数EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较

EmAb、ACA 阳性表达率：流产4 次>流产3 次>流产2 次，PDW 表达水平：流产4 次>流产3 次>流产2 次，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 观察组不同流产次数EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

表3 观察组不同流产次数EmAb、ACA 及PDW 表达情况比较［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

注：与流产3 次比较，aP<0.005。

次数2 次3 次4 次F/χ2值P 值例数（n=106）31 40 35 EmAb阳性（n=49）2（4.08）13（26.53）34（69.39）a 4.457 0.035阴性（n=57）29（50.88）27（47.37）1（1.75）阴性（n=62）30（48.39）32（51.61）0（0.00）--ACA阳性（n=44）1（2.27）8（18.18）35（79.55）a 8.634 0.003 PDW（%）15.62±1.89 17.45±2.08 19.22±2.33a 23.850<0.001

2.3 EmAb、ACA 及PDW 检测及三者联合检测对妊娠期妇女发生复发性流产的预测价值

ROC 曲线分析结果显示：EmAb、ACA、PDW 单独

及三者联合检测曲线下面积分别为0.878、0.834、0.855、0.945，各指标曲线下面积以联合检测最大（P<0.005），见表4 及图1。

表4 EmAb、ACA 及PDW 检测及三者联合检测对妊娠期妇女发生复发性流产的预测价值Table 4 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

图1 EmAb、ACA 及PDW 检测及三者联合检测对妊娠期妇女发生复发性流产的预测价值Figure 1 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

3 讨论

复发性流产是育龄期女性不育疾病中的顽疾，染色体因素、内分泌因素、感染因素、生殖器解剖等多种因素均会引发复发性流产。随着广大学者对复发性流产作用机制研究的不断深入，目前认为复发性流产患者存在潜在的自身免疫功能的失调，因此复发性流产也称为“亚临床自身免疫疾病”［8］。

有学者研究报道，ACA 是引起反复流产、死胎、妊娠高血压疾病和胎儿宫内生长受限等最主要的自身抗体［9］。本研究中，观察组ACA 阳性表达率明显高于正常孕妇，流产4 次的患者ACA 阳性表达率明显高于流产2 次及流产3 次的患者，这一研究结果与既往文献报道结果一致［10⁃11］。ACA是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体，位于细胞膜脂质双层的内层，能够避免被免疫系统所识别［12］。ACA 激活血小板的活性，促使血小板黏附、聚集，并释放出血栓素A2 引起血小板凝聚，最终形成血栓，同时ACA高表达还会促使胎盘血管收缩和血栓形成，胎盘的血流量减少，致使胎儿氧供不足而死亡［13］。可见，ACA 可作为检测不良妊娠结局的重要指标。

PDW 是反映血小板大小分布的指标，通过形态及功能而发生变化，是血小板活化的特异性标志物［13］。已有较多文献报道，PDW 与心脑血管疾病、糖尿病等代谢性疾病的发生有着密切联系［14］。Shukla 等学者［15］报道，在复发性流产患者，PDW 表达水平会明显高于正常孕妇，且PDW 表达量会随着患者流产次数增加而提高，这一研究结果与本研究结果一致。

本研究经采用ROC 曲线分析流产次数与EmAb、ACA 及PDW 检测及三者联合检测对妊娠期妇女发生复发性流产的预测价值，结果显示各指标曲线下面积以联合检测最大，这一研究结果与Ransing 等学者［16］报道结果一致。EMAb 存在于子宫内膜中，是一种特异性的自身抗体，子宫内膜是胚胎着床及发育的重要场所，内膜的功能直接影响孕妇的妊娠情况［17］。可见尽早对妊娠期妇女加强EmAb、ACA 及PDW 联合检测，可预测其妊娠结局，有利于临床尽早确定针对性的诊治方案，从而改善妊娠结局。

综上所述，复发性流产次数越多，则妊娠期妇女血清AcA、EMAb、PDW 水平越高。血清AcAb、EMAb、PDW 水平检测对孕早期复发性流产的诊断具有重要临床意义，三者可作为预测复发性流产的敏感性指标。复发性流产病因非常复杂，且尚未有明确定论，后续笔者将扩大样本量，研究其他免疫性因素与该病之间的关系，以进一步完善基础研究及临床实践研究，为临床疗效治疗提供理论依据。